Online трансляция


Международный Офтальмологический Конгресс
Белые Ночи

Онлайн трансляция симпозиумов
Белые Ночи

с 27 по 31 мая 2019 года г.
Санкт-Петербург

Трансляция проводится из трех залов:

Зал «Стрельна»

Зал «Чаплин»

Зал «Санкт-Петербург»


X Международная конференция по офтальмологии
Восток–Запад 2019



6-7 июня 2019, г. Уфа


Партнеры


Ziemer Optec Bausch + Lomb thea Allergan Фокус santen sentiss NIDEK
 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:617.735:616.145.154-005.6

Экспериментальное обоснование фотоиндуцированной модели тромбоза ветви центральной вены сетчатки


1Калужский филиал «НМИЦ МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ
2НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ

В настоящее время одной из важнейших медико-социальных проблем офтальмологии является патология сетчатки, приводящая к значительному снижению зрения, слепоте и инвалидности [4].

Тромбозы ретинальных вен являются вторыми по частоте встречаемости среди сосудистых заболеваний глаза. Их распространенность составляет около 2,14 на 1000 чел. в возрасте старше 40 лет и 5,36 на 1000 чел. в группе старше 64 лет [24]. При этом частота встречаемости окклюзий ветвей центральной вены сетчатки (ЦВС) (4,42 на 1000 чел.) значительно превышает распространенность окклюзии ЦВС (0,8 на 1000 чел.) [2-4]. Тромбозы сосудистых аркад опасны не только быстрой потерей зрения, но и развитием тяжелых осложнений (кистозная макулярная дегенерация, ретинальная неоваскуляризация, вторичная неоваскулярная глаукома) [4].

В настоящее время ни один из имеющихся методов лечения тромбозов ретинальных вен (консервативный, лазерный, хирургический) не гарантирует пациенту благоприятный исход процесса [7, 9].

Разработка новых методов лечения, а также оценка их эффективности возможны только в условиях эксперимента, поэтому актуальным является создание адекватных моделей тромбозов ветвей ЦВС.

Существующие на сегодняшний день экспериментальные модели, получаемые лазерными и хирургическими способами, сопровождаются высокой травматичностью, высоким риском осложнений, отличаются низкой воспроизводимостью и преходящим характером тромбоза [8, 11, 13-17, 19].

Цель

Разработать и экспериментально обосновать фотоиндуцированную модель тромбоза ветви центральной вены сетчатки.

Материал и методы

Экспериментальное моделирование тромбоза ветви ЦВС выполнено на 10 кроликах (10 глаз) породы шиншилла весом 1,5-2 кг.

В эксперименте использовали фотосензибилизатор (ФС) хлоринового ряда, препарат «Фотодитазин» (бис-N-метилглюкаминовая соль хлорина e6). Фотодинамическое воздействие осуществляли на лазерном офтальмо-микрохирургическом комплексе «АЛОД-Алком» («Алком-Медика», Санкт-Петербург) с длиной волны 662 нм.

Животным внутривенно вводили ФС в дозе 2,5 мг/кг веса. Через 15 мин (время, достаточное для максимального накопления ФС в сосудах сетчатки по данным флуоресцентной диагностики [1]) транспупиллярно проводили лазерное облучение ретинальных сосудов на выходе из диска зрительного нерва с плотностью энергии 200 Дж/см2.

Диаметр пятна лазерного излучения составлял 3,0 мм, что соответствует двум диаметрам диска зрительного нерва (ДЗН) кролика.

Методы обследования включали офтальмоскопию с фоторегистрацией, флуоресцентную ангиографию, оптическую когерентную томографию (ОКТ) («Stratus OCT3000», «Carl Zeiss», Германия). Срок наблюдения с последующим выведением из эксперимента — через 30 мин после фотодинамического воздействия, на 1, 3, 7 и 14 сутки.

Для проведения морфологических исследований энуклеированные глазные яблоки фиксировали в растворе нейтрального формалина, подвергали макромикроскопическому препарированию, затем промывали проточной водой, обезвоживали в спиртах восходящей концентрации и заливали в парафин, выполняли серии меридиональных гистологических срезов с применением окраски гематоксилин-эозином.

Препараты изучали под микроскопом фирмы Leica DM LB2 при x50, х200, х400-кратном увеличении с последующим фотографированием.

Результаты

Через 30 мин после фотодинамического воздействия офтальмоскопически отмечали сужение артерии, расширение, извитость и напряжение пораженной вены; вдоль сосудистой аркады — множественные интраретинальные штрихообразные кровоизлияния; отек перипапиллярно по ходу сосудистой аркады и в центральной зоне сетчатки; границы диска зрительного нерва слегка смазаны за счет отека.

К первым суткам количество геморрагий увеличилось, отмечалось большое число экстравазатов вокруг пораженного сосуда, отек тканей усиливался. На 3-и сутки число геморрагий и экстравазатов уменьшалось, отек тканей нарастал и достигал пика. Тромбированная ветвь была полнокровной, имела патологическую извитость, четкообразность, темную окраску, отмечалось появление микроаневризм, расширение капиллярной сети.

К 7-м суткам наблюдали дальнейшее уменьшение геморрагий и экстравазатов, вена сохраняла патологическую извитость, неравномерный калибр и темную окраску, соответствующая артерия имела прямолинейный ход, была сужена, отмечался симптом «серебряной проволоки», отек тканей уменьшился.

К 14-му дню кровоизлияния частично рассасывались, однако отек сетчатки над пораженной аркадой и центральной зоной сохранялся, что подтверждалось данными ОКТ.

После энуклеации результаты были подтверждены при макромикроскопическом препарировании глаз животных (рис. 1).

По данным флуоресцентной ангиографии на 1 сутки после моделирования выявлялось отсроченное заполнение контрастом окклюдированного венозного сосуда по сравнению с другими ветвями ЦВС, кровоток в поврежденном сосуде был резко затруднен, в области формирования тромба сосудистая стенка прокрашивалась контрастным веществом, отмечалось удлинение венозной перфузии, неравномерное контрастирование вен.

К 3-м суткам окклюдированный сосуд не заполнялся контрастом и выглядел темным, тогда как остальные ветви ЦВС были заполнены флюоресцеином, отмечалось сужение артерий, отсутствие нормального ветвления. В бассейне пораженного сосуда отмечалось отсутствие перфузии в капиллярах сетчатки, на границах зон ишемии капилляры были резко расширены и имели вид «обрубков», что особенно хорошо проявлялось на 7-е сутки наблюдения. В этих же зонах выявлялись капиллярные аневризмы, отмечался выход флюоресцина за пределы сосуда. В поздних фазах наблюдался гиперфлюоресценция ДЗН и в зонах отека сетчатки, перфузия в перифовеолярных капиллярах была нарушена.

По данным ОКТ в 1-е сутки отмечалось увеличение толщины сетчатки на 60-70 мкм — в среднем до 199 мкм (толщина интактной сетчатки — до 132 мкм), определялись участки серозной отслойки нейроэпителия парапалиллярно (высотой до 357 мкм), а также множественные преретинальные и интраретинальные кровоизлияния. При исследовании на 3-и сутки зон экссудативной отслойки нейроэпителия выявлено не было, однако сохранялся диффузный отек сетчатки (высотой до 190 мкм). На 7-е сутки после эксперимента происходила полная резорбция отека. Через 2 недели начинал формироваться неравномерно пигментированный хориоретинальный атрофический очаг.

Результаты морфологических исследований. На первые сутки в гистологических препаратах отмечали выраженный отек ДЗН и перипапиллярных участков сетчатки, полнокровие всех сосудов этой зоны, способствующее агрегации форменных элементов крови с явлениями сладж-синдрома. В поверхностных венулах наблюдали значительное повышение проницаемости сосудистой стенки, что привело к диапедезным кровоизлияниям без нарушения целостности сосудов. Свободные эритроциты оседали с формированием мелких кровоизлияний в кортикальных слоях стекловидного тела глаза, но основная масса их пропитывала сетчатку, усугубляя ее структурные нарушения (рис. 2).

К 3 суткам явления отека нарастали, особенно он был выражен в начальном отрезке зрительного нерва, но кровоизлияния носили очаговый поверхностный характер, в основном в слое нервных волокон перипапиллярной сетчатки. Сладж-синдром перешел в тромбоз крупных сосудов, в ЦВС на месте разрушенного эндотелия отмечали отложение фибрина, скопление лейкоцитов с формированием пристеночного «красного» тромба из-за обильного пропитывания эритроцитами.

В венулах тромбирование было неравномерным, было выявлено чередование с сохранением просвета сосуда и появлением в стенках «сосудистых почек» — развитие неоваскуляризации (рис. 3).

К 7 суткам количество новообразованных сосудов увеличивалось.

На фоне неравномерного тромбирования и частичной облитерации мелких сосудов на внутренней поверхности сетчатки они сохранялись в ее толще, особенно в отечной части слоя нервных волокон оптикоганглионаров «зрительной лучистости» вблизи ДЗН. Недосформированность стенки новообразованных сосудов приводила к появлению мелких диапедезных экстравазатов (рис. 4).

По истечении двух недель пролиферативные процессы сменялись инволютивными. Отмечено сохранение неравномерной отечности, очаговый глиоз сетчатки, замещение фиброзной тканью участков деструкции оболочек и зрительного нерва с тенденцией к формированию хориоретинального рубца.

Обсуждение

Модели тромбозов ветвей ЦВС обычно создавали при помощи высокоинтенсивной лазеркоагуляции и изучали на них вопросы патогенеза и ангиогенеза, а также разрабатывали некоторые методы лечения этой патологии [13-16]. Однако процесс создания этих моделей сопровождался высоким риском интравитреальных кровоизлияний, получить тромбоз ветви вены удавалось лишь в 50% случаев, кроме того, он носил преходящий характер. Создание моделей с использованием хирургических методов также сопровождалось осложнениями (выраженная экссудация, отслойка сетчатки, интравитреальные геморрагии) и требовало высокой квалификации хирурга [17, 19].

На наш взгляд, для создания модели тромбоза ветви ЦВС целесообразно использовать фотодинамический эффект, основой которого выступает индуцированное фотохимическое повреждение клеток эндотелия сосудов, приводящее к стазу и агрегации клеток с последующей окклюзией [10, 18]. Исходя из этого, получение тромбоза с использованием фотодинамического воздействия является патогенетически обоснованным в сравнении с ранее существующими методиками, так как механизм формирования тромба в естественных условиях связан именно с повреждением эндотелиальных клеток без нарушения целостности сосудистой стенки.

При проведении фотодинамического воздействия ключевым моментом является выбор ФС [5, 6, 12].

Наиболее перспективными являются отечественные препараты хлоринового ряда. Данные ФС отличаются высокой фотодинамической активностью в малых дозах, высоким контрастом накопления в тканях, низкой фототоксичностью, быстрой элиминацией из организма.

В наших исследованиях мы получили фотоиндуцированную модель, что офтальмоскопически проявлялось картиной тромбоза ветви ЦВС уже в первые сутки после воздействия. В течение следующих дней картина нарастала и достигала пику к третьему дню. Затем наблюдалось частичное рассасывание кровоизлияний с формированием микроаневризм. На всех сроках наблюдения отмечался отек сетчатки различной степени выраженности.

Наличие отека сетчатки вокруг ДЗН и в зоне проекции макулы подтверждалось методом ОКТ. Следовательно, клиническая картина полученной модели полностью соответствует клиническим проявлениям тромбоза ветви ЦВС, что указывает на адекватность и легковоспроизводимость полученной модели.

Ангиографически показано нарушение кровотока в поврежденных сосудах, а к 3-м суткам — полное отсутствие их контрастирования. Отмечается прокрашивание окружающих тканей, что указывает на отек сетчатки, а в последующем — наличие темных зон ишемии сетчатки и формирование микроаневризм. Таким образом, ангиографическая картина полученной модели подтверждает формирование тромба в зоне фотодинамического воздействия, что также свидетельствует об адекватности полученной модели.

Гистологически также подтверждено тромбообразование в ЦВС с динамическими особенностями этого процесса. Уже на первые сутки были отмечены предрасполагающие факторы (повреждение эндотелия, сладж-синдром, повышенная проницаемость сосудистой стенки, отек), способствующие агглютинации тромбоцитов и коагуляции фибриногена. Далее усиливалось пристеночное внутрисосудистое прикрепление тромба, отмечено появление дополнительных фиброзных структур, оседание на них форменных элементов крови, все больше перекрывающих просвет сосуда. Эти процессы сопровождались отеком и ишемическими изменениями в близлежащих оболочках с компенсаторным развитием неоваскуляризации. Данная морфологическая картина полностью подтверждала наличие тромба, формирование и строение которого соответствует патогенезу образования тромба в естественных условиях.

Заключение

Посредством офтальмоскопии, оптической когерентной томографии, флуоресцентной ангиографии и гистологических исследований доказано, что полученная нами модель является моделью тромбоза ветви ЦВС. Достоинствами этой модели выступают дозируемость, адекватность, легковоспроизводимость, малотравматичность и патогенетическая обоснованность. Кроме того, методика отличается своей относительной неинвазивностью, что также является ее достоинством.

Метод дозированного и избирательного фотодинамического воздействия позволит моделировать исходы структурных изменений в глазном яблоке при тромбозе ЦВС: компенсировать это состояние, вызвав реканализацию тромба, или необратимостью процессов привести к субатрофии глаза, что требует расширения задач эксперимента.

Мы полагаем, что использование данной модели является перспективным и целесообразным при создании и изучении новых методик лечения тромбоза ветвей ретинальных вен, а также для изучения различных вопросов патогенеза данного заболевания.


Страница источника: 54


Новые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно-практическая конференцияНовые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии – 2019 ХVII Всероссийская научно-практическаяконференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии –...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО

VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)

XVII Всероссийская школа офтальмологаXVII Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018 ХVI Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научн...

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Top.Mail.Ru


Open Archives