Онлайн доклады

Онлайн доклады

Новейшие и инновационные подходы в медико-хирургическом лечении глаукомы

Международный вебинар по глаукоме в области медико-хирургического лечения

Новейшие и инновационные подходы в медико-хирургическом лечении глаукомы

Белые ночи - 2020 Сателлитные симпозиумы в рамках XXVI Международного офтальмологического конгресса

Белые ночи - 2020 Сателлитные симпозиумы в рамках XXVI Международного офтальмологического конгресса

Новые возможности оборудования NIDEK для диагностики патологии глазного дна

Новые возможности оборудования NIDEK для диагностики патологии глазного дна

Новые технологии лазерной рефракционной хирургии

Новые технологии лазерной рефракционной хирургии

Лечение глаукомы: Инновационный вектор

Конференция

Лечение глаукомы: Инновационный вектор

Роговица IV. Диагностика и лечение. Научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Роговица IV. Диагностика и лечение. Научно-практическая конференция с международным участием

«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической  конференции офтальмологов

Конференция

«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической конференции офтальмологов

ХVII Ежегодный конгресс  Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»

Конгресс

ХVII Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференция

Конференция

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференция

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»

Симпозиум

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3D

Симпозиум

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3D

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»

Симпозиум

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»

«Живая хирургия» компании «НанОптика»

«Живая хирургия» компании «НанОптика»

Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019

Конференция

Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Новейшие и инновационные подходы в медико-хирургическом лечении глаукомы

Международный вебинар по глаукоме в области медико-хирургического лечения

Новейшие и инновационные подходы в медико-хирургическом лечении глаукомы

Белые ночи - 2020 Сателлитные симпозиумы в рамках XXVI Международного офтальмологического конгресса

Белые ночи - 2020 Сателлитные симпозиумы в рамках XXVI Международного офтальмологического конгресса

Новые возможности оборудования NIDEK для диагностики патологии глазного дна

Новые возможности оборудования NIDEK для диагностики патологии глазного дна

Новые технологии лазерной рефракционной хирургии

Новые технологии лазерной рефракционной хирургии

Лечение глаукомы: Инновационный вектор

Конференция

Лечение глаукомы: Инновационный вектор

Роговица IV. Диагностика и лечение. Научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Роговица IV. Диагностика и лечение. Научно-практическая конференция с международным участием

«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической  конференции офтальмологов

Конференция

«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической конференции офтальмологов

ХVII Ежегодный конгресс  Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»

Конгресс

ХVII Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференция

Конференция

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференция

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»

Симпозиум

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»

«Живая хирургия» компании «НанОптика»

«Живая хирургия» компании «НанОптика»

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3D

Симпозиум

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3D

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»

Симпозиум

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»

Все видео...
 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:617.7-007.681

Интраоперационная профилактика рубцевания при моделировании непроникающей глубокой склерэктомии в эксперименте in vivo


1Российская академия наук
2НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава РФ

     Прогрессирующие дистрофические процессы склеры при глаукоме способствуют грубому избыточному рубцеванию хирургически сформированных путей оттока и, как следствие, приводят к повышению офтальмотонуса в разные сроки после антиглаукомных операций (АГО) [3]. Декомпенсация внутриглазного давления (ВГД) обусловливает необходимость проведения повторных хирургических вмешательств. Проблема избыточного рубцевания обусловливает необходимость изучения контроля фибропластических процессов в послеоперационной ране. С целью подавления пролиферации фибробластов в клинической практике наиболее часто используются цитостатики (антиметаболит 5-фторурацил и противоопухолевый антибиотик митомицин-С) [2, 10, 14]. Однако эти препараты обладают токсическим действием на все активно пролиферирующие клетки, и именно с этим связаны такие серьезные осложнения, как кератопатия (50-55%), формирование кистозных подушек, несостоятельность швов и формирование наружных фистул (36-38%), геморрагическая цилиохориоидальная отслойка (5-9%) и, как следствие, хроническая гипотония, гипотоническая макулопатия, поздний эндофтальмит из-за длительного заживления послеоперационной раны (1-2%) [11, 12].
    В этой связи актуален поиск естественных регуляторов фибробластического процесса в ране. В последнее время активно развивается направление в изучении и применении цитокинов или антител к ним, а также сульфатированных гликозаминогликанов [1, 8].
    Гликозаминогликаны (ГАГ) являются компонентами клетки, клеточных мембран, экстрацеллюлярного матрикса [5]. Они — естественные компоненты любой ткани и в зависимости от локальной концентрации, качественного состава могут регулировать процессы воспаления и заживления раны, в том числе склеральной.
    Гликозаминогликаны представляют собой неразветвленные полисахаридные цепи, состоящие из повторяющихся дисахаридных единиц, одна из которых является аминосахаром, который в большинстве случаев сульфатирован, другая является уроновой кислотой.
     Сульфатированные гликозаминогликаны (сГАГ) — полианионные соединения, за счет этого они регулируют обменные процессы в брадитрофных тканях, могут менять конформацию различных молекул, тем самым определяя их активность и регулируя продукцию цитокинов, созревание клеток воспалительного ряда. При репаративных процессах сГАГ регулируют агрегацию молекул коллагена, определяют длину, диаметр и ориентацию фибрилл [5, 9, 16].
    В последнее время ведутся исследования по применению гликозаминогликанов в антикоагулянтной терапии, онкологии, неврологии, при лечении остеоартритов, васкулитов, также их активно используют для ранозаживления [13, 15, 17].
    Сульфатированные ГАГ используются в качестве компонентов препаратов с ростподавляющим действием для лечения таких серьезных заболеваний, как опухоли соединительной ткани [18].
    В офтальмологии разработаны препараты на основе хондроитин сульфатов: глазные капли «Баларпан» (ООО «НЭП «Микрохирургия глаза», Россия), стимулирующие регенеративные процессы роговицы; вископротекторы Оквис 0,3%, Оквис 2% (ООО «Дубна-Биофарм», Россия), обладающие противоотечным и противовоспалительным действиями [1]; вископротекторы «Дисковиск», «Вискот» (Алкон, США), защищающие ткани глаза во время операции и ускоряющие процесс заживления.
    Сотрудниками ООО «НЭП «Микрохирургия глаза» была разработана смесь кератан сульфата и хондроитин сульфатов, выделенная по оригинальной технологии из прозрачных роговиц свиней, которые по физиологическим характеристикам близки роговице человека. В эксперименте in vitro на культуре фибробластов были изучены функции различных концентраций данной смеси сГАГ в двух формах — растворе и геле. По результатам эксперимента был выявлен бимодальный эффект смеси сГАГ, при этом высокие ее концентрации обладают антипролиферативными свойствами [6, 7].
    
    Цель
    Экспериментально-морфологическое обоснование антипролиферативного эффекта смеси сульфатированных гликозаминогликанов при ранозаживлении склеры на модели непроникающей глубокой склерэктомии у кроликов.
    
    Материал и методы
    Эксперимент был выполнен на 28 глазах лабораторных животных (14 половозрелых кроликов породы Шиншилла весом 2,5-3,5 кг). Животные были разделены на одну опытную (10 глаз) и две контрольные группы (по 9 глаз в каждой группе).
    Всем животным в условиях операционной под наркозом было произведено иссечение глубоких слоев склеры по типу непроникающей глубокой склерэктомии (НГСЭ), что послужило моделью для фибробластических процессов в склеральной ране. Полноценную операцию НГСЭ с функциональным эффектом провести у кроликов не представляется возможным из-за различий в строении дренажной системы и неполноценного Шлеммова канала (вследствие этого отсутствует биодеградирующее влияние водянистой влаги на сформированную интрасклеральную полость).
    В опытной группе (10 глаз) интраоперационно под поверхностный склеральный лоскут вводилась 1,0%-ная смесь сГАГ на вязком носителе (2% гидроксипропилметилцеллюлозы — 2% ГПМЦ) для обеспечения пролонгированного эффекта [7].
    В первой контрольной группе (9 глаз) не вводились экзогенные вещества.
    Во второй контрольной группе (9 глаз) интраоперационно под поверхностный склеральный лоскут вводилась 2%-ная ГПМЦ без добавления смеси сГАГ.
    Животных выводили из эксперимента путем воздушной эмболии через 1, 3, 6 недель после операции. Глазные яблоки энуклеировали. Затем после фиксации в растворе нейтрального формалина подвергали стандартной обработке с обезвоживанием и обезжириванием в спиртах восходящей концентрации, заключали в парафин и проводили гистологическое исследование. Изготовленные серийные срезы окрашивали гематоксилин-эозином по методике Ван Гизона и изучали под микроскопом Leica DMLB2 при 50-, 100-, 200- и 400-кратных увеличениях с последующим фотографированием. На 1-е, 3-е и 7-е сутки после операции и перед энуклеацией экспериментальным животным проводили биомикроскопию и непрямую офтальмоскопию.
    Результаты исследования in vivo: роговица оставалась прозрачной на протяжении всего исследования, во всех глазах передняя камера была равномерной, средней глубины, водянистая влага — прозрачной, сохранялась живая реакция зрачка на свет, а также обычные цвет и структура радужной оболочки. Хрусталик был прозрачным, рефлекс с глазного дна — розовым. В течение всего периода наблюдения диск зрительного нерва, сосуды сетчатки и хориоидеи были без патологических изменений. В глазах опытной и контрольных групп в первые сутки наблюдали смешенную инъекцию сосудов глазного яблока в месте операционного вмешательства, полностью исчезавшую к 3-му дню.
    При гистологических исследованиях в первой контрольной группе после выполнения модели НГСЭ через одну неделю отмечали разнонаправленные края иссеченных волокон склеры, выступающие в интрасклеральную полость (ИСП). Через три недели было отмечено созревание коллагена, деформация и истончение поверхностного склерального лоскута в области операции; интрасклеральная полость отсутствовала (рис. 1). К 6-й неделе формировался грубый рубец с деформацией поверхностного склерального лоскута (рис. 2а).
    Во второй контрольной группе с интраоперационным введением только вязкого носителя после выполнения модели НГСЭ отмечалось удлинение сроков сохранения ИСП (через три недели — частичное сохранение ИСП), но в итоге к 6-й неделе происходило формирование рубца аналогичного первой контрольной группе (рис. 2б).
    В опытной группе (рис. 3) с интраоперационным введением вязкого носителя, насыщенного 1,0%-ной концентрацией сГАГ, при гистологическом исследовании к концу 1-й недели отмечали, что стенки ИСП без разволокнения, воспалительная реакция — минимальная (отсутствие клеточной инфильтрации стенок ИСП, малое количество фибробластов). В течение трех недель ИСП сохранялась. Отмечено отсутствие зрелого коллагена, наличие только рыхлой волокнистой соединительной ткани. К 6-й неделе зона сформированной ИСП была пористой, пронизана тонкостенными капиллярами, окруженными рыхлой волокнистой соединительной тканью. Наружный склеральный лоскут и прилежащая конъюнктива были разрыхлены.
    
    Обсуждение
    В норме свободные сГАГ практически отсутствуют. Их синтез всегда предшествует синтезу коллагена, образованию рубцовой соединительной ткани и определяет ее тип [5].
    При первичной альтерации в экстрацеллюлярном матриксе появляются поврежденные волокна коллагена, которые являются одними из сильных активаторов медиаторов воспаления, хемоаттрактантами для клеток воспалительного ряда, фибробластов и их пролиферации. В случае введения в зону повреждения экзогенных сГАГ за счет их полианионности происходит взаимодействие их с белковыми компонентами раны. При этом они нейтрализуют антигенное действие белковых фрагментов и дальнейший каскад воспалительной реакции [4]. Это подтверждается гистологически — в проведенной работе в зоне операции при экзогенном добавлении сГАГ отмечается снижение количества лимфоцитов в окружающих тканях и малое количество фибробластов.
    За счет своей полианионности они очень хорошо связывают молекулы и могут менять их конформацию. Таким образом, сГАГ могут снижать биологическую активность различных цитокинов и ферментов, уменьшая вторичную альтерацию тканей (вторичное повреждение ткани вследствие воздействия на нее различных ферментов, усиливающих воспалительную реакцию) [4].
    Это подтверждается в опытной группе, где экзогенные сГАГ в гелевой форме, насыщенной 1,0%-ной концентрацией активного вещества, препятствовали быстрому разрушению коллагенового каркаса, обеспечивая временное формирование матрикса из частично деградированного коллагена, который менее устойчив к биораспаду. Это позволило приостановить образование грубого рубца и обеспечить впоследствии более быстрое его замещение на обычную для данной локализации соединительную ткань.
    Таким образом, сГАГ при введении в рану начинают моментально воздействовать с поврежденными белковыми волокнами, а постепенно высвобождаясь из вязкого носителя, принимают участие в регулировании фибропластических процессов, улучшая репарацию при ранозаживлении и предотвращая грубое рубцевание.
    
    Выводы
    Оригинальные сГАГ, состоящие из кератансульфата и хондроитинсульфатов в концентрации 1,0% на вязком носителе, обладают антипролиферативными свойствами при ранозаживлении склеры на модели НГСЭ у кроликов, не обладают токсическим действием и могут рассматриваться для применения в клинике для сохранения просвета интрасклеральной полости при выполнении антиглаукомных операций у пациентов с глаукомой.


Страница источника: 56

Просмотров: 280