Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Исследование репаративного действия нового биорегулятора, выделенного из сыворотки крови быка


1Институт биологии развития им. Н.К. Кольцова Российской академии наук
2Институт элементоорганических соединений им. А. Н. Несмеянова Российской академии наук
3«НМИЦ глазных болезней им.Гельмгольца» Минздрава России

    Разработка новых препаратов для лечения патологий роговицы является актуальной задачей современной биологии и офтальмологии. В этом аспекте следует отметить неослабевающих интерес исследователей к поиску и изучению различных эндогенных биорегуляторов. Одними из таковых являются биорегуляторы сложного строения, обнаруженные нами в межклеточном пространстве различных тканей позвоночных животных [1]. Биорегуляторы данной группы проявляют способность в низких дозах влиять на ход и направленность таких основных процессов как адгезия, миграция клеток, клеточную дифференцировку и пролиферацию [2]. Показано, что данные биорегуляторы стимулируют восстановительные и репаративные процессы в патологически измененных тканях [2-5].

    Цель — изучение ранозаживляющего свойства очищенной фракции биорегулятора, выделенного из сыворотки крови крупного рогатого скота in vivo, а также ее протекторное действие на состояние отдельных структур роговицы глаза позвоночных животных in vitro.

    Материал и методы. Биорегулятор выделяли из сыворотки крови крупного рогатого скота (стерильный, инактивированный коммерческий препарат, используемый в качестве добавки в ростовую среду клеточных культур, производства Института полиомиелита и вирусных энцефалитов им. М. П. Чумакова РАМН) по ранее разработанной методике [3, 4]. Исследование проводили, соответственно, на взрослых половозрелых тритонах Pleurodeles waltl, и крысах линии Wistar обоего пола, взятых из аквариального комплекса и вивария Института биологии развития им. Н. К. Кольцова РАН.

    Исследование протекторного действия сывороточного биорегулятора на роговицу глаза крысы в условиях in vitro После декапитации у крыс из глаз микрохирургически выделяли роговицы без области лимба, которые далее культивировали в следующих условиях:

    1 - контрольная серия — среда 199, содержащая 10 % эмбриональной телячьей сыворотки (Sigma);

    2 - опытная серия — среда 199, содержащая 10 % эмбриональной телячьей сыворотки и биорегулятор сыворотки крови в концентрации 10-12 мг белка/мл; культивирование роговиц крыс проводили при 37 оС в течение 7 суток.

    Экспериментальная травма роговицы тритона in vivo

    Микрохирургически в области зрачкового отверстия делали разрез поперек роговицы глаза тритонов, наркотизированных MS222. После операции, начиная с 1-го дня и на протяжении 28 дней ежедневно, тритонов опытной группы головой погружали на 10 минут в раствор сывороточного биорегулятора в концентрации 10-12 мг/мл; животных контрольной группы содержали только в отстоянной водопроводной воде.

    Для исследования методом радиоавтографии пролиферации клеток эпителия роговицы на сроках 7, 14 и 28 суток после операции из каждой группы забирали по 2 тритона (4 глаза) и подсчитывали меченые [3 Н]-Тdr ядра (ИМЯ — индекс меченых ядер, равный отношению количества меченых ядер к общему количеству ядер в поле зрения). Всего подсчитали значения ИМЯ в секторах более чем на 400 срезах. Все полученные данные обрабатывали статистически, используя критерий Стьюдента.

    Результаты и обсуждение. Специфическую активность биорегулятора изучали на экспериментальной модели органотипического культивирования ткани роговицы крысы in vitro. Было показано, что в контрольной серии в роговицах развивались деструктивные процессы: отслоение и деградация эпителиального слоя, нарушение ориентации волокон в строме, деградация клеток эндотелия. При добавлении сывороточного биорегулятора наблюдали сохранение межклеточных адгезионных взаимодействий между эпителием и стромой, эндотелиальные клетки сохранялись, строма имела более упорядоченную структуру, чем в контроле. Таким образом, полученные результаты демонстрируют протекторное действие биорегулятора сыворотки крови на все структуры роговицы крысы.

    Во втором эксперименте изучали репаративное действие биорегулятора, выделенного из сыворотки крови, на роговице тритона in vivo. Клетки эпителия роговицы хвостатых амфибий сохраняют способность к пролиферации в большей мере, чем таковые клетки млекопитающих, в частности, крысы. Поэтому исследование влияния биорегулятора на клеточную пролиферацию в роговице было проведено на глазах тритона с помощью метода авторадиографии в условиях in vivo.

    Было показано, что биорегулятор, выделенный из сыворотки крови, стимулировал пролиферацию эпителиальных клеток роговицы тритона in vivo. Наибольшие различия в величине ИМЯ между группой животных, глаза которых обрабатывали сывороточным биорегулятором, и контрольной группой, наблюдали на сроке 7 дней после произведения разреза роговицы (p < 0,05). На 14-й день после операции эти различия уменьшались, но продолжали оставаться достоверными (p < 0,05). На 28-й день после проведения операции различий между контрольной и опытными группами выявлено не было (p > 0,05). Следует отметить, что на 7-е и 14-е сутки после операции, величины ИМЯ, как в экспериментальных так в и контрольной группах, достоверно превышали значение ИМЯ, определенное для интактных неопрерированных роговиц тритонов, не подвергавшихся операции (в данной группе ИМЯ составил 2,37 ± 1,12 %).

    Наблюдаемое за время проведения опыта постепенное уменьшение значений ИМЯ во всех экспериментальных группах животных, в том числе и контрольной, очевидно, свидетельствует об уменьшении пула пролиферирующих клеток в ткани роговицы в связи с завершением ее регенерации.

    Выводы. На модели экспериментальной раны in vivo и при культивировании целой роговицы глаза позвоночных животных in vitro продемонстрировано ранозаживляющее и протекторное действие биорегулятора, выделенного из сыворотки крови млекопитающих.


Страница источника: 481


Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракци...

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационал...

Федоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практичес...

Актуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная ...

Современные тенденции развития офтальмологии - фундаментально-прикладные аспекты Всероссийская научно-практическая конференцияСовременные тенденции развития офтальмологии - фундаментальн...

Восток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологии

Академия ZiemerАкадемия Ziemer

Белые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Международного офтальмологического конгрессаБелые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Междун...

Новые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно-практическая конференцияНовые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии – 2019 ХVII Всероссийская научно-практическаяконференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии –...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО

Top.Mail.Ru


Open Archives