Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Применение новой культуральной среды в культивировании лимбального эпителия ex vivo


1Екатеринбургский центр МНТК «Микрохирургия глаза»
2Уральский государственный медицинский университет Минздрава РФ

    Цель. Сравнить влияние культуральных сред DMEM/F12 и EpiCult-C (селективная среда для эпителия протоков молочных желез) на морфологию и фенотип культивированного ex vivo лимбального эпителия.
    Материал и методы. Корнеолимбальные кольца, взятые от 5 трупных доноров, культивировали в стандартных условиях суспензионным методом на деэпителизированной амниотической мембране с добавлением двух различных культуральных сред — DMEM/F12 +10%FBS + инсулин + трансферрин + EGF (культура I) и EpiCult-C (культура II) в течение 21 суток с air-lifting на последней неделе. Морфологию полученных культур исследовали при помощи стандартного гистологического окрашивания гематоксилин-эозином фиксированных срезов. На 14 сутки проводили фазово-контрастную микроскопию и фотографировали полученные культуры. Для оценки фенотипа проводили ИГХ-исследование, используя маркеры СК и пролиферативной активности — p63 и ki67 соответственно. В качестве контрольной группы были взяты 4 трупные роговицы (2 донора). Индекс пролиферации оценивали как процент ki67 позитивных клеток среди всех подсчитанных клеток.
    Результаты. Фазово-контрастная микроскопия показала, что размеры базальных клеток эпителия в культуре II статистически значимо меньше, чем в культуре I: средний размер 11,7 мкм (7,2-37,7 мкм) и 20,4 мкм (11,0-60,0 мкм) соответственно, p=0,024. Соответствующие значения для поверхностных клеток в культурах I и II статистически не отличались: средний размер 45,1 мкм (23,8-73,0 мкм) и 70,5 мкм (45,8-76,4 мкм) соответственно, p=0,09. Культивированный эпителий на обеих средах формировал от 3 до 6 клеточных слоев. Кубические базальные клетки и ядерно-цитоплазматическое соотношение 1:1 в культуре I морфологически больше соответствовало контрольным образцам трупных роговиц, в то время как в культуре I базальные клетки часто имели уплощенную форму, эллиптиформные ядра и ядерно-цитоплазматическое соотношение 1:2-1:3. Иммуногистохимическое исследование не выявило статистически значимой разницы в количестве p63-позитивных клеток в культурах I и II: средние значения 2,75% (1,95-3,1%) и 3,5% (2,95%-4,0%) соответственно, p=0,47. Индекс пролиферации в обеих группах также статистически значимо не отличался: в культуре I — 13,0% (9,0-17,0%) и в культуре II — 15,8% (6,0-36,0%), p=0,367.
    Выводы. Полученные данные демонстрируют, что обе культуральные среды — DMEM/F12 и EpiCult-C — сравнимы по влиянию на стволовой фенотип и пролиферативную активность клеток лимбального эпителия ex vivo. Более того, эпителий, культивированный на среде EpiCult-C, имеет лучшие морфологические характеристики и может быть применен для лечения тяжелой лимбально-клеточной недостаточности.


Страница источника: 87


«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической  конференции офтальмологов«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической конфере...

ХVII Ежегодный конгресс  Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»ХVII Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «В...

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференцияПироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практ...

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании...

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3DСложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеоси...

«Живая хирургия» компании «НанОптика»«Живая хирургия» компании «НанОптика»

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракци...

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационал...

Федоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практичес...

Актуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная ...

Современные тенденции развития офтальмологии - фундаментально-прикладные аспекты Всероссийская научно-практическая конференцияСовременные тенденции развития офтальмологии - фундаментальн...

Восток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологии

Академия ZiemerАкадемия Ziemer

Белые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Международного офтальмологического конгрессаБелые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Междун...

Новые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно-практическая конференцияНовые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии – 2019 ХVII Всероссийская научно-практическаяконференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии –...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО