Онлайн доклады

Онлайн доклады

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар с демонстрацией живой хирургии

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар с демонстрацией живой хирургии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Вебинары компании  «Акрихин»

Вебинары компании «Акрихин»

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Вебинар

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

XIX Конгресс Российского глаукомного общества  «19+ Друзей Президента»

XIX Конгресс Российского глаукомного общества «19+ Друзей Президента»

Пироговский офтальмологический форум

Пироговский офтальмологический форум

Кератиты, язвы роговицы

Вебинар

Кератиты, язвы роговицы

Актуальные вопросы офтальмологии

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Сателлитный симпозиум

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар с демонстрацией живой хирургии

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар с демонстрацией живой хирургии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Вебинары компании  «Акрихин»

Вебинары компании «Акрихин»

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Вебинар

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Все видео...
 Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст
УДК:УДК 617.7 - 007.681

DOI:https://doi.org/10.25276/2410-1257-2018-88-91

Значение молекулярно-генетического анализа в диагностике первичной открытоугольной глаукомы


     В большинстве случаев изменение в структуре гена приводит к развитию первичной открытоугольной глаукоме (ПОУГ) взрослого возраста. Тем не менее, имеются данные о том, что дебют глаукомы при мутации в этом гене может наступать и в раннем возрасте, что приводит к выявлению в одной семье как случаев ПОУГ взрослого возраста, так и первичной юношеской глаукоме [5]. Тип наследования при глаукоме – аутосомно-доминантный. Вклад различных полиморфизмов в этиологию глауком отличается в отдельных популяциях. Поэтому особую значимость имеет изучение популяционных особенностей спектра мутаций и полиморфизмов у больных с различными формами глауком. Эти исследования создают основу для анализа внутрисемейного клинического полиморфизма наиболее часто встречающихся форм наследственной патологии органа зрения. Материалы, полученные в результате этих исследований, могут служить основой для изучения этиологии патогенеза наследственных заболеваний глаз с применением методов молекулярной генетики.

    Значительная доля случаев первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ) генетически обусловлена и составляет, по данным различных авторов, от 21 до 50% [9]. ПОУГ относится к группе заболеваний с наследственной предрасположенностью, развитие которых определяется взаимодействием определенных наследственных и средовых факторов [2].

    Сложно выявление ранних признаков, которые предшествуют клинической манифестации ПОУГ. Диагностика глаукомы основывается на оценке совокупности симптомов, так как ни один из них не является специфичным, а существующие диагностические тесты – достаточно чувствительными [3, 4], в связи с чем изучение методов ранней диагностики ПОУГ на доклинической стадии представляет актуальную задачу.

    Около 10% случаев глаукомы взрослых обусловлено наследуемыми мутациями в генах миоцилина (MYOC/TIGR) [16] и гена цитохрома P 450 (CYP1B1) [13]. Кодируемые этими локусами белки миоцилин и одна из белковых фракций цитохрома Р450 важны для нормального функционирования обменных процессов переднего отдела глаза, однако их роль в патогенезе глаукомы до настоящего времени не вполне ясна [1]. Идентификация мутаций в этих генах позволяет выявлять лица с высоким риском развития глаукомы и своевременно начинать лечение. Спектр описанных мутаций является специфичным для отдельных популяций и этнических групп [6, 11], что делает невозможным в целях диагностики опираться на данные, полученные в других регионах. Подобных исследований в Республике Башкортостан ранее не проводилось.

    Цель

    Исследование спектра и частоты изменений нуклеотидной последовательности генов миоцилина и цитохрома Р450 у больных ПОУГ из Республики Башкортостан и определение диагностического значения выявленных изменений.

    Материал и методы

    Всего было обследовано 257 чел., в т.ч. 138 пациентов с ПОУГ, 39 членов их семей и 80 чел. группы контроля.

    Все пациенты были разделены на 2 группы. Первую группу составили 37 пациентов с ПОУГ с предположительно наследственной этиологией. В эту группу включали больных, если в родословной имелось хотя бы два случая ПОУГ при степени родства не менее 50%. Вторую группу (101 больной), составили пациенты с ПОУГ без отягощенного семейного анамнеза. Контрольную группу составили 80 человек в возрасте 70-80 лет с неосложненной возрастной катарактой без признаков глаукомы. Среди пациентов с ПОУГ мужчин было 85 (61,6%), женщин – 53 (38,4%) в возрасте от 31 до 82 лет. Офтальмологическое обследование проводилось при помощи общепринятых методов.

    Молекулярно-генетическое исследование, включающее выделение геномной ДНК [12], амплификацию исследуемых участков генов методом полимеразной цепной реакции [1], анализ конформационного полиморфизма однонитевых фрагментов ДНК (SSCP-анализ) [14], секвенирование проводилось совместно с сотрудниками лаборатории молекулярной генетики человека Института биохимии и генетики Уфимского научного центра РАН.

    Был проведен SSCP-анализ 1,2,3 экзонов гена миоцилина, скрининг мутации Q368X в гене миоцилина и мутации R368H в гене цитохрома Р 450 в 257 образцах ДНК. Для анализа гена миоцилина произведен подбор праймеров для избирательной амплификации экзонных последовательностей данных генов. Первичная последовательность (сиквенс) гена была получена из базы генетических последовательностей GenBank® Национального Института Здоровья, США (National Institute of Health). Идентификационный номер сиквенса NM_000261.

    Были проанализированы те участки генов, где по литературным данным было выявлено наибольшее количество мутаций и которые были ассоциированы с клинической формой первичной открытоугольной глаукомы [10]. В качестве основного метода поиска мутаций был использован метод SSCP, преимуществом которого является его простота и достаточно высокая чувствительность [15]. В образцах ДНК пациентов с конформационными полиморфизмами определяли последовательность нуклеотидов с помощью секвенирования.

    Результаты и обсуждение

     SSCP-анализ 1 и 2 экзонов гена миоцилина не выявил изменений подвижности одноцепочечной ДНК в нашей выборке. В экзоне 3 гена миоцилина наблюдались два изменения подвижности одноцепочечной ДНК у двух пациентов с семейным анамнезом ПОУГ. Однако последующий секвенционный анализ не выявил каких-либо изменений в нуклеотидной последовательности ни в самом экзоне, ни в прилегающих к нему интронных областях (рис. 1).

    При молекулярно-генетическом исследовании образцов ДНК больных нашей выборки в третьем экзоне гена миоцилина у одного пациента с ПОУГ обнаружена нонсенс-мутация – Q368X (с.1102С>Т). Наличие мутации Q368X было подтверждено ферментативным гидролизом эндонуклеазой TaaI (рис. 2).

    Пациент – 50 лет, башкир по этнической принадлежности, с семейным анамнезом заболевания. Впервые обратился за помощью к офтальмологу по месту жительства в январе 2006 г., после того как ослеп левый глаз. Установлен диагноз: OU – Открытоугольная глаукома IV C. Острота зрения OD p.l.incerta; OS – 0. Постепенное снижение зрения отмечает в течение нескольких последних лет. К офтальмологам не обращался. Брат пробанда, 54 лет, ослеп на оба глаза в возрасте 48 лет вследствие глаукомы.

    На мутацию Q368X приходится 40% от всех найденных в мире. При мутации Q368X в 1102 положении происходит замена цитозина на тимин и образование стоп-кодона, результатом которого является синтез укороченного белка. Синтезируемый с мутантной м-РНК протеин содержит 367 аминокислотных остатков вместо 504 и белок оказывается лишенным значительной части ольфактомедин-подобного домена, необходимого для нормального функционирования миоцилина. Мутантный белок становится нерастворимым, накапливается внутри клеток трабекулярной сети, вызывая их дистрофические изменения и последующую гибель посредством апоптоза. Следствием этих процессов является увеличение сопротивления оттоку внутриглазной жидкости и повышение внутриглазного давления [10, 12].

    Таким образом, частота мутации Q368X, выявленная у больных ПОУГ из Башкортостана, составляет 0,004 и не отличается от данных полученных, при исследовании других популяций [10].

    Ген цитохрома 450, картированный в 1996 г. [17], содержит 3 экзона и 2 интрона, из которых только экзоны 2 и 3 кодируют мультифункциональный фермент – цитохром Р450, относящийся к классу монооксигеназ, участвующий в создании новых функциональных групп (-OH, -NH2, -COOH) в сложных органических молекулах многих органов и тканей [8, 16]. Предполагается, что ген цитохрома Р450 может действовать как модификатор гена миоцилина [7].

    В 2002 г. была идентифицирована мутация R368H гена цитохрома Р450, которая в гетерозиготном состоянии в сочетании с различными мутациями в гене миоцилина является причиной возникновения ПОУГ, причем манифестация заболевания происходит в конце первой – начале второй декады жизни [18]. ПОУГ, вызванная мутацией R368H, характеризуется более тяжелым течением (ранее начало заболевания, быстрое прогрессирование). Механизм действия данной мутации связан с конформационными изменениями четвертичной структуры молекулы цитохрома Р4501В1, и как следствие, со снижением активности фермента [19]. При мутации R368H происходит потеря сайта для рестриктазы TaаI (рис. 3). Был проведен скрининг мутации R368H в 138 образцах ДНК больных ПОУГ, а так же их родственников и в 80 образцах ДНК группы контроля.

    Не выявлена мутация гена цитохрома Р450 ни у одного из обследованных. По-видимому, причиной развития ПОУГ у обследованных больных могут быть какие-либо другие мутации в гене цитохрома Р 450.

    Заключение

    Выявленная частота мутации Q368X гена миоцилина указывает на целесообразность её тестирования у лиц с семейным анамнезом ПОУГ. Отсутствие выявленной мутации R368H диктует необходимость продолжения поиска мутаций в гене цитохрома Р 450, характерных для населения Республики Башкортостан. Для определения формы глаукомы необходима тесная работа офтальмолога-клинициста и врача–генетика. При обследовании пациента обязательными являются генеалогический анализ, поиск мутаций при каждой клинической форме глаукомы, что позволяет своевременно поставить клинико-генетический диагноз наследственного заболевания глаза и наметить правильное консервативное или хирургическое лечение.


Страница источника: 88-91

OAI-PMH ID: oai:eyepress.ru:article27769
Просмотров: 2944



Johnson & Johnson
Alcon
Bausch + Lomb
Reper
NorthStar
ЭТП
Rayner
Senju
Гельтек
santen
Акрихин
Ziemer
Eyetec
МАМО
Tradomed
Nanoptika
R-optics
Фокус
sentiss
nidek