2.8. Лабораторные методы исследования цитокинового профиля внутриглазной жидкости

    Экспериментальное исследование образцов ВГЖ проводили на анализ концентрации цитокинов (IL-1β, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-8, IL-10, IL-12p70, IFN-γ, TNF-α , TNF-β) с помощью FlowcytomixPro 3.0 (eBioscience) цитометра CytomixF C 500. Использовали набор для анализа цитокинов HumanTh1/Th2 11plexBMS810FF (eBioscience).

    Образцы ВГЖ были получены у 12 глаз после ФЛС ФЭ в группе применения препарата бромфенак 0,09% (I группа), 12 глаз с ФЛС ФЭ с препаратом индометацин 0,1% (II группа), и у групп контроля в случае с применением препарата бромфенак 0,09% 12 глаз (III группа) и индометацин 0,1% 17 глаз (IV группа) при стандартной ФЭ.

    Неразведенные образцы ВГЖ (70–100 мкл) были аспирированы с помощью шприца с канюлей 30G из передней камеры.

    В I и II группах забор ВГЖ производился после проведения ФЛС и перед проведением ФЭ. Доступ в переднюю камеру осуществляли через сформированный одноплоскостной разрез роговицы фемтосекундным лаз ером шириной 1,2 мм на 9 часах путем вскрытия его специализированным микрохирургическим шпателем.

    В III и IV группах забор ВГЖ производили перед проведением стандартной ФЭ. Доступ в переднюю камеру осуществляли путем формирования мануального механического парацентеза копьевидным микрохирургическим ножом 20 G Mani Inc., Япония, на 9 часах.

    Все образцы были собраны в стерильных условиях одним хирургом и были незамедлительно перелиты в стерильные пластиковые пробирки Эппендорфа объемом 1,5 мл и помещены на хранение в холодильную камеру –80 о С до момента проведения анализа. Хранение образцов продолжали от 1 недели до 4 месяцев.