Онлайн доклады

Онлайн доклады

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Вебинары компании  «Акрихин»

Вебинары компании «Акрихин»

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Вебинар

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

XIX Конгресс Российского глаукомного общества  «19+ Друзей Президента»

XIX Конгресс Российского глаукомного общества «19+ Друзей Президента»

Пироговский офтальмологический форум

Пироговский офтальмологический форум

Кератиты, язвы роговицы

Вебинар

Кератиты, язвы роговицы

Актуальные вопросы офтальмологии

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Сателлитный симпозиум

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Все видео...

2.1. Анализ доли изолированного и сочетанного инфицирования ВПГ 1, 2 типов и цитомегаловируса у пациентов с хроническими нарушениями эпителизации роговицы


    Формирование клинических групп осуществлялось в порядке решения поставленных в исследовании задач.

    2.1. Анализ доли изолированного и сочетанного инфицирования ВПГ 1, 2 типов и цитомегаловируса у пациентов с хроническими нарушениями эпителизации роговицы

    Для оценки частоты и характера формирования хронических нарушений эпителизации роговицы в исследование были включены 120 пациентов (120 глаз) с хроническими кератоконъюнктивитами герпетической этиологии. Условием для включения в группу данного исследования было наличие у пациента нарушений эпителизации роговицы более 15 суток на фоне проведения стандартной репаративной терапии. Кроме того, внимание уделяли наличию ранее диагностированной герпесвирусной инфекции у всех пациентов. Данная часть работы включала иммуноферментный анализ крови, метод полимеразной цепной реакции в мазках с конъюнктивы и микробиологический анализ отделяемого с конъюнктивы.

    Иммуноферментный анализ крови пациентов с хроническими нарушениями эпителизации роговицы

    Исследование проводили в клинико-диагностической лаборатории ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России. Пациентам, включенным в группу исследования, однократно выполняли иммуноферментный анализ крови (ИФА) для определения титров ВПГ 1, 2 типов и ЦМВ и их соотношения. В исследование включали пациентов с положительными результатами по ЦМВ.

    Метод определения основан на твердофазном ИФА. В соответствующие лунки планшета вносили положительные и отрицательные контрольные образцы, а в остальные лунки вносили по 90 мкл раствора для разведения сывороток и по 10 мкл предварительно разведенных исследуемых образцов крови. Затем планшет заклеивали пленкой и инкубировали в термостате в течение 30 минут при температуре 37±1±С. По окончании инкубации липкую пленку снимали и удаляли в сосуд с дезинфицирующим раствором. Содержимое лунок удаляли отсасыванием в сосуд с дезинфицирующим раствором и промывали, добавляя во все лунки по 400 мкл промывочного раствора, с последующим отсасыванием через 30 сек.

    Процесс промывки повторяли еще 4 раза. Далее, во все лунки вносили по 100 мкл конъюгата. Планшет заклеивали пленкой и выдерживали в термостате в течение 30 минут при температуре 37±1±С. Для внесения конъюгата использовали ванночку для реагента и одноразовые наконечники. По окончании инкубации повторно промывали планшет. Затем во все лунки вносили по 100 мкл раствора тетраметилбензидина, планшет выдерживали в защищенном от света месте при температуре от 18 до 25±С. Заключительным этапом вносили во все лунки, в той же последовательности, как и раствор тетраметилбензидина, по 100 мкл стоп-реагента.

    Величину оптической плотности растворов в лунках измеряли с помощью спектрофотометра («Digiscan», «ASYS Hitech Gmbh», Австрия) вертикального сканирования. Время между остановкой реакции и измерением оптической плотности не превышало 5 минут. Учет результатов исследования производился с помощью программы BIANET 1.2.0.20.

    Качественный анализ наличия вирусного инфицирования пациентов с хроническими нарушениями эпителизации роговицы

    У 120 пациентов, включенных в группу исследования эпидемиологии хронических нарушений эпителизации роговицы, при условии положительных результатов ИФА крови на наличие титров антигенов к ВПГ 1, 2 типов и ЦМВ, проводили качественное (+/-) исследование ДНК вируса простого герпеса и цитомегаловируса с помощью метода полимеразной цепной реакции (ПЦР) в мазках с конъюнктивы на базе ООО «Герпетический центр», г. Москва.

    Данная часть исследования помимо анализа доли изолированного и сочетанного инфицирования ВПГ 1, 2 типов и цитомегаловируса, являлась скрининговой с целью отбора пациентов для последующего использования терапевтических методик, входящих во вторую часть проведенной работы.

    Качественное ПЦР-исследование проводилось с помощью набора реагентов для амплификации ДНК вирусов простого герпеса 1, 2 типов и цитомегаловируса с электрофоретической детекцией продуктов амплификации в агарозном геле («АмплиСенс® HSV/CMV-EPh», Россия).

    Забор материала осуществляли с помощью стерильного зонда, помещали в транспортную среду при температуре 2-8 ±С. В лизирующий раствор, при температуре 65±С, добавляли 50 мкл пробы, после чего подвергали центрифугированию на скорости 5 тыс. об/мин. на микроцентрифуге в течение 5 секунд. После добавления универсального сорбента и перемешивания проводили его осаждение путем центрифугирования. Затем полученные пробы подвергались двукратной процедуре отмывки и центрифугирования с удалением надосадочной жидкости. Следующим этапом пробирки помещали в термостат на 5 минут при температуре 65±С с целью подсушивания сорбента. В пробирки добавляли ТЕ-буфер для эволюции ДНК, прогревали до 65±С и подвергали центрифугированию в течение 1 минуты. Полученную надосадочную жидкость использовали для определения ДНК ВПГ 1, 2 типов и ЦМВ. Пробирки с пробами перемещали в амплификатор на режиме паузы в момент достижения температуры в ячейках 95±С на 2 часа, а затем полученный раствор перемещали в лунки агарозного геля и подвергали электрофорезу в течение 18-20 минут при напряжении 250 В со стабилизацией по напряжению. Результаты ПЦР-диагностики оценивались на наличие, либо на отсутствие на электрофореграмме специфических полос амплифицированной ДНК.

    Микробиологическое исследование отделяемого конъюнктивы пациентов с хроническими нарушениями эпителизации роговицы

    Исследование проводили в клинико-диагностической лаборатории ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им.акад. С.Н. Федорова» Минздрава России. Так же у всех 120 пациентов с целью исследования характера и частоты нахождения сопутствующей вторичной бактериальной инфекции на 1-м этапе выполняли микробиологическое исследование отделяемого конъюнктивы с определением чувствительности к антибактериальным препаратам. Забор материала осуществляли с соблюдением правил асептики, с конъюнктивы стерильным тампоном с внутренней поверхности нижнего века движением к внутреннему углу глазной щели. Затем производили посев на сывороточный и тиогликолевый бульоны, после чего материал доставляли в лабораторию для исследования.

    Микроскопия окрашенных мазков позволяла определить наличие бактериальной микрофлоры для обоснования целесообразности применения антибактериальной терапии на 1-м этапе лечения у пациентов с хроническим нарушением эпителизации роговицы.


Страница источника: 43-46

OAI-PMH ID: oai:eyepress.ru:article29073
Просмотров: 946



Johnson & Johnson
Bausch + Lomb
Reper
NorthStar
ЭТП
Rayner
Senju
Гельтек
santen
Акрихин
Ziemer
Eyetec
МАМО
Tradomed
Nanoptika
R-optics
Фокус
sentiss
nidek