Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

Результаты подкожной имплантации биоматериала Nanoskin® морским свинкам


    
Рис. 1. (A) Микрофотография препарата, полученного в группе 1 через 7 дней после операции. Nanoskin® определяется в виде тонких параллельных розовых слоев. Промежутки между слоями биоматериала отмечены звездочкой (*), Воспалительные клетки окружают имплантат и формируют псевдокапсулу (P). Воспалительные клетки и фибробласты располагаются также и между слоями (50 мкм) (Б) Микрофотография препарата, полученного в группе 2 через 7 дней после операции. Кровеносные сосуды, содержащие красные клетки крови, определяются в псевдокапсуле (P) вокруг биоматериала (50мкм). (В) Группа 1 через 30 дней после операции. Нити фибробластов между волокнами (*) Nanoskin® (100 мкм). (Г) Группа 2 через 30 дней после операции. Клетки и сосуды (V) между волокнами Nanoskin® (100 мкм). (Д) Группа 1 через 90 дней после операции. Фибробласты между слоями и плотная псевдокапсула (P) вокруг биоматериала (50 мкм). (Е) Группа 2 через 90 дней после операции. Плотные фибробласты вдоль волокон (*) (100 мкм). (З) Группа 1 через 180 дней после операции. Скопления воспалительных клеток между волокнами (100 мкм). (И) Группа 2 через 180 дней после операции. Скопления фибробластов пронизывают волокна Nanoskin® (100 мкм). Окраска гематоксилином-эозином
Рис. 1. (A) Микрофотография препарата, полученного в группе 1 через 7 дней после операции. Nanoskin® определяется в виде тонких параллельных розовых слоев. Промежутки между слоями биоматериала отмечены звездочкой (*), Воспалительные клетки окружают имплантат и формируют псевдокапсулу (P). Воспалительные клетки и фибробласты располагаются также и между слоями (50 мкм) (Б) Микрофотография препарата, полученного в группе 2 через 7 дней после операции. Кровеносные сосуды, содержащие красные клетки крови, определяются в псевдокапсуле (P) вокруг биоматериала (50мкм). (В) Группа 1 через 30 дней после операции. Нити фибробластов между волокнами (*) Nanoskin® (100 мкм). (Г) Группа 2 через 30 дней после операции. Клетки и сосуды (V) между волокнами Nanoskin® (100 мкм). (Д) Группа 1 через 90 дней после операции. Фибробласты между слоями и плотная псевдокапсула (P) вокруг биоматериала (50 мкм). (Е) Группа 2 через 90 дней после операции. Плотные фибробласты вдоль волокон (*) (100 мкм). (З) Группа 1 через 180 дней после операции. Скопления воспалительных клеток между волокнами (100 мкм). (И) Группа 2 через 180 дней после операции. Скопления фибробластов пронизывают волокна Nanoskin® (100 мкм). Окраска гематоксилином-эозином

Рис. 2. (A) Сканирующая электронная микроскопия в группе 1 через 7 дней после операции: биоматериал (B) пронизан ICs. (Б) Группа 2 через 7 дней после операции: биоматериал (B) пронизан красными BCs и фибробластами, содержащими органеллы. (В) Группа 1 через 180 дней после операции. Промежутки между оптически плотными слоями Nanoskin® отмечены звездочкой (*). (Г) Группа 2 через 180 дней после операции. Фибробласты (F) между волокнами Nanoskin® (B), разделенные промежутками (*). BCs – красные клетки крови; ICs – воспалительные клетки; M – митохондрии; RER – грубый эндоплазматический ретикулум
Рис. 2. (A) Сканирующая электронная микроскопия в группе 1 через 7 дней после операции: биоматериал (B) пронизан ICs. (Б) Группа 2 через 7 дней после операции: биоматериал (B) пронизан красными BCs и фибробластами, содержащими органеллы. (В) Группа 1 через 180 дней после операции. Промежутки между оптически плотными слоями Nanoskin® отмечены звездочкой (*). (Г) Группа 2 через 180 дней после операции. Фибробласты (F) между волокнами Nanoskin® (B), разделенные промежутками (*). BCs – красные клетки крови; ICs – воспалительные клетки; M – митохондрии; RER – грубый эндоплазматический ретикулум
Веки играют ключевую роль в защите глазного яблока, поэтому при их повреждении необходимо максимальное восстановление их структуры. При проведении реконструктивной хирургии может понадобиться аутологичный материал: для восстановления передней пластинки век – кожа, а для восстановления задней пластинки – хрящ ушной раковины, слизистая оболочка губы, надкостница, носовая перегородка или твердое небо (Gu J. et al., Fernandes J.B.V. et al.). Взятие аутологичной ткани увеличивает время операции, сопровождается болезненностью и длительным восстановлением после вмешательства. Использование гомологичного материала также возможно, но требует контролируемого способа подготовки и проверки его качества для предотвращения передачи различных заболеваний. Благодаря недавним достижениям тканевой инженерии появляются новые альтернативы донорским тканям.

    В состав задней пластинки век входит хрящ, поэтому при реконструкции век требуется ткань с похожими свойствами. В литературе имеются сообщения об успешном восстановлении век при помощи Integra (Integra Life Sciences Corporation, Plainsboro, NJ, США) – искусственной кожи состоящей из бычьего коллагена с добавлением гликозаминогликанов и силикона (Thinda S. et al.). При помощи ацеллюлярной дермы, прикрытой кожным лоскутом, было успешно проведено полное восстановление всей толщины века при рубцовом завороте (Gu J. et al.). Однако авторы сообщили о потенциальной возможности сокращения трансплантата и формирования гранулем.

    В другой публикации описано применение свиного ацеллюлярного трансплантата, пересаженного морским свинкам, но в результате операции произошла абсорбция материала, что было расценено как неудача (Hoyama E. et al.).

    Хороший результат был получен Culican S.M. et al. при использовании Apligraf (Organogenesis Inc., Canton, MA, США) при использовании искусственной кожи для восстановления передней пластинки века ребенку с рубцовым заворотом вследствие врожденного ихтиоза.

    Enduragen (Tissue Science Laboratories, Aldershot, Reino Unido) представляет собой свиной ацеллюлярный матрикс дермы, который был успешно использован в качестве промежуточного трансплантата у 69 пациентов (129 глаз). Однако авторы сообщили о 13 случаях осложнений, которые, по-видимому, были в большей степени связаны с самой процедурой, а не с реакцией на использованный материал (McCord C. et al.).

    Очевидна высокая потребность в искусственной ткани, которая могла бы успешно использоваться при реконструкции век.

    Цель – оценить возможности применения нового биоматериала Nanoskin® для восстановления задней пластинки век.

    Nanoskin® производится компанией Innovatecs (Sao Carlos, SP, Бразилия) и представляет собой бактериальную целлюлозу, продуцируемую бактериями Acetobacter xylinum на питательной среде в виде зеленого чая. Для данного исследования были приготовлены мембраны Nanoskin® размером 2х2 см, которые упаковывали вручную и стерилизовали гамма-излучением. В исследование были включены 40 морских свинок в возрасте 6 месяцев, которые были разделены на две группы. В группе 1 проводилась имплантация Nanoskin® без желатинового покрытия, а в группе 2 – имплантация Nanoskin®, имевшей желатиновое покрытие с обеих сторон. В качестве желатина использовался Royal Brand unflavored gelatin (Kraft Foods, Chicago, IL, США).

    Операция выполнялась в асептических условиях под анестезией (интраперитонеальное введение анестетика). Имплантация Nanoskin® проводилась в карман на спинке животного, сформированный лезвием между кожей и мышцами. Накладывались швы (мононейлон 6-0). В конце операции выполнялась интраперитонеальная инъекция антибиотика.

    Животных наблюдали ежедневно, оценивая их общий статус и состояние зоны операции. По пять животных из каждой группы умерщвлялись на 7-й, 30-й, 90-й и 180-й день после имплантации Nanoskin®. Область имплантации подвергалась морфологическому, гистологическому исследованию и электронной микроскопии.

    Клиническое наблюдение. У всех животных отмечалась хорошая реакция на имплантацию без признаков воспаления в зоне вмешательства. Одна морская свинка умерла вскоре после операции, скорее всего, вследствие гиперчувствительности к препаратам анестезии. После эвтаназии имплантат Nanoskin® не удалось обнаружить у 1 животного в группе 1 на 90-й день после операции, у 2 животных в группе 1 и у 3 животных в группе 2 на 180-й день после операции. По всей вероятности это было связано с миграцией имплантата под кожей во время движений подопытных животных.

    Микроскопическое исследование. Результаты микроскопического исследования были одинаковы в обеих группах. Через 7 дней после операции имплантат был инертным и определялся в виде нескольких параллельных слоев волокон. Биоматериал был окружен псевдокапсулой, состоящей из молодых фибробластов и воспалительных клеток, преимущественно нейтрофилов (рис. 1 A, Б). Через 30 дней в области имплантата появлялась неоваскуляризация с наличием клеток крови, имелись признаки умеренного воспаления с уменьшением количества иммунных клеток, вокруг имплантата определялись более зрелые фибробласты (рис. 1 В, Г). Через 90 дней между слоями обнаруживались клетки в несколько большем количестве в группе 1 по сравнению с группой 2 (рис. 1 Д, Е). Через 180 дней имплантат оставался инертным, слои волокон не были параллельны, а промежутки между слоями стали больше. Биоматериал окружала тонкая псевдокапсула из фибробластов и небольшого количества воспалительных клеток (рис. 1 З, И).

    Морфометрическое исследование. Воспалительная реакция была более выражена в начале эксперимента, с течением времени количество воспалительных клеток уменьшалось в обеих группах. Признаки воспаления на начальном этапе были несколько более выражены в группе (р< 0,05).

    Ультраструктурное исследование. Через 7 дней после имплантации, Nanoskin® определялся при электронной микроскопии в виде пучка тонких волокон параллельных друг другу с примесью фибробластов, воспалительных клеток и наличием мелких кровеносных сосудов (рис. 2 A, Б). Через 6 месяцев имплантат оставался инертным с минимальными признаками воспалительной реакции, более выраженной волокнистой структурой с увеличенными промежутками между волокнами и примесью фибробластов (рис. 1 В, Г).

    Целлюлоза, продуцируемая бактериями, успешно применяется в наши дни по различным биомедицинским показаниям, включая имплантацию, использование в качестве каркаса для тканей для биоинженерии, носителя лекарственных средств и для производства перевязочного материала (Rajwade J.M. et al., Sulaeva I. et al.).

    Бактериальная целлюлоза имеет волокнистую структуру, напоминающую экстрацеллюляный матрикс (Rajwade J.M. et al., Wippermann J. et al.). Такое строение способствует тому, что окружающие клетки могут использовать имплантат в качестве поддерживающего материала для регенерации. Примером этого является появление фибробластов, воспалительных клеток и новых кровеносных сосудов вокруг имплантата и между его волокнами.

    Результаты применения Nanoskin®, покрытого и непокрытого желатином, были одинаковы. Желатин был добавлен к материалу с целью создания гладкой поверхности, которая могла бы прилегать к глазному яблоку, и в большей степени имитировала бы заднюю пластинку века при реконструктивной операции.

    В проведенном эксперименте были получены хорошие результаты применения Nanoskin®. По мнению авторов, Nanoskin® обладает хорошим потенциалом для применения его в качестве биоматериала для замещения задней пластинки век.

    

    Kryscia Natsuaki Kamingakura, Silvana Sue Sato, Patricia Sugino et al. Nanoskin subcutaneous implant in guinea pigs. Ophthalmic Plastic and Reconstructive Surgery. 2018;34(2):136-139.


Страница источника: 23-26


«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической  конференции офтальмологов«Живая хирургия» в рамках XXVII научно-практической конфере...

ХVII Ежегодный конгресс  Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты. Семнадцать мгновений зимы»ХVII Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «В...

Пироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практическая конференцияПироговский офтальмологический форум. Ежегодная научно-практ...

Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании «Алкон»Школа рефракционного хирурга. Сателлитный симпозиум компании...

Сложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеосимпозиум в формате 3DСложные и нестандартные случаи в хирургии катаракты. Видеоси...

«Живая хирургия» компании «НанОптика»«Живая хирургия» компании «НанОптика»

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракционной хирургии - 2019Современные технологии катарактальной, роговичной и рефракци...

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационал...

Федоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практичес...

Актуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная ...

Современные тенденции развития офтальмологии - фундаментально-прикладные аспекты Всероссийская научно-практическая конференцияСовременные тенденции развития офтальмологии - фундаментальн...

Восток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологии

Академия ZiemerАкадемия Ziemer

Белые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Международного офтальмологического конгрессаБелые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Междун...

Новые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно-практическая конференцияНовые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии – 2019 ХVII Всероссийская научно-практическаяконференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии –...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО