Онлайн доклады

Онлайн доклады

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Вебинары компании  «Акрихин»

Вебинары компании «Акрихин»

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Вебинар

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

XIX Конгресс Российского глаукомного общества  «19+ Друзей Президента»

XIX Конгресс Российского глаукомного общества «19+ Друзей Президента»

Пироговский офтальмологический форум

Пироговский офтальмологический форум

Кератиты, язвы роговицы

Вебинар

Кератиты, язвы роговицы

Актуальные вопросы офтальмологии

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Сателлитный симпозиум

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Все видео...

4.3. Алгоритм предоперационной подготовки заднего послойного трансплантата роговицы в условиях Глазного тканевого банка


     С учетом полученных результатов наших исследований впервые в России разработан Алгоритм предоперационной подготовки заднего послойного трансплантата трупной донорской роговицы человека в условиях Глазного тканевого банка с помощью микрокератома. В процессе разработки Алгоритма учитывались требования Директивы 2004/23/ЕС Парламента Европейского Союза для Тканевых и клеточных банков.

    Показания к использованию Алгоритма

    Первичные и вторичные дистрофии и другая патология эндотелия роговицы, требующие проведения задней автоматизированной послойной кератопластики с использованием ультратонкого трансплантата задних слоев донорской консервированной роговицы.

    Материально-техническое обеспечение

    -Стандартное офтальмологическое оборудование (щелевая лампа, операционный микроскоп, набор инструментов для глазных операций);

    -Стандартное секционное оборудование и инструментарий;

    -Стандартное клинико-лабораторное оборудование (ламинарный шкаф, ультрафиолетовый облучатель, холодильник медицинский);

    -Кератоанализатор для Глазных банков (Eye bank Keratoanalyzer), модель ЕКА-98, фирмы «Konan», (Япония) (прибор не относится к медицинскому оборудованию и не подлежит сертификации на территории Российской Федерации);

    -Пинцеты глазные микрохирургические Пмх-«МГ», Россия (рег. уд. № ФСР 2008/02448);

    -Ножи офтальмомикрохирургические, Россия (рег. уд. № ФСР 2008/02450);

    -Микрокератом LSK One, головки с заданной толщиной реза 400, 500 и 550 мкм (Moria, Франция);

    -Искусственная передняя камера (Moria, Франция);

    -Тонометр Барракера 90 мм Hg (Moria, Франция);

    -Оптический когерентный томограф iVue 100 с блоком для проведения измерений в горизонтальном положении iStand (Optovue (США);

    -Раствор для хранения роговицы по ТУ 9398-013-29039336-2008, ООО «НЭП МГ», Россия (Рег. уд. № ФСР 2010/06650);

    -Среда для дегидратации и гипотермической консервации донорской роговицы собственной разработки (Патент РФ № 2676311 от 27.12.2018.);

    Антисептическое лекарственное средство:

    -Бетадин 10% р-р 120 мл, Венгрия (Рег. номер П №015282/03);

    Адреномиметик:

    -Адреналин р-р для инъекций 1мг/мл в ампулах по 1 мл, Россия (Рег. № ЛС-001849);

    Регидратирующее средство:

    -Натрия хлорид р-р для инфузий изотонический 0,9% 250 мл, Россия (Рег. № 000772/01);

    Средство парентерального питания:

    -Глюкоза р-р для внутривенного введения 40% 10 мл, Россия (Рег № 001186/01).

    Описание Алгоритма

    Необходимым условием, без которого невозможно применение данного Алгоритма, является наличие в офтальмологическом стационаре государственного (муниципального) медицинского учреждения Глазного тканевого банка и Лицензии на осуществление медицинской деятельности по забору и заготовке органов и тканей человека для трансплантации.

    I. Транспортировка трупных донорских тканей человека в Глазной тканевой банк Первичный отбор трупов-доноров глазных яблок для трансплантации роговицы производится заочно (по телефону, факсу, электронной почте) сотрудниками ГТБ совместно с сотрудниками танатологических отделений (ТО) по половым, возрастным, нозологическим признакам и срокам давности наступления биологической смерти. В офтальмологии органная пересадка целого глазного яблока от донора-трупа до настоящего времени не производится. В клинике для трансплантации широко используются отдельные тканевые фрагменты трупных глаз человека (роговица, склера и др.). При этом важно сохранить максимальную стерильность трансплантатов трупных донорских роговиц и склеры еще на этапе аутопсии в танатологическом отделении, что практически невыполнимо. В этой связи рекомендуется не выделять необходимые для трансплантации фрагменты тканей трупного глаза в танатологических отделениях, а производить аутопсию всего глазного яблока у донора-трупа с последующей тканевой препаровкой в стерильных условиях ГТБ. Аутопсию (изъятие) глазных яблок у донора-трупа производят сотрудники ТО совместно с сотрудниками ГТБ, допущенные заведующими к этому виду деятельности. Процедура аутопсии производится стерильным секционным и офтальмохирургическим инструментарием. Далее глазные яблоки помещаются в стерильные пластиковые контейнеры для сбора, транспортировки и хранения биоматериала (ООО «Гем», Москва), маркируются и размещаются в индивидуальные ячейки термоизолирующей сумки объемом 10 л для перевозки биоматериала (ООО «Гем», Россия). Кровь для серологического исследования от соответствующего трупа отбирается из бедренной вены, полостей сердца или сосудистых синусов головного мозга по 9 мл в две промаркированные полимерные пробирки (ООО «Гем», Россия) и помещаются в другую термоизолирующую сумку объемом 6 л (ООО «Гем», Россия). Прием трупного тканевого материала для трансплантации осуществляется сотрудниками выездной бригады ГТБ по акту передачи трупных глазных яблок и образцов крови для серологического исследования. Транспортировка трупного донорского материала и образцов крови осуществляется только в оборудованном автомобиле бригадой сотрудников ГТБ. Выездная бригада состоит из водителя и медицинской сестры, прошедших соответствующий санитарно-эпидемиологический инструктаж. ГТБ, комплектующий выездную бригаду, обязан иметь лицензию на медицинскую деятельность по транспортировке органов и тканей человека для трансплантации.

    II. Серологическое исследование образцов крови трупов-доноров тканей глазных яблок на инфицированность ВИЧ, гепатитами В и С, сифилисом

    Трупы-доноры органов и тканей человека для трансплантации в обязательном порядке должны исследоваться на инфицированность ВИЧ, гепатитами В и С, сифилисом согласно действующим ведомственным приказам и инструкциям.

    По мере доставки трупного донорского материала в офтальмологическую клинику термоизолирующая сумка с образцами крови и соответствующей документацией передается в клиническую лабораторию медицинского учреждения, имеющую лицензию на право работы с 3-4 группами патогенности микроорганизмов. Сумка с трупными глазными яблоками помещается в карантинной зоне ГТБ до получения результатов анализов из клинической лаборатории.

    При проведении исследований на выше перечисленные инфекции в клинической лаборатории должен использоваться иммуноферментный анализ (ИФА) с тест-системами от разных производителей, разрешенными действующими ведомственными приказами для работы с донорской кровью: скрининговая ИФА-методика и, одновременно, подтверждающая ИФА-методика (для ВИЧ – антиген/антитело, для гепатита С – иммуноблот, для гепатита В – подтверждающая тест-система для ИФА). Лабораторная диагностика сифилиса осуществляется с помощью ИФА на выявление суммарных антител и антигенов к бледной трепонеме. В случае положительного результата на ВИЧ, образцы сыворотки от этого трупа в течение суток отправляются в территориальный центр по профилактике и борьбе со СПИДом.

    После получения письменного заключения из клинической лаборатории, инфицированные трупные ткани уничтожаются сотрудниками ГТБ по акту контрольной комиссии со строгим соблюдением условий дезинфекции и утилизации, предусмотренных действующими санитарными правилами и нормами. Неинфицированный трупный донорский материал (глазные яблоки) переводится на следующий этап для дальнейшего исследования на жизнеспособность и трансплантабельность.

    III. Способ исследования трупных тканей глазных яблок на жизнеспособность и трансплантабельность

    Отбор жизнеспособного донорского материала для сквозной трансплантации роговицы осуществляется в три этапа:

    1) морфологический скрининг трупных глазных яблок и роговиц на наличие биомикроскопических дефектов;

    2) физиологический скрининг определения в трупных тканях глазных яблок энергетически значимого критерия жизнеспособности;

    3) определение показателя трансплантабельности роговиц (ПТР) и выбор трупных роговиц человека для трансплантации.

    Этап 1. Морфологический скрининг трупных глазных яблок и роговиц на наличие биомикроскопических дефектов

    Глазное яблоко от неинфицированного донора-трупа осматривается с помощью щелевой лампы на наличие морфологических дефектов, врожденных аномалий развития, следов перенесенных глазных операций, глубины посмертных структурных изменений. Выявление грубых морфологических дефектов в тканевых структурах трупного глаза, наличие выраженного дегенеративного кольца на роговице является основанием к выбраковке исследуемого донорского материала. Далее биомикроскопической оценке подвергается роговица согласно шкале морфологических признаков, описанных в баллах:

    1 балл – передний эпителий отечен, на некоторых участках отслаивается пластами от Боуменовой мембраны, местами наблюдается его мозаичная десквамация. Строма отечна по всей толщине, матового цвета. Десцеметова мембрана имеет выраженную складчатость, складки направлены в разные стороны по типу «паркетного пола» или «шахматной доски». Эндотелиальный пласт матовый, прерывается по контурам складок, которые кажутся прозрачными. Контуры радужки практически не просматриваются. Тонус глазного яблока составляет минус 1-2.

    2 балла – поверхностный эпителий незначительно отечен (по типу «запотелого стекла»), целостность его не нарушена (исключение может составлять незначительная механическая десквамация). Строма с начальными признаками отека в нижних слоях, практически не утолщена, прозрачна. Десцеметова мембрана имеет единичные в основном радиально направленные от центра нежные складки; эндотелиальный пласт в основном интактен, на единичных участках вдоль складок Десцеметовой мембраны допустимо едва заметное набухание в виде матовой опалесценции. Контуры радужки просматриваются хорошо, зрачковая кайма просматривается с трудом. Тонус глазного яблока в норме или составляет минус 1.

    3 балла – роговица в целом представлена картиной практически интактного глаза, однако могут наблюдаться явления начального отека с точечными участками ксероза переднего эпителия. Строма абсолютно прозрачна, не утолщена. Могут улавливаться единичные короткие и очень тонкие складки десцеметовой мембраны. Эндотелиальный пласт полностью прозрачен, интактен на всей площади. Контуры радужки и зрачковая кайма просматриваются хорошо. Тонус глазного яблока в норме.

    Для послойной кератопластики морфологически пригодным считается донорский материал, соответствующий 2 и 3 баллам.

    Этап 2. Физиологический скрининг определения в трупных тканях глазных яблок энергетически значимого критерия жизнеспособности.

    Определение энергетически значимого критерия жизнеспособности трупных роговиц человека для сквозной трансплантации осуществляется с помощью скринингового неинвазивного физиологического теста - адреналиновой пробы.

    Адреналиновая проба выполняется следующим образом. На поверхность роговицы трупного глазного яблока, находящегося в транспортировочном контейнере, закапывается 4 – 6 капель 0,1% р-ра адреналина гидрохлорида. От момента закапывания фиксируется стартовое время начала постановки адреналиновой пробы. Начало реакции радужки на действие адреналина определяется по первым признакам вытяжения зрачка в одном из меридианов; в классическом варианте – это феномен «кошачьего глаза».

    Осмотр зрачка производится под щелевой лампой в равных интервалах времени: через 5 минут (степень А), через 10 минут (степень В) и через 15 минут (степень С) от момента закапывания р-ра адреналина и в зависимости от появления первых признаков реакции зрачка.

    Степень А. Если начало реакции зрачка на адреналин составляет 5 мин, проба считается резко положительной по критерию жизнеспособности донорского материала (посмертная потеря АТФ в клетках роговицы по данным 31Р-ЯМР-спектрометрии составляет 0-55% от исходной величины - условной нормы).

    Степень B. Если начало реакции зрачка на адреналин составляет 10 мин, проба считается положительной по биоэнергетическому критерию жизнеспособности донорского материала (посмертная потеря АТФ в клетках роговицы по данным 31Р-ЯМР-спектрометрии составляет 56-69% от исходной величины).

    Степень C. Если начало реакции зрачка на адреналин составляет 15 мин, проба считается сомнительной (условно положительной) и соответствует степени «С» по энергетическому критерию жизнеспособности донорского материала (посмертная потеря АТФ в клетках роговицы по данным 31Р-ЯМР-спектрометрии составляет 70-100% от исходной величины).

    Если реакция зрачка на адреналин отсутствует через 15 минут, проба считается отрицательной и соответствует степени «0» («ноль»), а донорский материал расценивается как энергетически несостоятельный и нежизнеспособный (остаточная квота АТФ в клетках эндотелия практически равна 0%).

    Этап 3. Определение показателя трансплантабельности роговиц (ПТР) и выбор трупных роговиц человека для трансплантации.

    После морфологического и физиологического тестирования трупных донорских роговиц производится определение показателя трансплантабельности роговиц (ПТР) и выбор трупных роговиц человека для задней послойной кератопластики.

    Для задней послойной кератопластики пригодным считается донорский материал, соответствующий показателям трансплантабельности «3-А», «2-А», «3-В», «2-В».

    IV. Техника подготовки заднего послойного трансплантата трупных роговиц человека для трансплантации

    Техника подготовки заднего послойного трансплантата трупных роговиц человека состоит из пяти ступеней, согласно предложенным методикам:

    1) методика антисептической обработки трупных глаз человека;

    2) методика выкраивания роговично-склерального диска и дегидратация в консервационной среде собственной рецептуры;

    3) методика микробиологического тестирования консервированных роговиц на стерильность;

    4) методика морфометрического тестирования эндотелиальных клеток консервированных роговиц для трансплантации;

    5) методика выкраивания послойного трансплантата задних слоев донорской роговицы.

    Ступень 1. Методика антисептической обработки трупных глаз человека

    Трупное глазное яблоко для последующего выкраивания донорской роговицы подвергается антисептической обработке с помощью 5% р-ра Бетадина. Антисептическая обработка трупного глаза производится непосредственно перед выкраиванием и консервацией роговицы по следующей технике:

    -Глазное яблоко, фиксированное с помощью хирургического зажима за остаток прямой или косой мышцы, обильно омывается струей проточной холодной воды в течение 20-30 секунд, после чего ополаскивается струей стерильного изотонического р-ра Натрия хлорида;

    -Глазное яблоко переносится в стерильный пластиковый контейнер объемом 60 мл (ООО «Гем») таким образом, чтобы поверхность роговицы была ориентирована кверху;

    -В контейнер заливается 30 мл 5% р-ра Бетадина. 5% р-р Бетадина приготовляется из официнального 10% р-ра Бетадина непосредственно перед употреблением путем разбавления стерильным изотоническим раствором Натрия хлорида в соотношении 1:1;

    -Глазное яблоко выдерживается в 5% р-ре Бетадина в течение 5 минут, после чего раствор сливается в лабораторную раковину;

    -Глазное яблоко в этом же контейнере заливается до верха первой порцией стерильного изотонического раствора натрия хлорида. Через 10 секунд раствор сливается, а глазное яблоко вновь заливается второй порцией р-ра натрия хлорида на 10 сек, после чего раствор сливается, а глазное яблоко заливается третьей порцией р-ра натрия хлорида на 1 мин, после чего раствор также сливается;

    -Контейнер с обработанным глазным яблоком закрывается винтовой крышкой и в таком виде сохраняется до момента выкраивания и консервации роговицы.

     Период от дезинфекции до начала консервации роговиц не должен превышать 30 мин в связи с дальнейшим нарастанием отека тканей роговицы и возникновением складок десцеметовой мембраны.

    Ступень 2. Методика выкраивания роговично-склерального диска для консервации и трансплантации

    Выкраивание роговично-склерального диска и его холодовая консервация осуществляются по следующей методике:

    -Перед употреблением все инструменты стерилизуются автоклавированием или в сухожаровом шкафу в обычном режиме;

    -После антисептической обработки глазное яблоко фиксируется; далее с помощью шприца и тупоконечной канюли поверхность роговицы орошается стерильным 40% р-ром глюкозы с одновременным механическим слущиванием переднего эпителия роговицы. Более тщательное удаление эпителия производится с помощью роговичного скребца-скарификатора;

    -Бульбарная конъюнктива отсепаровывается от склеры по кругу от лимба и до экватора с помощью роговичных ножниц и фиксационного пинцета, затем иссекается. Поверхность склеры зачищается скребцом и готовится к трепанированию;

    -Трепанирование производится диаметром 16 мм на глубину 2/3 - 3/4 толщины склеры - до первой перфорации и появления в просвете сосудистой оболочки;

    -Склера по окружности дорезается роговичными ножницами, а роговично-склеральный комплекс тупым путем отделяется от иридо-хрусталиковой диафрагмы.

    Алгоритм предполагает 2 подхода:

    1) перенос выкроенного роговично-склерального комплекса во флакон объемом 20 мл со стерильным раствором для хранения роговицы с дальнейшим его переносом в асептических условиях во флакон объемом 20 мл со стерильной средой собственной разработки на 24-48 часов;

    2) непосредственный перенос выкроенного роговично-склерального комплекса во флакон объемом 20 мл со стерильной средой собственной разработки с последующим сохранением в холодильнике при температуре +4…8°С до 6-ти суток.

    Ступень 3. Методика микробиологического тестирования консервированных роговиц на стерильность

    Для бактериологического исследования консервированных роговиц на стерильность в процессе выкраивания роговично-склерального диска из него иссекаются 4 кусочка бульбарной конъюнктивы, а с поверхности роговицы собираются 4 порции скарифицированного переднего эпителия; 2 кусочка конъюнктивы и 2 порции эпителия переносятся в пробирки с жидкой средой Сабуро (10 мл) для выявления грибковой флоры, другие 2 кусочка конъюнктивы и 2 порции эпителия помещаются в пробирку с тиогликолевой средой (10 мл) для выявления бактериальной флоры.

    Пробирки маркируются и помещаются в термостаты. Пробирки со средой Сабуро инкубируются в термостате при +31°С в течение 8 суток, пробирки с тиогликолевой средой инкубируются в термостате при +37°С в течение 5 суток. Все пробирки ежедневно осматриваются на пророст.

    Предварительные результаты бактериологического исследования консервированных роговиц, как правило, определяются уже на 2-4 сутки инкубирования тканевых образцов. В случае пророста инкубационной среды соответствующая роговица во флаконе с раствором для консервации уничтожается путем автоклавирования и утилизируется по акту списания.

    В том случае, если бактериологически инфицированная роговица уже была трансплантирована, реципиенту назначается профилактическая антибиотикотерапия, а пробирка с проросшей питательной средой передается в клинико-бактериологическую лабораторию для типирования микроорганизма и, в случае необходимости, определения его чувствительности к антибиотикам.

    В процессе консервации также осуществляется ежедневный контроль изменения цветности и прозрачности консервационной среды. В норме раствор абсолютно прозрачен, а его цвет ярко-красный. Эти свойства раствора не должны изменяться в течение всего периода консервации роговицы. В случае контаминированности и развития микрофлоры раствор начинает мутнеть, а ее цвет постепенно меняется от ярко-красного до оранжево-желтого. Флаконы с консервированными роговицами, подозрительные на контаминированность, передаются в клинико-бактериологическую лабораторию для дальнейшей верификации.

    Роговицы во флаконах с консервационной средой без признаков контаминированности и с предварительным отрицательным результатом бактериологического исследования соответствующих тканевых образцов после проведения морфометрического тестирования эндотелиальных клеток передаются для выкраивания заднего послойного трансплантата.

    Ступень 4. Методика морфометрического тестирования эндотелиальных клеток консервированных роговиц для сквозной трансплантации

    Перед выполнением выкраивания лоскута заднего послойного трансплантата консервированная роговица должна пройти морфометрическое тестирование с целью исключения донорского материала с низкой пороговой плотностью эндотелиальных клеток. Для определения плотности эндотелиальных клеток (ПЭК) Американской и Европейской ассоциациями ГТБ на современном этапе рекомендуется использовать автоматизированные компьютерные методы морфометрии. При этом табельным для Глазных тканевых банков являются Кератоанализаторы (Eye bank keratoanalyzer) типа модели ЕКА-98, выпускаемой фирмой «Konan» (Япония). Приборы этого типа не относятся к медицинскому оборудованию и не подлежат обязательной сертификации на территории Российской Федерации, могут быть приобретены через представительства соответствующих фирм.

    Морфометрический анализ эндотелиальных клеток на кератоанализаторе достаточно прост и выполняется по автоматизированной методике согласно прилагаемым к прибору программам. Основным преимуществом данной методики является возможность проведения морфометрического анализа роговиц непосредственно во флаконах с консервационной средой, что абсолютно предотвращает инфекционную контаминацию донорского материала в процессе проведения теста. При этом нижний порог ПЭК консервированной роговицы для дальнейшего получения ультратонкого трансплантата не должен быть ниже 2500 кл/мм2.

    Результаты анализа консервированных роговиц с морфометрической характеристикой и микроскопической картиной пласта эндотелиальных клеток выводятся на бумажный бланк в качестве приложения к сопроводительной документации на трупную консервированную роговицу.

    Ступень 5. Методика выкраивания послойного трансплантата задних слоев донорской роговицы

    Выкраивание послойного трансплантата задних слоев донорской роговицы осуществляются по следующей методике:

    -Перед употреблением все инструменты стерилизуются автоклавированием или в сухожаровом шкафу в обычном режиме;

    -Корнеосклеральный диск извлекается из флакона со средой собственной разработки и помещается в искусственную переднюю камеру;

    -Давление в передней камере составляет 90 мм Hg, контроль давления осуществляется с помощью тонометра Барракера;

    -Проводится измерение толщины донорской роговицы с использованием оптического когерентного томографа iVue-100 (Optovue, США); данный способ измерения толщины донорской роговицы достаточно прост и выполняется по автоматизированной методике согласно прилагаемым к прибору программам; основным преимуществом данного способа является высокая точность и быстрота проведения исследования;

    -В зависимости от толщины донорской роговицы проводится выкраивание заднего трансплантата роговицы толщиной 100±30 мкм путем одного реза микрокератома с использованием головки 400, 500 или 550 мкм (Табл. 21).

    Подготовленный ультратонкий трансплантат задних слоев донорской роговицы помещается во флакон объемом 20 мл со стерильной средой собственной рецептуры для дальнейшей передачи в операционный зал.

    Таким образом, был разработан Алгоритм предоперационной подготовки заднего послойного трансплантата роговицы в условиях Глазного тканевого банка, который детально представлен в виде схемы на рисунке 23.


Страница источника: 88-104

OAI-PMH ID: oai:eyepress.ru:article46948
Просмотров: 463



Johnson & Johnson
Bausch + Lomb
Reper
NorthStar
ЭТП
Rayner
Senju
Гельтек
santen
Акрихин
Ziemer
Eyetec
МАМО
Tradomed
Nanoptika
R-optics
Фокус
sentiss
nidek