Реферат RUS  Реферат ENG  Литература  Полный текст

К вопросу дифференциальной диагностики возрастной и осложненной катаракт


1Воронежский государственный медицинский университет имени Н. Н. Бурденко

Цель - определение маркеров нарушения метаболизма при развитии катаракт различного генеза на основе протеомных технологий.
Материал и методы. Выбраны две группы пациентов. 1-я группа – 25 пациентов с возрастной катарактой различной степени зрелости. 2-я – 15 больных с диабетической катарактой (полной и неполной) на фоне ПВР. Забор слезной жидкости в объеме 0,1 мл осуществлялся без дополнительной стимуляции с помощью канюли (ЭТП «МНТК «Микрохирургия глаза»), которая помещалась в нижний свод конъюнктивального мешка. Слезная жидкость замораживалась сразу после взятия при -200С и хранилась без повторного размораживания не более 14 дней. Использовалась переднекамерная жидкость, взятая в процессе операции факоэмульсификации или экстракапсулярной экстракции катаракты. Контролем служил материал трупов: переднекамерная жидкость, стекловидное тело. Забор материала проводился с помощью микрохирургического инструментария через 2 часа после смерти. Объем взятой переднекамерной жидкости был равен 0,05 мл. Переднекамерная жидкость замораживалась сразу после взятия при -200С и хранилась без повторного размораживания не более 14 дней. Исследование белкового состава слезы, жидкости передней камеры, стекловидного тела, субретинальной жидкости пациентов проводили с помощью PAAG электрофореза в присутствии SDS образцов слезы до и после лечения. Среднюю концентрацию белка в пробах определяли спектрофотометрически с использованием спектрофотометра Nano-Drop 1000, Western–блот, для дальнейшего иммуноферментного анализа присутствия пептидов, белков и фрагментов белков в биологических жидкостях глаза мажорные белки слезы, жидкости передней камеры, стекловидного тела, субретинальной жидкости анализировали методом MALDI-TOF - триптический гидролиз белка в полиакриламидном геле, надгелевый раствор использовали для получения MALDI-масс-спектров. Подготовку образцов для масс-спектрометрии проводили смешиванием на мишени раствора образца и раствора 2,5-дигидроксибензойной кислоты, масс-спектры получали на MALDI-времяпролетном масс-спектрометре Ultraflex II BRUKER (Германия), оснащенном УФ лазером (Nd) в режиме положительных ионов с использованием рефлектрона. Идентификацию белков осуществляли при помощи программы Mascot (www.matrixscience.com). Поиск проводился в базе данных NCBI.
Результаты. В составе слезы 1-й группы пациентов (возрастная катаракта различной степени зрелости) были идентифицированы следующие белки: I. Chain A, Structure Of Human Apolactoferrin At 2.0 A Resolution, II.Chain A, Crystal Structure Of Human Fcari Bound To Iga1-Fc III.Chain B, Human Zinc-Alpha-2-Glycoprotein, V.Chain A, Crystal Structure Of Mutant Human Lysozyme Substituted At Left-Handed Helical Positions. Кроме того, был выявлен маркер развития возрастных изменений хрусталика - пероксиредоксин VI в пробах. Во всех образцах при возрастной катаракте проявлялась полоса в области 14 килодальтон. Нами выявлена деградация пероксиредоксина VI на фрагменты с массой около 14 килодальтон. В группе пациентов с осложненной диабетической катарактой и ПВР маркер полностью отсутствовал или был выявлен в сверхмалых количествах. При исследовании переднекамерной жидкости у пациентов 2-й группы были идентифицированы следующие белки: 1 Chain A, Human Serum Albumin Mutant R218p Complexed With Thyroxine (3,3',5,5'-Tetraiodo-L-Thyronine, 2 Chain A, 2.0 Angstrom Structure Of Intact Alpha-1-Antitrypsin: A Canonical Template For Active Serp, 3a Chain A, 2.85 A Crystal Structure Of Pedf etc. Кроме того, был выявлен маркер развития метаболических нарушений при осложненной катаракте и ПВР - белок 45 kDa - транспортер гидрофобных соединений семейства Sec - 14p – подобных белков.
Выводы.
Пероксиредоксин VI (PRDX6) – важный антиоксидантный белок, который играет важную роль в метаболизме фосфолипидов. Manevich и Fisher доказали, что содержание PRDX6 стабильно повышено в клетках, защищенных от оксидативного стресса. Снижение концентрации белка приводит к усугублению механизмов апоптоза у пациентов с диабетической катарактой и ПВР, что приводит к большему числу послеоперационных осложнений в этой группе. Таким образом, отсутствие маркера в слезе может служить основанием для планирования хирургического вмешательства, как при высокой степени риска, и при этом расценивать любую катаракту как осложненную.
In this study we investigated the effects of peroxiredoxin 6 (PRDX6) on the proliferation and cataract formation. 2 groups of patients were evaluated for expression of PRDX6 by SDS PAAG –electrophoresis, spectrophotometry and invasion assay, western blot mass spectrometry in tears, intraocular , subretinal fluid, vitrum. The 1 group -25 cataract patients. The 2 group – diabetic cataract patients with PVR (15). Overexpression of PRDX6 , 45 kDa in 1 group (cataract patients ) compared with diabetic cataract patients with PVR was confirmed. The enhancement was associated with decreasing levels of PRDX6 in tears and Sec -14p marker of intraocular fluid in diabetic patients. PRDX6 is an important antioxidant enzyme and has a major role in ocular phospholipid metabolism.


Сателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XII Российского общенационал...

Федоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2019 XVI Всероссийская научно-практичес...

Актуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIV Всероссийская научная ...

Современные тенденции развития офтальмологии - фундаментально-прикладные аспекты Всероссийская научно-практическая конференцияСовременные тенденции развития офтальмологии - фундаментальн...

Восток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2019 Международная конференция по офтальмологии

Академия ZiemerАкадемия Ziemer

Белые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Международного офтальмологического конгрессаБелые ночи - 2019 Сателлитные симпозиумы в рамках XXV Междун...

Новые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно-практическая конференцияНовые технологии в офтальмологии - 2019 Всероссийская научно...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии – 2019 ХVII Всероссийская научно-практическаяконференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии –...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2019»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО

VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)

XVII Всероссийская школа офтальмологаXVII Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Top.Mail.Ru


Open Archives