Онлайн доклады

Онлайн доклады

Научно-образовательные вебинары

Научно-образовательные вебинары

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Конгресс

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Конференция

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Пироговский офтальмологический форум

Конференция

Пироговский офтальмологический форум

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Научно-образовательные вебинары

Научно-образовательные вебинары

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Конгресс

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Конференция

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Пироговский офтальмологический форум

Конференция

Пироговский офтальмологический форум

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Все видео...

Использование конфокальной микроскопии для визуализации осложнений лазерного интрастромального кератомилеза


Конфокальная микроскопия (КМ) позволяет проводить исследования биологических тканей на клеточном уровне в состоянии функциональной активности и осуществлять демонстрацию результатов в четырех измерениях - высота, ширина, глубина и время. Качество получаемого изображения коррелирует с прозрачностью объекта. Таким образом, оптимальные условия и, одновременно, широчайшие возможности для изучения, предоставляет роговица глаза [5].
Принцип КМ предложен Minsky в 1957 году и позднее модифицирован Egger и Petran в тандемную сканирующую конфокальную систему, основным элементом которой является диск Nipkow [7].
Современное применение конфокальных микроскопов в офтальмологии делится на научно-исследовательское, экспертное и клиническое.
Научно-исследовательское направление заключается в описании и анализе различных состояний роговицы, как находящейся в нормальном физиологическом состоянии, так и при травмах, воспалительных заболеваниях, дистрофиях роговицы, при исследовании процессов неоваскуляризации после ожогов роговицы, репаративных процессов, для оценки реакции роговицы на лекарственные средства, трансплантаты, инородные включения [5].
Экспертное применение КМ позволяет проводить оценку воздействия на роговицу фармакопрепаратов, контактных линз, имплантатов [6].
Клиническое направление выводит офтальмологию на качественно новый уровень прижизненной динамической визуализации гистоморфологических изменений роговицы различной этиологии [5]. В кераторефракционной хирургии КМ используется для оценки включений в интерфейсе [1], клеточных элементов, состояния интракорнеальных нервных волокон, для измерения толщины лоскута после LASIK, диагностики флера и дифференциальной диагностики помутнений роговицы [2,4].
В «доконфокальный» период в арсенале офтальмологов отсутствовали методы, позволяющие изучить прижизненную гистоморфологическую структуру роговицы пациента, что затрудняло полноценное понимание таких процессов, как послеоперационное заживление, рубцевание и др., и приводило к необходимости экстраполяции результатов морфологических исследований экспериментальных животных на клиническое течение у пациентов [3].
В связи с вышеизложенным, целью настоящей работы явилось определение морфологических особенностей различных осложнений лазерного интрастромального кератомилеза (ЛАЗИК) с помощью конфокальной микроскопии роговицы.
Материалы и методы:
Для изучения гистоморфологии роговицы пациентов in vivo применяли конфокальный микроскоп Confoscan 4 (Nidek, Japan) со следующими параметрами: линза для исследования через иммерсионный гель – 40х, NA 0,75, WD 1,98 мм, Zeiss; исследуемая зона роговицы- 460 х 345 ?m, получаемое изображение - 768 х 576 pixel, латеральное разрешение - 0,6 ?m/pixel, скорость сканирования – 25 снимков в секунду. При исследовании использовали автоматический режим сканирования всей толщины роговицы, мануальный режим для визуализации определенных корнеальных структур, функцию автоматического подсчета плотности эндотелиальных клеток с оценкой полиморфизма и размера клеток, а также функцию оптической пахиметрии (с помощью Z-ring).
Обследовано 76 пациентов (121 глаз) с верифицированными клинически послеоперационными осложнениями после ЛАЗИК.
Результаты конфокальной микроскопии.
1. Гипосекреторная форма синдрома сухого глаза с нейротрофичекой эпителиопатией: на поверхности эпителия обнаружено большое количество гиперрефлектирующих включений, вероятно, адсорбировавшихся из патологически измененной слезной жидкости; в поверхностных слоях эпителия визуализируется большое количество псевдокератинизированных эпителиоцитов, чередующихся с локальными эпителиальными дефектами; метаплазия крыловидных эпителиоцитов (клетки увеличены в размерах, неправильной формы, отмечается выраженный полиморфизм, они содержат гиперрефлектирующие ядра с нарушенным (увеличенным) соотношением ядро/цитоплазма); в строме отмечается большое количество дендриформных клеток Лангерганса и воспалительных клеток макрофагального ряда.
2. Асептический отек роговичного клапана в раннем послеоперационном периоде: выявляется отек цитоплазмы эпителиоцитов, нарушение цитоархитектоники и отсутствие четких границ эпителиальных слоев, отек боуменовой мембраны, диффузное помутнение экстрацеллюлярного матрикса, а также утолщение роговичного лоскута до 170 мкм при расчетной толщине клапана, сформированного кератомом Zyoptix – 105 мкм.
3. Неспецифический диффузный ламеллярный кератит: в ранней стадии - очаговое скопление полиморфных клеток (макрофаги, «активные клетки», дендриформные клетки) в области интерфейса, локальный отек экстрацеллюлярного матрикса по периферии фокуса ДЛК; в поздней стадии – локальные очаги фиброплазии в интерфейсе с четкой демаркацией от интактной стромы.
4. Врастание эпителия под клапан: скопление эпителиальных клеток, аналогичных базальным эпителиоцитам в интерфейсном пространстве, имеющее связь с краем клапана, локальная зона перифокального отека.
5. Послеоперационная кератэктазия: эпителий практически не изменен, толщина роговичного лоскута от 95 до 130 мкм; по обеим сторонам интерфейса - обширная интрастромальная ацеллюлярная зона общей протяженностью 100 - 160 мкм. Она представляла собой экстрацеллюлярный матрикс с неполной прозрачностью и отсутствием дифференцированных клеточных элементов. Визуализировались «обрывки» нервных волокон, воспалительные клетки макрофагального ряда и дендриформные клетки Лангерганса, мигрирующие из корнеосклеральной зоны. У всех пациентов в области ацеллюлярной зоны визуализировались разнонаправленные линии разрежения стромы, аналогичные линиям Фогта при первичном кератоконусе. Однако в отличие от них, обнаруженные нами линии находились в передней части стромы и были более хаотично расположены.
Заключение.
Таким образом, проведенные с помощью конфокальной микроскопии витальные гистоморфологические исследования роговицы у пациентов с атипичным послеоперационным течением ЛАЗИК, позволили определить морфологические особенности некоторых осложнений и прояснить их этиопатогенетические звенья.
Список литературы.
1. Алио Х.Л., Хавалой Х., Негри Э.П. и соавт. Качество интерфейса роговичного лоскута после ЛАСИК. Исследование с помощью конфокального микроскопа // Офтальмология.- 2004.- том 1, № 3.-С.12-24
2. Качалина Г.Ф., Майчук Н.В., Кишкин Ю.И., Майчук Д.Ю Использование конфокальной микроскопии – метода прижизненной визуализации ультраструктуры роговицы в кераторефракционной хирургии / В сб. научн. статей VII Международной научно-практической конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии – 2006»: М., 2006.- С. 82-89.
3. Buratto L., Brint S. LASIK Surgical Techniques and Compilations // Hard Cover. – 2000. – 624 p.
4. Kauffmann T., Bodanowitz S., Hesse L. et al. Corneal reinnervation after photorefractive keratectomy and laser in situ keratomileusis: an in vivo study with a confocal videomicroscope // Ger. J. Ophthalmol.- 1997.-N5.- P.508 – 512.
5. Lemp M.A., Dilly P.N., Boyde A. Tandem-scanning (confocal) microscopy of the full-thickness cornea // Cornea.- 1985/1986.- vol. 4.- P. 205 – 209.
6. Masters B.R., Bohnke M. Three-dimensional confocal microscopy of the human cornea in vivo // Ophthalmic. Res.- 2001.- vol. 33.- P. 125 – 135.
7. Minsky M. Memoir on inventing the confocal scanning microscope // Scanning.- 1988.- Vol. 10.- P. 128 – 138.

Просмотров: 703