Онлайн доклады

Онлайн доклады

Научно-образовательные вебинары

Научно-образовательные вебинары

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Конгресс

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Конференция

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Пироговский офтальмологический форум

Конференция

Пироговский офтальмологический форум

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Научно-образовательные вебинары

Научно-образовательные вебинары

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ-2020

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Конгресс

Расширенное заседание Экспертного Совета по проблемам глаукомы и группы «Научный авангард»

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Сателлитные симпозиумы в рамках XII Съезда Общества офтальмологов России

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Конференция

Современные технологии лечения заболеваний глаз. Научно-практическая конференция

Пироговский офтальмологический форум

Конференция

Пироговский офтальмологический форум

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики и хирургического лечения патологии заднего отдела глазного яблока и зрительного нерва Межрегиональная научно-практическая конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Инновационные технологии диагностики, терапии и хирургии патологии переднего отдела глазного яблока, глаукомы и придаточного аппарата органа зрения Межрегиональная научно-практическая конференция

Все видео...
 Реферат ENG  Полный текст

Индуцирующее влияние микроокружения на морфофункциональный статус мононуклеаров и фибробластов


Цель — в эксперименте in vitro изучить влияние направленного движения жидкости на морфофункциональный статус клеток, обеспечивающих развитие макрофагальной и фибробластической фаз воспалительно-репаративной реакции.
Материал и методы. Разработано устройство — биореактор in vitro, позволяющее моделировать движение питательной среды, сходное с движением жидкости в полости глазного яблока. Устройство представляет собой замкнутую систему с камерой, содержащей полупроницаемый фильтр. Система предварительно заполнялась питательной средой, содержащей 200,0 мл питательной среды ДМЕМ в модификации Iscove или RPMI 1640 и 4% раствор гентамицина (из расчета 0,02 мл на 10,0 мл среды). Благодаря работе роликового насоса в биореакторе создавалось равномерное направленное движение питательной среды со скоростью 2,1-2,4 мм³/мин.
Выполнена серия экспериментов по культивированию клеток мононуклеарной и фибробластической популяций в различных условиях. В 1-й серии эксперимента объектом исследования служили аутологичные мононуклеары крови здоровых доноров-добровольцев, выделенные методом фракционирования на градиенте плотности. Полученные клетки доводили питательной средой до конечной концентрации 3?106 нуклеаров/мл и размещали на фильтре.
Во 2-й серии объектом исследования была культура фибробластов легкого человека (ООО «Банк стволовых клеток», Томск). Клетки свободны от посторонних вирусных (ВИЧ, гепатит, герпес и др.) и бактериальных агентов (сифилис, микоплазмы, хламидии и др.). Жизнеспособность клеток, определяемая согласно ISO 10993-5 по исключению окрашивания в тесте с 0,4% трипановым синим, составляла 91- 93%. Культуру фибробластов человека после 3-4 пассажей в концентрации 5?104 клеток/мл вводили в камеру и помещали на фильтр. Первичную клеточную культуру инкубировали при постоянном движении питательной среды в течение 24 и 48 час.
В качестве контроля клетки культивировали на полупроницаемом фильтре, помещенном в чашку Петри с питательной средой при строгом соблюдении температурного режима (37° С), содержания СО2 (5-7%) и уровня влажности (100%).
Результаты. При проточном культивировании (биореактор in vitro) мононуклеаров крови получены следующие результаты. Через 24 час от начала эксперимента в клетках отмечалась высокая активность α-нафтилацетатэстеразы (63,81±1,034), которая блокировалась фторидом натрия. Щелочная фосфатаза в культивируемых клетках не выявлялась.
Спустя 48 час в мононуклеарах отмечалось повышение активности α-нафтилацетатэстеразы (69,17±1,26) по сравнению с исходными показателями и клетками, культивируемыми в стандартных условиях (pU<0,01). При проведении реакции с фторидом натрия на фильтре обнаруживались единичные элементы, в которых активность неспецифической эстеразы (64,93±1,21) не подавлялась, а также выявлялась активность щелочной фосфатазы.
При культивировании мононуклеаров крови в стационарных условиях в клетках отмечалась умеренная активность α-нафтилацетатэстеразы, которая постепенно повышалась в процессе культивирования (pU<0,05). Активность неспецифической эстеразы ингибировалась фторидом натрия. Щелочная фосфатаза в культивируемых клетках не выявлялась.
При проточном культивировании фибробластов были получены следующие результаты. Через 24 час от начала эксперимента цитохимически в фибробластах, культивируемых в проточных условиях, отмечалась умеренная активность α-нафтилацетатэстеразы (22,56±0,90) и щелочной фосфатазы (10,23±1,05).
Спустя 48 час в описываемых клетках отмечалось повышение активности обоих ферментов по сравнению с исходными показателями и клетками, культивируемыми в стандартных условиях (pZ<0,01). При этом уровень α-нафтилацетатэстеразы составлял 26,98±0,87, щелочной фосфатазы — 14,67±1,21.
При культивировании фибробластов в стационарных условиях на протяжении всей серии экспериментов цитохимически в клетках отмечалась незначительная активность α-нафтилацетатэстеразы, которая постепенно повышалась в процессе культивирования (pZ<0,05). Щелочная фосфатаза в культивируемых клетках не выявлялась.
Выводы. При культивировании мононуклеаров и фибробластов in vitro в условиях направленного движения питательной среды, сходного с движением внутриглазной жидкости, отмечается повышение их внутриклеточной ферментативной активности. При модулирующем влиянии факторов микроокружения (направленный поток жидкости, внеклеточный матрикс) ускоряется процесс созревания и дифференцировки клеток в зрелые формы. Полученные в ходе экспериментальных исследований данные расширяют представления о влиянии микроокружения на морфофункциональный статус мононуклеаров и фибробластов и позволяют с новых позиций подойти к изучению клеточных механизмов развития фиброваскулярной пролиферации в полости глазного яблока.

Просмотров: 814