Таблица 1 Содержание изучаемых показателей в стекловидном теле пациентов обследованных групп (М±m)
Таблица 2 Коррелятивные взаимосвязи между изучаемыми показателями в стекловидном теле пациентов с ПДР
В последние годы появились научные публикации, в которых авторы рассматривают многие биологически активные вещества, как участников развития ПДР. Эти данные позволяют считать активацию синтеза VEGF одним из ключевых, но не первичных звеньев патогенеза диабетической ретинопатии (ДР). Данные об участии в патогенезе ДР медиаторов ангиогенеза, пролиферации, воспаления, иммунного реагирования являются предметом дискуссии и направлены на формирование мультифакториальной модели развития ПДР, в рамках которой обсуждаются потенциальные молекулярные мишени для создания новых биоинженерных препаратов [2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9].
В связи с этим, актуальной проблемой является углубленное изучение и уточнение некоторых ключевых аспектов патогенеза ПДР на клеточно-молекулярном уровне.
Цель
Изучить концентрации цитокинов и факторов роста в стекловидном теле у пациентов с пролиферативной диабетической ретинопатией (ПДР) для оценки активности воспалительного и ангиопролиферативного процесса.
Материал и методы
Было обследовано 63 пациента, прошедших хирургическое лечение по поводу тракционной отслойки сетчатки. Основную группу составили 38 пациентов с ПДР и тракционной отслойкой сетчатки. Средний возраст пациентов 50.5±3.2 года (46-62 года). Стаж заболевания сахарным диабетом более 8 лет (8-16 лет). Содержание гликозилированного гемоглобина HbA1С составило 9.9% (6.9% - 12.2%). Группу сравнения составили 25 пациентов с тракционной отслойкой сетчатки без СД. Средний возраст пациентов - 53.5±2.6 лет.
Критерием включения в основную группу являлось наличие у них СД и ПДР. Критерием включения в группу сравнения явилось отсутствие у пациентов СД и ПДР. Критерием исключения для обеих групп являлось наличие у пациентов острых и обострения хронических воспалительных заболеваний органа зрения, первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ), увеита различной этиологии, аутоиммунных и опухолевых процессов любой локализации.
В качестве исследуемого материала использовалось стекловидное тело, забранное на начальных этапах витрэктомии.
Определение VEGF, моноцитарного хемотаксического белка-1 (МСР-1) выполнялось на тест-системах производства «Вектор-Бест», Россия. Определение интерлейкинов 4, 6, 8, 10, 17А выполнялось на тест-системах производства «Цитокин», Россия. Определение TGF-β 2 выполнялось на тест-системах DRG-diagnostics (Германия). Определение фактора роста пигментного эпителия (PEDF) выполнялось на тест-системах производства CUSABIO, КНР.
Результаты иммуноферментного анализа регистрировали на вертикальном фотометре «Униплан» Россия при длине волны 450 нм.
Статистическая обработка проводилась методами непараметрической статистики. Значимость различий вариационных рядов в несвязанных выборках оценивали с помощью критерия Манна-Уитни. Корреляция показателей вычислялась по методу Спирмена. Данные представлены в виде M±m, где M – средняя, m – ошибка средней. Достоверным считали различие между сравниваемыми рядами с уровнем достоверной вероятности 95% (р<0.05).
Результаты
В результате проведенного исследования были получены результаты, представленные в таблице 1.
Проведенное исследование показало, что в механизмах развития ПДР значимую роль играет активность местного воспалительного процесса, о чем свидетельствуют достоверно высокие, относительно величин изучаемых показателей в группе сравнения, уровни содержания провоспалительных цитокинов ИЛ-17А, ИЛ-8, ИЛ-6, МСР-1, а также и индуктора гуморального звена иммунной системы ИЛ-4 в стекловидном теле. Указанные процессы происходят на фоне активации сосудистой пролиферации и проявляются более чем 17-кратным повышением содержания фактора роста эндотелия сосудов и TGF-β 2. Повышение содержания фактора роста пигментного эпителия в стекловидном теле пациентов основной группы можно расценивать, как компенсаторное и направленное на подавление ангиопролиферации, однако, не эффективное.
Для оценки наличия взаимосвязей между изучаемыми патологическими процессами в механизмах развития ПДР, был проведен корреляционный анализ полученных данных, результаты которого представлены в таблице 2. Были установлены следующие достоверные коррелятивные взаимосвязи.
Прямая взаимосвязь между концентрациями VEGF и TGF-β 2 (r=0.46, p<0.05), свидетельствующая о сопряженности синтеза этих факторов роста, механизмах развития ПДР, что подтверждает предположение об участии TGF-β 2 в процессах неоангиогенеза при ПДР. Прямые взаимосвязи между концентрациями VEGF и ИЛ-17A (r=0.45, p<0.05) и VEGF и ИЛ-8 (r=0.45, p<0.05), свидетельствуют о взаимосвязи активности местного воспалительного процесса и неоангиогенеза в механизмах развития ПДР и триггерной роли воспаления в активации сосудистой пролиферации. Прямые взаимосвязи между концентрациями PEDF и ИЛ-17A (r=0.48, p<0.05) и между концентрациями PEDF и ИЛ-8 и PEDF (r=0.58, p<0.05), отражающие развитие компенсаторных реакций в патогенезе ПДР, направленных на подавление активности местного воспалительного процесса и сосудистой пролиферации. Прямые взаимосвязи между концентрациями ИЛ-17A и ИЛ-8 (r=0.59, p<0.05) и между концентрациями МСР-1 и ИЛ-8, (r=0.45, p<0.05), свидетельствующие о сопряженности синтеза провоспалительных цитокинов в механизмах развития местного воспалительного процесса при ПДР. Прямые взаимосвязи между концентрациями ИЛ-17A и ИЛ-4 (r=0.62, p<0.05), ИЛ-17A и ИЛ-10 (r=0.56, p<0.04), ИЛ-8 и ИЛ-4 (r=0.71, p<0.01) и ИЛ-8 и ИЛ-10 (r=0.51, p<0.04), свидетельствуют о сопряженности синтеза провоспалительных и противоспалительных цитокинов в механизмах развития местного воспалительного процесса у пациентов с ПДР. Несомненный интерес вызывает наличие прямой взаимосвязи между концентрациями VEGF и ИЛ-10 (r=0.46, p<0.05) и между TGF β 2 и ИЛ-10 (r=0.6, p<0.04), которые, вероятно, могут служить подтверждением немногочисленных литературных данных, свидетельствующих о влиянии ИЛ-10 на регуляцию синтеза этих двух факторов роста, обладающих ангиогенной активностью.
Выводы
Полученные данные свидетельствуют об активности и сопряженности воспалительного, пролиферативного процессов и сосудистой пролиферации в патогенезе ПДР.
