Гистологическая оценка эффективности комбинированного лечения аденовирусного увеита, осложненного невритом зрительного нерва в эксперименте

     Воспалительные заболевания глаз имеют большой удельный вес в структуре всей офтальмопатологии и составляют более 40% амбулаторного приема. По данным литературы, на них приходится 80% временной нетрудоспособности среди больных с патологией глаз, до 50% стационарных больных. Более половины этих больных имеют доказанный или предполагаемый вирусный характер заболевания. Аденовирус является самой частой причиной вирусных и инфекционных конъюнктивитов. 80% населения имеет комплементсвязывающие антитела к аденовирусам, что говорит о распространенности аденовирусных заболеваний человека. Аденовирусные инфекции глаз, проявляющиеся в виде аденовирусного конъюнктивита (АВК) или эпидемического кератоконъюнктивита (ЭКК), отличаются высокой распространенностью и являются серьезной проблемой здравоохранения. АВК составляет 90% всех случаев вирусных конъюнктивитов и от 15 до 70% случаев инфекционных конъюнктивитов [1-4].

    Передний увеит при аденовирусных кератоконъюнктивитах клинически диагностируется в 3-9% случаев. Вместе с тем, прирост титра антител к аденовирусу у больных с изолированным увеитом отмечается в 24% случаев, что позволяет предположить этиологическую роль данной инфекции у более значительного числа больных [1, 2, 4-7].

    На сегодняшний день крайне актуальной остается проблема терапии наиболее распространенных и социально значимых вирусных инфекций (адено- и герпесвирусных), местные проявления которых встречаются практически у каждого человека ежегодно.

    Таким образом, разработка новых способов комбинированной противовирусной терапии аденовирусного увеита, включая увеит с осложненным течением, является перспективной задачей.

    Цель

     Гистологически доказать эффективность комбинированного лечения аденовирусного увеита, осложненного невритом зрительного нерва, в эксперименте.

    Материал и методы

    В эксперименте вызывали внутриглазную аденовирусную инфекцию 12 кроликам (24 глаза) породы Шиншилла массой 2,0-2,5 путем введения в переднюю камеру и интравитреально (по 0,1 мл) аденовируса типа 6 с последующим комплексным (местно и системно) противовирусным лечением.

    Экспериментальные животные были разделены на 2 группы. Контрольная группа (6 кроликов, 12 глаз) не получала какого-либо специфического лечения. Основная группа (6 кроликов, 12 глаз) получала местную (глазной гель ганцикловир) и общую (препарат имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты – ингавирин) противоаденовирусную терапию. Исследуемый гель наносился в конъюнктивальную полость ежедневно с помощью стерильных шпателей 4 раза в день. Ингавирин растворяли в воде и этой эмульсией поили экспериментальных животных 1 раз в день. Основная группа животных получала лечение, начиная с 4-х суток после инфицирования.

    Животные были выведены из эксперимента методом воздушной эмболии на 7 и 14 сутки после развития аденовирусного увеита, осложненного невритом зрительного нерва. На 7 сутки было выведено из эксперимента по 3 кролика (6 глаз) из 1 и 2 групп, остальные животные были выведены на 14 сутки. Энуклеированные глазные яблоки исследовали гистологически по общепринятой методике. Сначала фиксировали в 10% растворе нейтрального формалина, затем обезвоживали в спиртах восходящей концентрации (60°, 70°, 80°, 90°, 100°), ксилоле. В каждом растворе взятый материал находился по 24 часа, затем его заливали в парафин. Из блоков были изготовлены серийные срезы толщиной 7-10 мкм, которые окрашивали гематоксилин-эозином. Анализ гистологических препаратов проводился методом световой микроскопии с фоторегистрацией на кафедре патологической анатомии Башкирского государственного медицинского университета.

    Результаты и обсуждение

     На 7 и 14 сутки после начала эксперимента в гистологических препаратах глаз экспериментальных животных исследуемых групп, инфицированных аденовирусом, выявляли воспалительный процесс в радужке, цилиарном теле и зрительном нерве. Степень выраженности данных проявлений зависела от суток проведения морфологических исследований и от того, получали животные лечение или нет.

    В контрольной группе в гистологических препаратах глаз экспериментальных животных, инфицированных аденовирусом, на 7 сутки выявляли острый воспалительный процесс в радужке, цилиарном теле и зрительном нерве. В передней камере визуализировали скопление воспалительного экссудата, представленного белковой жидкостью, слущенным эпителием, моноцитами, нейтрофилами, лимфоцитами и эозинофилами. Передний эпителий радужки набухший, на поверхности видны нити фибрина, инфильтрированные нейтрофилами, моноцитами и макрофагами. Определяли выраженный межуточный и периваскулярный отек в сосудистом слое (рис. 1).

    В цилиарном теле наблюдали выраженный отек, диффузную воспалительную инфильтрацию, представленную нейтрофильными лейкоцитами, эозинофилами, моноцитами и лимфоцитами, местами наблюдали формирование абсцессов. Эпителий с признаками вакуолизации цитоплазмы, местами слущен (рис. 2).

    На срезе зрительного нерва, между нервными волокнами выявляли скопление отечной жидкости, очаги лимфоцитарной инфильтрации с примесью единичных нейтрофилов, а также периваскулярную инфильтрацию лимфоцитами и единичными лейкоцитами. В коллатеральных сосудах глазной артерии и вены зрительного нерва отмечено увеличение проницаемости их стенок, происходит экссудация плазмы крови в периваскулярную зону и тканевые структуры (рис. 3).

     В гистологических препаратах глаз экспериментальных животных после комбинированного лечения в тот же срок наблюдали отек пигментного слоя эпителия радужки, с небольшими очагами десквамации, а также признаки воспаления в наружном пограничном слое, в клеточном составе преобладали нейтрофилы, лимфоциты и моноциты. В сосудистом слое определяли межуточный отек. Сосуды резко расширены, неравномерно кровенаполнены (рис. 4).

    В цилиарном теле отек, определялись лишь небольшие очаги некроза, без образования абсцессов, десквамации подверглись единичные клетки эпителия, полнокровные сосуды были только умеренно расширены, строма была диффузно инфильтрирована лишь лейкоцитами. В полости передней камеры определялось скопление белковой жидкости с большим количеством нейтрофилов (рис. 5).

    В нервной ткани на 7 сутки все еще сохранялся межуточный отек, определялись очаги разрушения капсулы и повреждения нервных волокон, сосуды были резко расширенные, имелись очаги лейкоцитарной инфильтрации в участках деструкции (рис. 6).

     На 14 сутки у кроликов контрольной группы наблюдали еще более выраженные изменения в структурах глазного яблока. Так, определяли очаговую десквамацию переднего эпителия радужки, в сосудистом слое резко расширенные и кровенаполненные сосуды. Пигментный слой был с участками эрозирования, на его поверхности определяли скопление белковых масс с примесью нейтрофилов и эозинофилов (рис. 7).

    В толще цилиарного тела и его отростках имелась выраженная воспалительная инфильтрация, представленная большим количеством моноцитов, нейтрофилов, лимфоцитов, эозинофилов и макрофагами. В его строме находили межуточный и выраженный периваскулярный отек, сосуды с признаками плазматического пропитывания. Эпителиальный слой цилиарного тела отечный, часть эпителиоцитов дистрофически изменена и разрушена, местами имелись очаги десквамации. На поверхности эпителия цилиарного тела и его отростков замечен экссудат, представленный белковой жидкостью, инфильтрированной нейтрофилами, эозинофилами, моноцитами с пластами слущенного эпителия (рис. 8).

    В зрительном нерве также протекала выраженная воспалительная реакция. Обнаружены очаги деструкции нервных волокон зрительного нерва на фоне диффузной инфильтрации лимфоцитами, эозинофилами, нейтрофильными лейкоцитами, моноцитами, единичных эритроцитов. В нервной ткани определялись перицеллюлярный отек, петехиальные кровоизлияния, полнокровие сосудов, периваскулярная лимфоцитарная инфильтрация, дистрофические изменения нейроцитов. Сосуды зрительного нерва были расширены, неравномерно кровенаполнены (рис. 9).

    Следовательно, в ткани зрительного нерва определялся выраженный деструктивный процесс с очагами гистолиза, выраженной острой воспалительной инфильтрацией с преобладанием эозинофилов, нейтрофилов.

     В основной группе, в отличие от контрольной, гистологическая картина на 14 сутки характеризовалась изменениями в виде локальных повреждений с формированием небольших эрозий в пигментном эпителиальном слое радужки. В очаге повреждения определялась слабо выраженная воспалительная реакция. На поверхности эпителия определялись белковые массы с примесью клеток воспаления и слущенного эпителия (рис. 10).

    В цилиарном теле определяли лишь слабо выраженный отек, структура его была уплотнена за счет островков коллагеногенеза, имелись разрастания соединительно-тканных волокон и слабо выраженные диффузные инфильтраты, представленные преимущественно моноцитами и лимфоцитами (рис. 11).

    В полости передней камеры - белковая жидкость с примесью слущенного эпителия и единичных лейкоцитов. В нервной ткани замечен слабо выраженный отек, неравномерное кровенаполнение сосудов, диффузная инфильтрация лимфоцитами и моноцитами (рис. 12).

    Таким образом, у кроликов основной группы, получавших местное (глазной гель ганцикловир) и общее (ингавирин) специфическое противовирусное лечение, положительный терапевтический результат выражался в уменьшении выраженности воспалительной реакции, а также появлении признаков репарации тканевых структур.

    Заключение

    В эксперименте доказана терапевтическая эффективность сочетанного (местно и системно) применения специфических противовирусных препаратов (ганцикловир и ингавирин) при лечении экспериментального аденовирусного увеита, осложненного невритом зрительного нерва. Данный метод может быть рекомендован для практического использования в клинике.