Таблица 1 Характеристика групп пациентов по половому, возрастному и эндокринологическому признакам
Таблица 2 Результаты иммунологического исследования при различных стадиях ДР, M±m
В последние годы появилось немало сообщений о роли эритропоэтина (ЭПО) как проангиогенного фактора в развитии пролиферативной диабетической ретинопатии (ПДР) [2]. Занимая центральное место в стимуляции эритропоэза, ЭПО секретируется в ответ на гипоксию. Транскрипция мРНК ЭПО происходит в ответ на связывание гена ЭПО с комплементарным участком индуцируемого гипоксией фактора 1а (HIF-1a). В различных сообщениях авторы сходятся во мнении о локальном значимом повышении уровня ЭПО у пациентов с СД, более выраженном на последних стадиях развития ДР. Но, помимо проангиогенного, подчеркивается противовоспалительная и нейропротекторная роль ЭПО, проявления которой, вероятно, зависят от стадии ДР [1]. Для более детального анализа данного вопроса было бы целесообразным исследование ЭПО наряду с факторами иммунного воспаления в динамике развития ДР.
Цель
Сравнительная оценка ЭПО и некоторых факторов гуморального иммунитета при различных стадиях ДР.
Материал и методы
Исследование проводилось в трех основных группах пациентов с СД. Разделение на группы проводилось в соответствие со стадией ДР: I-я группа (27 пациентов, 27 глаз) – непролиферативная ДР (НДР); II-я группа (25 пациентов, 25 глаз) – препролиферативная ДР (ППДР); III-я группа (24 пациента, 24 глаза) – ПДР. У всех пациентов отмечалось наличие диабетического макулярного отека (ДМО). В таблице 1 представлены половые, возрастные, эндокринологические параметры в исследуемых группах.
Критерием исключения из исследования было наличие у пациентов острых и обострения хронических воспалительных заболеваний органа зрения, первичной открытоугольной глаукомы, неоваскулярной глаукомы, гемофтальма, сопутствующих аутоиммунных, опухолевых и инфекционных заболеваний. Контрольную группу составили 30 практически здоровых лиц в возрасте от 46 до 62 лет.
Офтальмологические методы исследования: визометрия, биомикроскопия, офтальмоскопия глазного дна, тонометрия, сферопериметрия, эхоофтальмография, оптическая когерентная томография (ОКТ), флуоресцентная ангиография (ФАГ). Максимально корригируемая острота зрения (МКОЗ) составила в среднем 0,3±0,065, внутриглазное давление было в пределах от 17 до 21 мм рт.ст., средняя толщина макулярной области (ТМО) 425,05±85,5 мкм.
Уровень системной экспрессии ЭПО исследовался методом иммуноферментного анализа на аппарате Stat Fax-2100 (США) с помощью тест-системы EPO (Erythropoietin, ELISA, Германия). У всех пациентов также были оценены сывороточные уровни иммуноглобулинов классов A, G, M (IgA, IgG, IgM), С3 и С4 компоненты системы комплемента методом радиальной иммунодиффузии по Манчини с помощью наборов фирмы Cromatest (LINEAR CHEMICALS SL, Испания).
Для статистической обработки результатов исследования использовались прикладная компьютерная программа Statistica 7.0 (StatSoft Inc., США), регрессионный и корреляционный анализы. Данные в таблицах представлены в виде M±m, где: М – средняя, m – ошибка средней.
Pезультаты
Результаты иммунологического исследования представлены в табл. 2. Уровень системной экспрессии ЭПО был повышен на всех стадиях ДР (р<0,01) относительно контроля. Кроме того, уровень ЭПО при ПДР статистически значимо более высокий (р<0,05), нежели при НДР. При анализе показателей гуморального иммунитета (системный уровень С3 компонента комплемента), не отличаясь от контроля при НДР и ППДР, при ПДР достоверно повышен как относительно контроля, так и относительно уровня его экспрессии при НДР (р<0,05). Остальные показатели гуморального иммунитета не отличались от контроля ни в одной из исследуемых групп. Но у пациентов с ПДР отмечается достоверное уменьшение (р<0,05) системного уровня всех классов иммуноглобулинов относительно соответствующих показателей у пациентов с НДР.
По результатам корреляционного анализа были выявлены достоверная выраженная отрицательная корреляционная связь (r= -0,43, р<0,001) между уровнем системной экспрессии ЭПО и исходной МКОЗ, достоверная умеренная положительная корреляционная связь (r=0,62, р<0,01) между уровнем ЭПО и ТМО, достоверная умеренная отрицательная корреляционная связь (r= -0,47, р<0,01) между уровнем системной экспрессии С3 компонента и исходной МКОЗ, достоверная слабая положительная корреляционная связь (r=0,49, р<0,05) между уровнем С3 и ТМО.
При проведении регрессионного анализа между уровнем ЭПО, С3 и наличием геморрагий, микроаневризм (по данным ФАГ) было выявлено, что коэффициент регрессии (КР) положительный в обоих случаях, т.е. у пациентов с ДМО и наличием геморрагий и микроаневризм более высокий уровень ЕРО и С3 в сравнении с пациентами без геморрагий и микроаневризм. Связь между уровнем ЭПО и наличием геморрагий и микроаневризм достоверна (р составил 0,043 и 0,032 соответственно), в то время как не выявлено достоверной связи между показателями ФАГ и уровнем С3, выявлена лишь тенденция – р составил 0,054 и 0,056 соответственно.
Таким образом, у всех пациентов с СД и наличием ДР с ДМО, независимо от её стадии, уровень системной ЭПО отмечался повышенным. С увеличением ТМО, понижением МКОЗ, развитием пролиферативных осложнений, появлением геморрагий и микроаневризм уровень ЭПО повышается. Системное повышение при ПДР уровня С3 – ключевого компонента комплемента, участвующего как в классическом, так и в альтернативном пути активации системы комплемента – скорее обусловлено влиянием общего соматического состояния при данной стадии ретинопатии. Системное уменьшение наряду с этим иммуноглобулинов всех классов относительно пациентов с НДР указывает на важную роль относительной супрессии этих факторов гуморального иммунитета при развитии пролиферативных осложнений с возможным их участием в активации С3 компонента комплемента.
Заключение
Полученные результаты свидетельствуют о важной проангиогенной роли системного повышения ЭПО наряду с дисбалансом показателей гуморального иммунитета в развитии ретинальной патологии и прогрессировании пролиферативных осложнений у пациентов с СД. Поиски путей адекватно подобранной системной медикаментозной коррекции выявленных отклонений продукции ЭПО и иммунологических нарушений при различных стадиях ДР могли бы целесообразно дополнить комплекс консервативных и хирургических мер проводимого местного лечения.
