Характеристика эндотелиоцитов роговицы при введении вискоэластика «Нeala flow» и экспериментального вискоэластика в субтеноновое пространство

     По данным ВОЗ на 2004 год, более 800 млн. человек в мире страдают высокой степенью близорукости, из них 15 млн. - россияне. Занимая одно из ведущих мест в общей структуре глазных заболеваний, прогрессирующая близорукость является частой причиной инвалидности. Одним из основных способов лечения прогрессирующей миопии до сих пор является склероукрепляющая операция. Эффективность данных операций колеблется от 33% до 100% и зависит от характера хирургического воздействия, особенностей миопического процесса, исходного состояния склеры пациента, а также от свойств и вида имплантируемого материала [5]. При этом, несмотря на широкий выбор материалов, в раннем послеоперационном периоде часто возникают такие осложнения, как тенонит, хемоз, иридоциклит, экзофтальм. Нередко это связано с травматичностью введения имплантата. Одним из путей решения данной проблемы является использование вискоэластиков при введении имплантата при склероукрепляющих операциях. Поэтому выбор вискоэластичного препарата представляет собой одну из ключевых задач, которую решает хирург перед началом хирургического вмешательства, так как от этого зависит не только техника самой операции и быстрота её проведения, но и вероятность развития осложнений в послеоперационном периоде.

    Цель – оценить цитотоксическое влияние дренажных имплантатов на эндотелиоциты роговицы при введении их в субтеноновое пространство.

    Материал и методы. В эксперименте участвовали 9 кроликов (18 глаз), которые были разделены на опытную, экспериментальную, контрольную группы по 3 кролика в каждой. С использованием операционного офтальмологического микроскопа в субтеноновое пространство в объёме по 0,5 мл вводили опытной группе вискоэластик «Нeala flow», контрольной – физиологический раствор, а в экспериментальной – экспериментальный вискоэластик. Оперативное вмешательство проводилось под местной анестезией оксибупрокаином 0,4% и премедикацией хлорпромазина 2,5% с димедролом 1,0%. Все исследования проведены в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Пр. МЗ ССР от 12.08.1977 г. № 755) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных» от 18.03.1986.

    В исследовании был использован медленно рассасывающий дренажный имплантат – «Нeala flow», который представляет собой изотонический гель – стерильный, апирогенный, вязкоупругий, чистый, бесцветный и прозрачный. «Нeala flow» состоит из ретикулярного гиалуроната натрия 22,5 мг/мл неживотного происхождения и представляет собой фосфатный буферный раствор рh=7. В качестве экспериментального вискоэластика использовался препарат, который создан на основе гиалуроновой кислоты неживотного происхождения, полученной биосинтетическим путём из бактерий и не содержащий посторонних белковых соединений. Величина частиц геля гиалуроновой кислоты в препарате составляла 30-100 мкм для исключения возможности формирования комочков в тканях. В целях снижения степени ферментативного влияния на гиалуроновую кислоту после введения в ткани, замедления её деградации и увеличения срока эффекта, филлер препарата подвергался перекрёстной прошивкой цепей кислоты в единую полимерную (трёхмерную) структуру. Благодаря молекулам-сшивкам (кросслинкеры) раствор гиалуроновой кислоты с высокой вязкостью превращается в гель. Он представляет собой единую пространственную структуру, которая становится барьером для ферментативного расщепления и разрушения свободными радикалами. В качестве материала для химической перекрёстной «сшивки» отдельных цепей гиалуроновой кислоты в производстве препарата использовался 1,4-бутандиол-диглицидиловый эфир (BDDE).

    Для исследования количества эндотелиальных клеток, их плотности и размеров, толщины роговицы использовался метод зеркальной микроскопии с помощью эндотелиального микроскопа EM-3000 (Япония), который позволяет проводить прижизненное исследование эндотелия роговицы. При этом определяли форму и расположение эпителиальных клеток. Количественный метод позволяет установить число клеток на единицу площади. При этом проводилась термометрия глазного яблока в области проекции цилиарного тела и измерение внутриглазного давления тонометром Маклакова весом 5,0 гр.

    Полученные данные обрабатывали на ПЭВМ IBM/РС при помощи стандартных статистических пакетов «SPSS 11,5 for Windows».

    Результаты. Установлено (см. рис.), что при введении вискоэластика «Нeala flow» явно повышается ВГД на 4 день (p<0,001). При этом увеличение (p<0,001) температуры глазного яблока в области проекции цилиарного тела очевидно свидетельствует о наличии воспалительной реакции на введённый дренажный имплантат.

    При анализе полученных результатов исследования эндотелиоцитов методом зеркальной микроскопии было обнаружено, что при введении физиологического раствора и экспериментального вискоэластика в субтеноновое пространство (см. табл.) достоверных изменений в характеристиках эндотелиоцитов роговицы обнаружено не было.

    В то же время, после введения «Нeala flow», на 7 день наблюдается значительное снижение плотности клеток в мм2 (p<0,001), а также значимое увеличение стандартного отклонения в размерах проанализированных клеток эндотелия (p<0,05) за счёт увеличения в 2,17 раз крупных эндотолиоцитов и в 1,69 раз - мелких.

    Выводы. Изученный нами экспериментальный вискоэластик является наиболее оптимальным во всех отношениях. Этот дренажный имплантат обладает способностью формировать и поддерживать пространство, тем самым обеспечивает наилучшие условия для проведения оперативного вмешательства при склероукрепляющих операциях. При этом он не обладает цитотоксичностью на клетки эндотелия роговицы и не вызывает воспалительную реакцию, а также не провоцирует заметного подъёма ВГД в послеоперационном периоде.