Корреляция биохимических показателей слёзной жидкости и стадий диабетической ретинопатии

     На сегодняшний день широкое применение находят исследования биохимических показателей слёзной жидкости (СЖ) для диагностики и прогнозирования течения различных заболеваний органа зрения, а также для оценки эффективности лечения. Неинвазивный характер, доступность и информативность анализа СЖ являются весьма привлекательными для исследователей и клиницистов, так как они во многом отражают состояние обменных процессов в глазу [5, 6, 7].

    Диабетическая ретинопатия (ДР) является самым грозным осложнением СД и самой частой причиной слепоты среди населения развитых стран. Слепота у больных СД наступает в 25 раз чаще, чем в общей популяции [1, 2, 3]. Патогенетические механизмы ДР многообразны и изучены далеко не полностью. Согласно данным литературы, в патогенезе ДР важную роль играет оксид азота (NO), регулирующий тонус сосудов, пролиферацию гладкомышечных клеток, нейротрансмиссию, эффекты иммунного ответа и т.д. [1, 5, 9, 10]. По мнению ряда авторов, NO играет важную роль в развитии ишемии сетчатки, обуславливая неоваскуляризацию и пролиферацию [3, 5], переход препролиферативной стадии заболевания в пролиферативную.

    Цель изучить взаимосвязь показателей оксида азота и окислительного стресса СЖ со степенью тяжести непролиферативной ДР.

    Материал и методы. Проведено лечение 36 пациентов (69 глаз) с диагнозом: непролиферативная диабетическая ретинопатия (НДР). Средний возраст пациентов 62,1±1,9 лет. Женщин – 29, мужчин – 7. Пациенты были разделены на 2 группы.

    Стадии заболевания определяли по широко применяемой в научных исследованиях в настоящее время классификации ETDRS, основанной на модифицированной схеме AirlieHouse [4]. Контрольную группу составили 10 практически здоровых лиц того же возраста.

    Пациентам был назначен танакан внутрь в дозе 120 мг в сутки с эндоназальным электрофорезом в течение 10 дней на фоне стандартной терапии НДР.

    До лечения и после курса терапии больным проводили общее офтальмологическое обследование и биохимическое исследование СЖ. Слёзная жидкость собиралась методом адсорбции на фильтровальную бумагу. Содержание NO2(NO3) в СЖ определяли с использованием реактива Грисса (раствор сульфаниламида и N-(1-нафтил)-этилендиамин в 2,5%-й ортофосфорной кислоте), который даёт окрашенный диазопродукт с максимумом поглощения при 546 нм [8]. Наряду с этим определяли содержание ТБК-активных продуктов, активность каталазы и супероксиддисмутазы (СОД). Цифровой материал обработан методом вариационной статистики.

    Результаты. Проведённые исследования показали постепенное снижение уровня оксида азота по мере усугубления ДР (табл.). Так, если у больных с НДР 1-а стадии уровень оксида азота статистически значимо снизился на 22,3% (р<0,001), то при 1-с стадии это снижение составило 66,7% (р<0,001) относительно значений практически здоровых лиц и 57,1% (р<0,001) по сравнению с показателями больных НДР 1-а стадии. Детальный анализ уровня оксида азота в СЖ больных НДР 1-а стадии показал сохранение данного показателя в пределах нормативных значений у 6 пациентов и тенденцию к увеличению – у 8 больных. В то же время у всех пациентов 1-b и 1-с групп показатели оксида азота были ниже показателей практически здоровых лиц. По мнению М. Ю. Репкиной (2010), при СД отмечается высокий уровень NO в слёзной жидкости уже на ранней стадии ДР, что является компенсаторной сосудистой реакцией, поддерживающей метаболизм и обеспечивающей кровоснабжение, а NO играет важную патогенетическую роль в механизме формирования диабетических осложнений [10].

    В то же время, в более поздние сроки ДР, по мнению Н.А. Гавриловой (2004), снижение уровня оксида азота у больных НДР может быть обусловлено истощением субстрата L-аргинина для его синтеза в результате усиленного потребления в ранние сроки развития ДР, активизацией механизмов тиолового шунта, ингибирующих эндотелиальную NO-синтазу, необходимую для его синтеза, усиленного его деградацией, а также изменением цитоархитектоники сосудов [3]. С другой стороны, согласно данным литературы [5], NО конкурирует с СОД за активную форму кислорода. При низкой активности СОД оксид азота взаимодействует с активными радикалами кислорода с образованием высокотоксичного его метаболита – пероксинитрита, обладающего выраженным цитотоксическим действием. Этот процесс играет важную роль в развитии воспалительного процесса. Вместе с тем, в патогенезе ДР важная роль принадлежит дисбалансу в системе «перекисное окисление липидов (ПОЛ) – антиоксидантная защита (АОС)» [6, 7, 11].

    Из всех образующихся в реакциях липопероксидации веществ самым токсичным, оказывающим повреждающее действие на клеточные структуры, является промежуточный продукт процесса малоновый диальдегид (МДА), относящийся к «ТБК-активным продуктам». Избыточному усилению интенсивности процессов липопероксидации противостоит многокомпонентная антиоксидантная система (АОС), которая обеспечивает связывание и модификацию радикалов, предупреждает образование перекисей и разрушает их [6]. Результаты исследований показали, что в слёзной жидкости у больных ДР уровень МДА статистически значимо возрастает в 2,6; 2,8 и 2,9 раза, соответственно стадиям 1-а, 1-b и 1-с НДР относительно значений практически здоровых лиц. Активность СОД и каталазы прогрессивно снижается по мере усугубления патологического процесса, что свидетельствует о дальнейшем развитии дисбаланса в системе «ПОЛ-АОС» у больных ДР и об ослаблении естественного уровня защиты тканей и сред глаза от повреждающего действия гидроперекисей.

    Для выяснения взаимосвязей между содержанием оксида азота и показателями ПОЛ-АОС нами был вычислен коэффициент корреляции. У практически здоровых лиц выявлено наличие положительной умеренной корреляции между уровнем оксида азота и МДА (r=0,58) и отрицательной связи с активностью каталазы (r=0,63), а также положительные связи между активностью ферментов каталазы и СОД (r=0,55). У пациентов с 1-а стадией НДР выявленные положительные коррелятивные связи между уровнем оксида азота и МДА ослабевали и переходили в отрицательную (r=-0,32) и по мере усугубления патологического процесса исчезали. Можно предположить, что по мере уменьшения выработки оксида азота и снижения активности ферментов АОС отмечается интенсификация ПОЛ, усугубляя клинические проявления ДР. Прогрессирование гипоксии и состояние хронической ишемии при ДР приводят к истощению источника синтеза NO-L-аргинина и снижению уровня NO в тканях глаза, что имеет важное значение в патогенезе развития ДР.

    Выводы. Выявлена корреляционная связь между степенью тяжести непролиферативной диабетической ретинопатии и уровнем оксида азота в слёзной жидкости пациентов, который снижается по мере прогрессирования заболевания. Дисбаланс в системе «ПОЛ-АОС» носит стадийный характер и по мере прогрессирования ретинопатии проявляется преобладанием гиперлипопероксидации.