Рис. 1. Фрагмент поперечного среза глаза человека протяженностью 12 мм. На рисунке 1 стрелкой указана зубчатая линия. Пс – поверхность поперечного среза через склеру и сетчатку. Вп – поверхность, обращенная в сторону витреальной полости
Fig. 1. Fragment of the human eye cross-section 12 mm long. On fig. 1 arrow points to ora serrata. Пс – surface of the cross-section through the sclera and retina. Вп – surface faced to the vireous
Рис. 2. Схема исследуемых областей ВПМ на поперечном срезе: 1, 2, 3, 4, 5 – последовательно исследованные области от непосредственной близости к зубчатой линии (1) до экваториальной области (5)
Fig. 2. ILM areas under study on the cross-section: 1, 2, 3, 4, 5 – Consistently invistigated zone of ILM from the are next to Ora Serrata (1) to equatorial zone (5)
Рис. 3. Сканирующая электронная микроскопия сетчатки в непосредственной близости с зубчатой линией сетчатки, которая соответствует области, обозначенной на схеме глаза цифрой 1. Отсутствует очевидная граница между сетчаткой и ВПМ. Структура, соответствующая ВПМ, представляет собой параллельно расположенные, рыхло упакованные волокна. Толщина волокнистой структуры, соответствующей ВПМ, обозначена двойной стрелкой. Толщина – 4,5 мкм
Fig. 3. SEM of the retina in the ILM area SEM of the retina in the ILM area corresponds to the area 1 on the schematic eye. No evident boundary between the retina and ILM. Structure corresponding to the ILM consists of parallel sparsely packed fibers. Thickness of the fibrous structure corresponding to the ILM is shown with a double-arrow. The thickness is 4.5 µm
Рис. 4. Сканирующая электронная микроскопия области, обозначенной на схеме цифрой 2. Отсутствует очевидная граница между сетчаткой и СТ. На поверхности сетчатки располагается неплотно организованная волокнистая структура с параллельно ориентированными волокнами (двойная стрелка). Толщина измерения соответствует 4 мкм. К волокнистой структуре примыкает стекловидное тело – выше стрелки. Волокнистая структура СТ имеет гораздо менее плотную организацию и выраженную сетчатую структуру
Fig. 4. SEM of the area 2 from the scheme above. No evident boundary between the retina and the vitreous. On the retinal surface there is a sparce fibrous structure with parallel fibrils. Layer is shown with a double-arrow. Thickness is 4µm. Density of the fibers is somewhat higher than in the area 1. The densely organized fibrous structure is adjoined by the vitreous (above the arrow). Fibrous structure of the vitreous has less dense and prominent mesh-like structure
Цель
Уточнить микроанатомию ВПМ в ее центральных и периферических отделах с применением сканирующей электронной микроскопии. В частности, уточнение, каким образом изменяется толщина ВПМ в зависимости от ее анатомической локализации, и уточнение микроанатомической картины витреоретинальных взаимоотношений в различных областях сетчатки.
Материал и методы
Произведено исследование четырех донорских глаз от двух доноров, возраста 43 и 45 лет, предоставленных глазным банком Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» под руководством д-ра мед. наук профессора Борзенка С.А. Между забором глаза у донора и началом проведения подготовки препарата прошло в среднем 9 часов. Исследуемые глаза имели правильную сферическую форму, без внешних патологических признаков. Исследуемые глаза были расценены как эмметропические. Материал фиксировался в жидкости Сент-Джиордьи семь суток. Дофиксация производилась в смеси: 100 мл фиксатора и 50 мл ацетона – три дня. Дальше материал проводили через ацетон, 100% спирт, спирт-эфир, производилась последующая заливка в целлоидин. Фиксация материала и заливка в целлоидин произведена в лаборатории патологической анатомии и гистологии глаза «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» под руководством канд. мед. наук Шацких А.В. Дальнейшие исследования произведены одним из авторов. После фиксации в целлоидине производился непрерывный срез в сагиттальной плоскости от роговицы к макулярной области по центральной оси глаза. Изготавливались срезы толщиной около 3 мм. Произвести срез точно через центр макулярной области сетчатки оказалось невозможным. Для исследования ВПМ макулярной области сетчатки на препарате парного глаза производился непрерывный срез в трансверсальной плоскости (параллельно плоскости центральной сетчатки). Следующим этапом целлоидин вымывался из препаратов эфиром. После предварительной специальной сушки в «критической точке» срез препарата, произведенный в сагиттальной плоскости, размещался на специальном столике, и на его поверхность в вакуумной камере производилось напыление золота. Из среза препарата, произведенного в трасверсальной плоскости, изготавливался препарат для исследования макулярной области сетчатки, с последующей специальной сушкой в «критической точке», помещением препарата на предметный столик и напылением золота. Исследование производилось сканирующим электронным микроскопом Cam Scan S-2 (Cambridge Instruments, Великобритания). Исследования выполнены в Общефакультетской лаборатории электронной микроскопии МГУ (зав. лабораторией Давидович Г.Н.). Морфометрия выполнялась с использованием масштабного маркера, который изменяет свою длину в процессе компьютерного увеличения.
Результаты
Рис. 5. Сканирующая электронная микроскопия параэкваториальной области сетчатки, обозначенная на схеме цифрой 3. Толщина волокнистой структуры, обозначенной на фото двумя стрелками, соответствует 1,5 мкм
Fig. 5. SEM of the para-equatorial area of the retina (area 3 on the scheme). Thickness of the fibrous structure is denoted by two arrows is 1.5 µm
Рис. 6. Экваториальная область, обозначенная на схеме цифрой 4. Граница между сетчаткой и ВПМ стала более очевидной. ВПМ практически моноструктурна. Толщина обозначена двумя стрелками, соответствует 1,5 мкм
Fig. 6. Equatorial area (area 4 on the scheme). Boundary between the retina and ILM became more evident. ILM is almost monostructural. Thickness of the fibrous structure denoted by two arrows is 1.5 µm
Сканирующая электронная микроскопия среза области между зубчатой линией и сетчаткой представлена на рис. 3. Очевидная различимая граница между сетчаткой и ВПМ отсутствует. Структура, которая может соответствовать ВПМ, представляет собой параллельно располагающиеся, неплотно упакованные волокна. Толщина волокнистой структуры, соответствующей ВПМ, 4,5 мкм. Волокнистая структура не имеет четкой границы с основным СТ, волокна которого располагаются параллельно поверхности сетчатки. Кроме того, нет определяемой границы между самой сетчаткой и располагающейся на ее поверхности волокнистой структуры, соответствующей ВПМ.
Рис. 7. Экваториальная область сетчатки с несколько более центральным смещением, обозначенная на схеме цифрой 5. Отчетливо видна граница между сетчаткой и ВПМ. Толщина обозначена двумя стрелками, соответствует 1 мкм
Fig. 7. Equatorial area of the retina closer to the center (area 5 on the scheme). Boundary between the retina and ILM is clearly visible. Thickness is shown by two arrows and equal to 1 µm
Рис. 8. Фото сканирующей электронной микроскопии макулярной области сетчатки. На рисунке 8 представлены фото 1-4 области с последовательным пошаговым 10-кратным увеличением: 1 – общий вид макулярной области сетчатки. Отчетливо определяется фовеа; 2, 3 – очевидно существенное уменьшение толщины. ВПМ выглядит как тонкая моноструктурная мембрана. Обращает на себя внимание отсутствие каких бы то ни было пор на поверхности ВПМ; 4 – толщина ВПМ обозначена двумя стрелками. Соответствует 0,25 мкм
Fig. 8. SEM of the macular area. 4 photo of the same area with successive 10x magnifications. 1 – overall view of the macular area. Fovea is distinct. 2, 3 – Substantial thinning is evident. ILM looks like a thin monostructural membrane. Absence of any pores on the ILM surface is evident. 4 – ILM thickness is denoted by two arrows 0,25 µm (¼ µm)
Сканирующая электронная микроскопия параэкваториальной области сетчатки (на схеме указана стрелкой с цифрой 3) представлена на рис. 5. Толщина волокнистой структуры в параэкваториальной области соответствует 1,5 мкм.
Сканирующая электронная микроскопия экваториальной области сетчатки представлена на рис. 6 и 7 (на схеме обозначена цифрами 4 и 5). По мере приближения к экваториальной области волокнистые структуры на поверхности сетчатки уменьшаются по толщине, плотность их возрастает, ВПМ становится моноструктурной, граница между сетчаткой и ВПМ становится отчетливо определимой (рис. 6). Несколько центральнее экватора (на схеме зона исследования обозначена цифрой 5) ВПМ приобретает вид мембраны и имеет четко определяемую границу с сетчаткой (рис. 7), толщина ее соответствует 1 мкм.
Сканирующая электронная микроскопия макулярной области сетчатки представлена на рис. 8. ВПМ в макулярной области существенно тоньше по сравнению с экваториальной и параэкваториальной областями сетчатки, толщина ее соответствует 0,25 мкм, что соответствует 1/4 мкм. Таким образом, толщина ВПМ в макулярной области наиболее тонкая, в частности в 4 раза тоньше ВПМ экваториальной области.
Обсуждение
По результатам проведенных исследований толщина структуры, которая может соответствовать ВПМ на периферии сетчатки, соседствующей с зубчатой линией, составляет 4-5 мкм, имеет рыхлую волокнистую структуру, образуемую неплотно упакованными параллельно расположенными волокнами, и не имеет четко определяемой границы с сетчаткой и СТ. Волокна стекловидного тела на периферии сетчатки вплетаются в нее параллельно, а не перпендикулярно. По мере приближения к центру, в параперифирии волокнистые структуры на поверхности сетчатки становятся более конденсированными и уменьшаются по толщине. Ближе к экватору на поверхности сетчатки определяется ВПМ, структурированная в виде мембраны, толщина ее соответствует 1 мкм. По направлению от экваториальной области к центру ВПМ имеет отчетливую мембранную структуру. В макулярной области ВПМ самая тонкая, толщиной 0,25 мкм. В макулярной области ВПМ моноструктурна, без признаков каких бы то ни было пор или подобных тому образований. Своего рода находкой стала микроанатомическая картина соединения сетчатки и СТ на периферии. В отличие от общепринятого мнения оказалось, что волокна сетчатки на ее периферии вплетаются в нее параллельно, а не перпендикулярно, более того, отсутствует определяемая граница между сетчаткой и ВПМ. Структура, соответствующая ВПМ, представляет собой рыхло упакованные параллельно расположенные волокна. Уточненные данные объективно подтверждают уменьшение толщины ВПМ от периферии к центру. Наименьшая толщина ВПМ регистрируется в макуле.
Выводы
Результаты исследований микроанатомии ВМП показывают уменьшение толщины ВПМ от периферии к центру. В отличие от общепринятого мнения на периферии сетчатки волокна СТ вплетаются в нее параллельно, а не перпендикулярно.
