Определение антибиотиков фторхинолонового ряда в содержимом передней камеры глаза методом «вэжх-мс»

    Одной из основных задач, стоящих перед клинической фармакологией, является поддержание оптимальной концентрации лекарственного средства в месте воздействия - оптимизация фармакотерапии. Основой для получения фармакокинетических данных является определение концентраций лекарственного вещества в различных биологических жидкостях, в том числе во влаге передней камеры глаза (ВПКГ).

    Антибактериальные препараты (АБП) из группы фторхинолонов занимают одно из ведущих мест в лечении различных бактериальных инфекций, а также широко используются в офтальмохирургии для профилактики послеоперационных осложнений.

     Наиболее часто при определении АБП в биожидкостях применяются методы высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) в сочетании с масс-спектрометрическим детектированием (МС).

    Особенностью анализа проб ВПКГ, является необходимость достижения низких пределов обнаружения целевых веществ. При традиционных подходах этот анализ затруднителен, ввиду малого количества анализируемого образца и вследствие этого невозможности проведения процедур концентрирования. Разработка максимально простой и эффективной методики количественного анализа, позволяющей работать с малым объемом биоматериала, является чрезвычайно актуальной задачей.

    Сравнение концентраций трех препаратов (эталонного и дженерического с действующим веществом – левофлоксацин, и эталонного с действующим веществом – моксифлоксацин) во ВПКГ пациентов с катарактой показало, что при использовании дженерика достигается более высокая средняя концентрация левофлоксацина – 1,5 мкг/мл, при этом содержание активно действующего вещества (левофлоксацин) было одинаковым, как в эталонном, так и дженерическом препаратах (Рис.1). По-видимому, это связано с наличием в составе дженерической формы левофлоксацина - гипромеллозы, которая обладает высокой вязкостью, что увеличивает продолжительность контакта АБП с поверхностью конъюнктивы и роговицы. Присутствие бензалкония хлорида в дженерической форме левофлоксацина в концентрации, превышающей в два раза концентрацию консерванта оригинального препарата, может свидетельствовать о его воздействии на эпителиальный слой роговицы, что, способствует проникновению АБП в содержимое ВПКГ. ( Рис.2).

     Биодоступность исследуемых АБП оценивали на основании сравнения концентраций, определяемых во ВПКГ в зависимости от величины ВГД, плотности эндотелиальных клеток, объема и глубины передней камеры глаза, толщины роговицы и времени закапывания препарата до проведения ФЭК. Установлено, что только время закапывания, влияло на концентрацию АБП, так максимальная концентрация АБП во ВПКГ составляла 1,55±0,86 мкг/мл через 30-60 мин. и 1,29±1,08 мкг/мл через 60-120 мин. после закапывания антибактериальных капель.

    Таким образом, удалось установить, что средняя максимальная концентрация левофлоксацина (глазные капли «Сигницеф») во ВПКГ составили 1,5 мкг/мл. Оптимальное время необходимое для создания терапевтической концентрации АБП во ВПКГ следует считать 30-120 минут до начала проведения ФЭК.

    Внедрение разработанной методики по определению АБП в содержимом влаги передней камеры глаза с помощью метода ВЭЖХ - МС, позволит повысить эффективность и безопасность при назначении рядом АБП фторхинолонового ряда.