Репозиторий OAI—PMH
Репозиторий Российская Офтальмология Онлайн по протоколу OAI-PMH
Конференции
Офтальмологические конференции и симпозиумы
Видео
Видео докладов
Реферат RUS | Реферат ENG | Литература | Полный текст |
УДК: | 617.723-002:616-006.6 |
Панова И.Е., Пилат А.В., Жидкова А.С., Гюнтнер Е.И.
Плоидометрические характеристики меланомы хориоидеи
Южно-Уральский государственный медицинский университет Министерства здравоохранения Российской Федерации
Челябинский областной клинический онкологический диспансер
На современном этапе развития онкофтальмологии существуют различные методы изучения структуры опухолей: цитологический, гистологический, иммуногистохимический, ультраструктурный, а также диагностическая медицинская плоидометрия — способ сравнительного микроспектрометрического анализа плоидности клеток опухоли с компьютерной обработкой [1-3]. Плоидометрическая диагностика была внедрена после открытия закономерности накопления генетического материала в ядрах клеток в процессе озлокачествления [4-7].
В настоящее время имеется большое число работ, посвященных изучению взаимосвязи биологического поведения опухоли и ее плоидного состава [3, 8, 9]. Плоидность клетки объективно отражает количественное содержание ядерной ДНК [1, 3]. В отдельных публикациях представлены результаты по плоидометрии меланомы хориоидеи (МХ), отсутствуют данные плоидного статуса клеток опухоли после лучевого воздействия (брахитерапии, транспупиллярной термотерапии), которое является приоритетным в органосохраняющем направлении противоопухолевого лечения [13, 14].
Цель исследования — изучение особенностей плоидного профиля меланомы хориоидеи у пациентов с продолженным ростом опухоли после лучевого воздействия.
Материал и методы
В соответствии с целью исследования нами изучен плоидный профиль в двух группах: ИГ (исследуемая группа) — пациенты, которым ранее выполнялись лучевые методы воздействия (n=18; 16 — брахитерапия офтальмоаппликаторами «RuRh-106», 2 — транспупиллярная термотерапия) в сравнении с группой контроля (КГ), представленной больными с МХ после первичной энуклеации (n=31) в связи со значительными размерами образования.
Плоидометрическое исследование препаратов МХ проведено на базе патологоанатомического отделения ФГУЗ ЦМСЧ № 15 г. Снежинска ФМБА России по методу Автандилова Г.Г. (2006) с использованием компьютерного микроскопа «Nikon Eclipse E400» (с объективом х40, разрешением 200 нм).
Количество ДНК в препаратах МХ вычисляли денситометрически по интегральной яркости и оптической плотности ядер с построением гистограмм в относительных единицах и пикселях не менее чем по 25 ядрам в каждом препарате. Для оценки плоидного профиля применялась стандартная компьютерная программа Adobe PhotoShop 6.0 с переводом изображения в черно-белый вариант, с последующим инвертированием, негатив изображения ядра использовался для определения плоидности по его интегральной яркости (рис. 1).
Далее выделялось ядро клетки опухоли, изображение просматривалось в опции Histogram раздела Image. В качестве тканевого стандарта использовалась средняя интегральная яркость (оптическую плотность) ядер малых лимфоцитов в изучаемых срезах. Половина указанных стандартов являлась единицей плоидности — 1 с, в соответствии с чем проводился подсчет индекса накопления ДНК (ИНДНК) опухоли [4]. Среднее значение интегральной яркости малых лимфоцитов в срезе — 183,03±22,73 пикселя, единица плоидности (1 с) — 91,52 пикселя.
Статистическая обработка результатов исследования проводилась методами вариационной статистики с помощью программы Stаtistica 6.0.
Результаты
Исследование основных плоидометрических характеристик показало, что средняя интегральная яркость ядер клеток МХ у больных с меланомой хориоидеи составила 155,10±3,06 — 168,10±1,25 пикселей, ИНДНК — 1,69±0,2 — 1,84±0,14 с (КГ-ИГ соответственно, достоверных отличий в группах не выявлено).
Учитывая тесную взаимосвязь средней интегральной яркости ядер клеток МХ и индекса накопления ДНК, мы сочли возможным проводить анализ одного параметра (ИНДНК).
В соответствии с задачами исследования нами изучен плоидный профиль (ИНДНК в процентном соотношении) в двух группах, данные представлены на рис. 2.
Согласно данным, представленным на рис. 4, у больных с МХ, которым выполнена первичная энуклеация без предшествующего лучевого лечения, показатель плоидности при узловой форме роста достоверно отличается от аналогичного при диффузной форме (1,68 и 1,87 с соответственно), а в ИГ ИНДНК при узловой форме приближается к показателю при диффузной, для которой характерно наиболее неблагоприятное течение опухолевого процесса и, соответственно, прогноз эффективности лучевого лечения.
Метастазы по органам и системам были обнаружены у 3 пациентов ИГ (16,66%), у 13 пациентов КГ (31,70%), при этом ИНДНК у больных с клинико-инструментальными признаками отдаленного метастазирования составил 1,8±0,02 с и 1,69±0,09 с соответственно.
Таким образом, нами установлено, что несмотря на характерный для для МХ низкий ИНДНК (1,69 с), у пациентов после лучевого воздействия имеют место достоверно более высокие его показатели (1,9 с), независящие от гистологического типа, локализации, характера пигментации, размеров первичного очага. Диффузная форма роста, характеризующаяся достоверно более высокими значениями ИНДНК в ядрах клеток МХ, обуславливает необходимость тщательного клинико-ультразвукового мониторинга в процессе лучевого воздействия и, при необходимости, своевременного выполнения энуклеации.
В настоящее время имеется большое число работ, посвященных изучению взаимосвязи биологического поведения опухоли и ее плоидного состава [3, 8, 9]. Плоидность клетки объективно отражает количественное содержание ядерной ДНК [1, 3]. В отдельных публикациях представлены результаты по плоидометрии меланомы хориоидеи (МХ), отсутствуют данные плоидного статуса клеток опухоли после лучевого воздействия (брахитерапии, транспупиллярной термотерапии), которое является приоритетным в органосохраняющем направлении противоопухолевого лечения [13, 14].
Цель исследования — изучение особенностей плоидного профиля меланомы хориоидеи у пациентов с продолженным ростом опухоли после лучевого воздействия.
Материал и методы
В соответствии с целью исследования нами изучен плоидный профиль в двух группах: ИГ (исследуемая группа) — пациенты, которым ранее выполнялись лучевые методы воздействия (n=18; 16 — брахитерапия офтальмоаппликаторами «RuRh-106», 2 — транспупиллярная термотерапия) в сравнении с группой контроля (КГ), представленной больными с МХ после первичной энуклеации (n=31) в связи со значительными размерами образования.
Плоидометрическое исследование препаратов МХ проведено на базе патологоанатомического отделения ФГУЗ ЦМСЧ № 15 г. Снежинска ФМБА России по методу Автандилова Г.Г. (2006) с использованием компьютерного микроскопа «Nikon Eclipse E400» (с объективом х40, разрешением 200 нм).
Количество ДНК в препаратах МХ вычисляли денситометрически по интегральной яркости и оптической плотности ядер с построением гистограмм в относительных единицах и пикселях не менее чем по 25 ядрам в каждом препарате. Для оценки плоидного профиля применялась стандартная компьютерная программа Adobe PhotoShop 6.0 с переводом изображения в черно-белый вариант, с последующим инвертированием, негатив изображения ядра использовался для определения плоидности по его интегральной яркости (рис. 1).
Далее выделялось ядро клетки опухоли, изображение просматривалось в опции Histogram раздела Image. В качестве тканевого стандарта использовалась средняя интегральная яркость (оптическую плотность) ядер малых лимфоцитов в изучаемых срезах. Половина указанных стандартов являлась единицей плоидности — 1 с, в соответствии с чем проводился подсчет индекса накопления ДНК (ИНДНК) опухоли [4]. Среднее значение интегральной яркости малых лимфоцитов в срезе — 183,03±22,73 пикселя, единица плоидности (1 с) — 91,52 пикселя.
Статистическая обработка результатов исследования проводилась методами вариационной статистики с помощью программы Stаtistica 6.0.
Результаты
Исследование основных плоидометрических характеристик показало, что средняя интегральная яркость ядер клеток МХ у больных с меланомой хориоидеи составила 155,10±3,06 — 168,10±1,25 пикселей, ИНДНК — 1,69±0,2 — 1,84±0,14 с (КГ-ИГ соответственно, достоверных отличий в группах не выявлено).
Учитывая тесную взаимосвязь средней интегральной яркости ядер клеток МХ и индекса накопления ДНК, мы сочли возможным проводить анализ одного параметра (ИНДНК).
В соответствии с задачами исследования нами изучен плоидный профиль (ИНДНК в процентном соотношении) в двух группах, данные представлены на рис. 2.
Согласно данным, представленным на рис. 4, у больных с МХ, которым выполнена первичная энуклеация без предшествующего лучевого лечения, показатель плоидности при узловой форме роста достоверно отличается от аналогичного при диффузной форме (1,68 и 1,87 с соответственно), а в ИГ ИНДНК при узловой форме приближается к показателю при диффузной, для которой характерно наиболее неблагоприятное течение опухолевого процесса и, соответственно, прогноз эффективности лучевого лечения.
Метастазы по органам и системам были обнаружены у 3 пациентов ИГ (16,66%), у 13 пациентов КГ (31,70%), при этом ИНДНК у больных с клинико-инструментальными признаками отдаленного метастазирования составил 1,8±0,02 с и 1,69±0,09 с соответственно.
Таким образом, нами установлено, что несмотря на характерный для для МХ низкий ИНДНК (1,69 с), у пациентов после лучевого воздействия имеют место достоверно более высокие его показатели (1,9 с), независящие от гистологического типа, локализации, характера пигментации, размеров первичного очага. Диффузная форма роста, характеризующаяся достоверно более высокими значениями ИНДНК в ядрах клеток МХ, обуславливает необходимость тщательного клинико-ультразвукового мониторинга в процессе лучевого воздействия и, при необходимости, своевременного выполнения энуклеации.
OAI-PMH ID: oai:eyepress.ru:article8324
Просмотров: 10756
Каталог
Продукции
Организации
Офтальмологические клиники, производители и поставщики оборудования
Издания
Периодические издания
Партнеры
Проекта Российская Офтальмология Онлайн