Прогнозирование послеоперационной воспалительной реакции у детей с врожденными катарактами на основе выявления митохондриальной дисфункции

     Раннее хирургическое лечение врожденной катаракты у детей является необходимым условием профилактики обскурационной амблиопии. Несмотря на современный уровень микрохирургической техники в офтальмологии, частота воспалительных реакций у детей после аспирации врожденной катаракты с имплантацией ИОЛ по данным разных авторов варьирует от 5,5 до 48,1% случаев [4, 9, 17]. По данным статистических исследований инвалидность вследствие врожденных катаракт в России составляет 17,0% [6].

    Известно, чем младше ребенок, тем чаще происходит развитие послеоперационной воспалительной реакции, и тем сильнее выражены возникающие впоследствии пролиферативные процессы [4]. Возможно, частота развития воспалительных осложнений в раннем послеоперационном периоде обусловлена низкой фибринолитической активностью и незрелостью гемато – офтальмического барьера [11]. Кроме того, факторами риска развития послеоперационной воспалительной реакции могут быть особенности течения операции, а также исходное состояние организма ребенка.

    Проведенные ранее исследования у детей с врожденными катарактами свидетельствуют о важной роли нарушений иммунитета в развитии послеоперационных осложнений воспалительного характера [1, 3, 5].

    В последние годы все большее значение приобретает изучение метаболизма митохондрий лимфоцитов [16]. Исследование энергетических процессов в митохондриях лимфоцитов позволяет выявить начальные изменения организма на клеточном уровне [10]. Наиболее информативным ферментом, характеризующим функциональную активность митохондрий лимфоцитов, является сукцинатдегидрогеназа (СДГ) [8]. Вследствие митохондриальной дисфункции происходит накопление активных форм кислорода, которые оказывают повреждающее действие на клетку [12, 15]. В настоящее время изучается роль вторичной митохондриальной дисфункции и в офтальмопатологии [2, 7, 13, 14].

    Исследование энергетического статуса лимфоцитов у детей позволит проводить более детальное изучение патогенетических механизмов развития послеоперационной воспалительной реакции в хирургии врожденных катаракт.

    Цель

    Оценить показатели митохондриальной дисфункции в прогнозе воспалительных реакций в раннем послеоперационном периоде у детей с врожденными катарактами.

    Материал и методы

    Обследовано 106 детей (114 глаз) с диагнозом «врожденная катаракта», из них 60 мальчиков (67 глаз) и 46 девочек (47 глаз). Возраст пациентов – 6,31±2,82 лет (от 2 до 14 лет). Всем детям была выполнена аспирация врожденной катаракты на приборе Millenium «Bausch&Lomb» (США) с имплантацией ИОЛ (Acrysof SA60AT, Alcon). Воспалительная реакция оценивалась биомикроскопически в первые 5 – 7 дней послеоперационного периода и через 1 мес. после операции по классификации Н.М. Сергиенко, З.Ф. Веселовской (1985) с дополнениями Р.А. Азнабаева с соавт. (2009). В соответствии с данной классификацией определялась послеоперационная реакция конъюнктивы, роговицы, влаги передней камеры, радужки, цилиарного тела.

    Пациенты были разделены на две группы: 1 группа (отсутствие послеоперационной воспалительной реакции – ареактивное течение) – дети с неосложненным послеоперационным периодом, 2 группа (дети с 1 степенью послеоперационной воспалительной реакции).

    Всем пациентам были проведены стандартное клинико – офтальмологическое обследование и исследование образцов венозной крови, взятой до операции. Используя моноклональные антитела, методом проточной цитофлуориметрии определяли активность СДГ с целью изучения функциональной активности различных популяций лимфоцитов. Были изучены основные (Т – лимфоциты (CD3+CD45+), Т – хелперы (CD3+CD4+CD45+), Т – цитотоксические клетки (CD3+CD8+CD45+), В – лимфоциты (CD3 – CD19+CD45+), NK – клетки (CD3CD16+/CD56+), активированные Т – лимфоциты (CD3+HLA – DR+)) и малые (В1 – лимфоциты (CD3CD19+CD5+), В2 – лимфоциты (CD3+CD19+CD5 – ), NKT – лимфоциты (CD3+CD16+/CD56+), Т – регуляторные клетки (CD4+CD25+CD127low), активированные Т – лимфоциты (CD4+CD25+ CD127high), Th17 – лимфоциты (CD3+CD4+CD161+)) популяции лимфоцитов. Исследование проводили на проточном цитофлуориметре Beckman Coulter FC 500 (США).

    Статистический анализ полученных результатов выполняли с использованием программы Statistica 6.0. Различия между группами оценивали непараметрическим критерием Манна – Уитни.

    Результаты

    В ходе выполнения аспирации катаракты с имплантацией ИОЛ интраоперационных осложнений у всех пациентов зарегистрировано не было.

    Учитывая наличие возрастных особенностей иммунного статуса у детей, с целью объективной оценки полученных результатов, группы исследований были разделены на 2 подгруппы: дети 2 – 5 лет и дети 6 – 14 лет. Результаты полученных данных приведены в табл. 1 и 2.

    Сравнительная оценка активности СДГ у детей 2 – 5 лет выявила достоверное снижение активности исследуемого фермента в популяциях Т – лимфоцитов (CD3+CD45+), Т – хелперов (CD3+CD4+CD45+), активированных Т – лимфоцитов (CD3+HLA – DR) и NK – клеток (CD3 – CD16+CD56+) у детей 2 группы. Таким образом, сравнительная оценка активности СДГ у детей 6 – 14 лет выявила достоверное снижение активности исследуемого фермента в популяциях Т – лимфоцитов (CD3+CD45+), Т – хелперов (CD3+CD4+CD45+), Т – цитотоксических лимфоцитов (CD3+CD8+CD45+), активированных Т – лимфоцитов (CD3+HLA – DR), NK – клеток (CD3 – CD16+CD56+), NKTлимфоцитов (CD3+CD16+CD56+), Th17 – лимфоцитов (CD3+CD4+CD161+), Т – регуляторных лимфоцитов (CD4+CD25+CD127low), активированных Т – хелперов (CD4+CD25+CD127high) у детей 2 группы.

    Анализ полученных данных характеризует значимость изменений активности СДГ в выявлении субклинических изменений иммунной системы у детей с врожденными катарактами и может служить прогностическим критерием развития послеоперационной воспалительной реакции. Своевременная диагностика митохондриальной дисфункции у детей с врожденными катарактами позволит выявить иммунокомпрометированных детей и провести им необходимую предоперационную подготовку.

    Выводы

    1. Исследование активности СДГ в периферической крови у детей с врожденными катарактами позволяет определить группу риска по развитию послеоперационной воспалительной реакции.

    2. Дооперационная коррекция метаболической дисфункции у детей из группы риска будет способствовать снижению частоты развития послеоперационной воспалительной реакции у детей с врожденными катарактами.

    

    Сведения об авторах

    Борзенок Сергей Анатольевич – заведующий центром фундаментальных и прикладных медико – биологических проблем ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России, доктор мед. наук, академик РАЕН

    Петричук Светлана Валентиновна – доктор биол. наук, профессор, заведующая лабораторией цитохимии ФГБУ «Научного центра здоровья детей» РАМН Минздрава России.

    Качегура Лариса Викторовна – аспирант ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России

    Комах Юрий Алексеевич – кандидат мед. наук, заведующий лабораторией трансплантологии и клеточной биологии центра фундаментальных и медико – биологических проблем ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России.

    Самохина Ирина Валериевна – кандидат мед. наук, научный сотрудник лаборатории цитохимии ФГБУ «Научного центра здоровья детей» РАМН.

    Володин Павел Львович – доктор мед. наук, заведующий отделом микрохирургии и функциональной реабилитации глаза у детей ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России

    Павленко Валерий Валерьевич – кандидат мед. наук, заведующий детским офтальмологическим отделением

    Полянская Елена Георгиевна – кандидат мед. наук, врач – офтальмолог детского офтальмологического отделения ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова» Минздрава России.