Вирусная деконтаминация трупных донорских роговиц в глазном тканевом банке

    Актуальность. На сегодняшний день вирусы группы герпеса остаются ведущим фактором инфекционной природы, поражающим роговицу человека. Так, по оценкам отечественных ученых, герпетические кератиты являются ведущей причиной роговичной слепоты среди населения России: более 66 % всей роговичной патологии связаны с контаминацией роговичной ткани вирусами группы герпеса. Вирус простого герпеса способен передаваться через донорский трансплантат, в связи с чем предложена технология вирусной деконтаминации трансплантата роговицы на этапе консервации.

    Цель. Изучение влияния композиции раствора для деконтаминации на экспрессию характерных маркеров эндотелиальных клеток роговицы в эксперименте in vitro.

    Материал и методы. В экспериментальном исследовании использовались трупные донорские роговицы человека, полученные из Глазного тканевого банка ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Фёдорова» Минздрава России в количестве 12 штук от 6 доноров-трупов, с присутствием вируса простого герпеса 1-го типа, верифицированного по данным ПЦР. Роговицы разделялись на две группы. B опытную группу вошли роговицы, которые консервировали по предложенной технологии в растворе для вирусной деконтаминации (n= 6) при температуре +37 °С в течение 24 часов (для выработки эндогенных интерферонов), после чего переносили в раствор для хранения роговицы. В контрольную группу (n= 6) вошли роговицы, которые консервировали по стандартной методике в растворе для хранения роговицы, используемом в Глазном тканевом банке, при температуре 4 °С. Спустя 6 суток консервации роговицы выводили из эксперимента и проводили иммуногистохимическое исследование (ИГХ). В опытной и контрольной группе сравнивалась экспрессия фермента Na + /K + -АТФазы как маркера насосной функции, и маркера плотных межклеточных контактов ZO-1, характеризующего сохранность эпителиальной природы исследуемых клеток.

    Результаты. Среднее значение экспрессии Na+/K+-АТФазы в опытной и контрольной группах составляло 0,0060 ± 0,0014 и 0,0058 ± 0,0015 относительных единиц соответственно. Среднее значение экспрессии маркера плотных межклеточных контактов ZO-1 в опытной и контрольной группах составляло 0,0048 ± 0,0017 и 0,0049 ± 0,0019 относительных единиц соответственно Достоверных отличий в уровнях экспрессии Na+/K+ -АТФазы и ZO-1 между группами выявлено не было (р> 0,05).

    Заключение. Консервация роговиц в растворе для вирусной деконтаминации до 6 суток не оказывает влияния на изменение уровней экспрессии характерных маркеров эндотелиальных клеток роговицы при сравнении с консервацией по стандартной методике на тех же сроках наблюдения.