Влияние флавоноида (кверцетина) на показатели гемокоагуляции сыворотки крови in vitro у больных диабетической ретинопатией

    К основным патогенетическим механизмам развития диабетической ретинопатии (ДР) относится цитокиновый дисбаланс, даже у пациентов с коротким стажем течения сахарного диабета. Цитокины играют ключевую роль в иммуногенезе и участвуют в процессах взаимодействия иммунной, эндокринной и нервной систем. Реализация иммунного ответа, помимо синтеза цитокинов, всегда сопровождается вовлечением гемостатических реакций и активацией фибринолиза [1, 2].

    Известно, что флавоноиды (кверцетин) относятся к нетоксичным полифенольным соединениям, способным обрывать цепные свободнорадикальные реакции, изменять активность различных ферментов, прямо и опосредованно модулировать цитокиновый потенциал и др. [3, 4].

    Цель – исследовать влияние флавоноида (кверцетина) на показатели гемокоагуляции in vitro у больных ДР.

    Материал и методы. Обследовано 119 пациентов (24 – контроль), согласно классификации Kohner E. и Porta M. (1991), разделены на следующие группы: 1-я группа – 14 (28 глаз) пациентов с непролиферативной ретинопатией (НДР), 2-я группа – 39 (78 глаз) пациентов с препролиферативной ретинопатией (ППДР), 3-ю группу составили 42 (84 глаза) пациента с пролиферативной ретинопатией (ПДР).

    Проводилось три последовательных эксперимента: эксперимент № 1 – определение показателя в культуральной среде культуры мононуклеарных клеток в исследовании in vitro, эксперимент № 2 – определение показателя in vitro с добавлением глюкозы, эксперимент № 3 – определение показателя in vitro с добавлением к глюкозе флавоноида (кверцетина).

    Определение фибринолитической активности (ФА) проводилось по методике Astrup T., Mullertz S. Использован метод краткосрочных органных культур, обеспечивающий культивирование клеток (мононуклеарных лейкоцитов, клеток сосудистого эндотелия) in vitro по Лурия Е. А. Определяли время рекальцификации по Bergerhof H., Roca L. Проводились культуральные эксперименты с введением в культуральную среду кверцетина, глюкозы и инсулина.

    Результаты. Установлено, что у больных 1-й группы ФА культуральной среды культуры мононуклеарных клеток под влиянием введения в культуральную среду глюкозы и кверцетина существенно не меняется. Исключение составляют больные 1-й группы, у которых в сравнении с экспериментом № 2 под влиянием флавоноида (эксперимент № 3) показатель возрастает на 6,3% (р1<0,05). Обращает на себя внимание, что во всех экспериментах у больных как 2-й, так и 3-й групп ФА культуральной среды статистически значимо ниже, чем у больных 1-й группы. ФА культуральной среды культуры мононуклеарных клеток у больных 1-й, 2-й и 3-й групп под влиянием введения в культуральную среду инсулина и флавоноида существенно не меняется, во всех экспериментах у больных как 2-й, так и 3-й групп ФА культуральной среды статистически значимо ниже, чем у больных 1-й группы.

    Время рекальцификации (ВР) культуральной среды у больных 1-й группы снижается при введении в эксперимент глюкозы на 6,7% (р<0,05), а у больных 2-й и 3-й групп в эксперименте № 2 показатель существенно не меняется, у больных 2-й и 3-й групп показатель достоверно ниже (прокоагулянтная активность выше), чем у больных 1-й группы (соответственно на 14,8% (р2<0,001) и 18,5% (р2<0,002)) и существенно увеличивается (в сравнении с экспериментом № 2) в культуральном эксперименте с кверцетином (на 8,4%, р< 0,02). У больных 1-й и 2-й групп ВР культуральной среды при введении в эксперимент инсулина существенно не меняется, а у больных 3-й группы – снижается (прокоагулянтная активность возрастает) на 11,3% (р<0,02). В экспериментальной модели с флавоноидом только у больных 3-й группы можно констатировать модулирующее влияние препарата на инсулинзависимую прокоагулянтную активность мононуклеаров: в эксперименте № 3 показатель возрастает (прокоагулянтная активность снижается) на 13,3% (р<0,01) в сравнении с экспериментом № 1 и на 27,8% (р1<0,001) – в сравнении с экспериментом № 2.

    Выводы. Нарастание степени тяжести диабетической ретинопатии характеризуется углублением дисбаланса в системе гемокоагуляция/фибринолиз в сторону преобладания гиперкоагуляционных сдвигов на уровне тканей (куда целенаправленно мигрируют мононуклеарные лейкоциты), прежде всего при наличии воспалительного компонента патологического процесса, включающего изменение функциональных свойств мононуклеарных клеток. Указанные факты, по нашему мнению, могут являться важной патогенетической составляющей прогрессирования ДР.

    Нами доказано, что флавоноид (кверцетин) может отменять (снижать) ингибирующее влияние факторов культуральной жидкости культуры мононуклеарных лейкоцитов больных с ДР на фибринолитическую активность лейкоцитов. В сравнении с экспериментом № 2 (ВР) статистически значимая динамика (снижение) прокоагулянтной активности мононуклеаров под влиянием флавоноида выявлена только у больных с ППДР и ПДР. Существенным механизмом прогрессирования ДР является гипергликемия и инсулинзависимый лейкоцито(лимфоцито)-опосредованный механизм формирования цитокинового дисбаланса.