Онлайн доклады

Онлайн доклады

Клинические случаи в офтальмологии

Клинические случаи в офтальмологии

Сателлитные симпозиумы в рамках 24-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

Сателлитные симпозиумы в рамках 24-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

NEW ERA Лазерная коррекция зрения: мифы и реальность

NEW ERA Лазерная коррекция зрения: мифы и реальность

Сателлитные симпозиумы в рамках XVII Российского общенационального офтальмологического форума

Сателлитные симпозиумы в рамках XVII Российского общенационального офтальмологического форума

IX Байкальские офтальмологические чтения «Традиции и инновации в офтальмологии»

IX Байкальские офтальмологические чтения «Традиции и инновации в офтальмологии»

Вопросы управления качеством медицинской организацией

Вопросы управления качеством медицинской организацией

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «XIII Съезд Общества офтальмологов России»

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «XIII Съезд Общества офтальмологов России»

Восток - Запад 2024 XIV Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2024 XIV Международная конференция по офтальмологии

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Белые ночи» 2024

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Белые ночи» 2024

Новые технологии в офтальмологии 2024. Республиканская научно-практическая конференция

Новые технологии в офтальмологии 2024. Республиканская научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научной конференции офтальмологов с международным участием «Невские горизонты - 2024»

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научной конференции офтальмологов с международным участием «Невские горизонты - 2024»

Сателлитные симпозиумы в рамках 21-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии» 2024

Сателлитные симпозиумы в рамках 21-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии» 2024

Впервые выявленная глаукома: проблемы и возможности

Впервые выявленная глаукома: проблемы и возможности

Сателлитные симпозиумы в рамках Пироговского офтальмологического форума 2023

Сателлитные симпозиумы в рамках Пироговского офтальмологического форума 2023

Пироговский офтальмологический форум 2023

Пироговский офтальмологический форум 2023

Сателлитные симпозиумы в рамках III Всероссийской конференции с международным участием «Воспаление глаза 2023»

Сателлитные симпозиумы в рамках III Всероссийской конференции с международным участием «Воспаление глаза 2023»

Проблемные вопросы глаукомы: Искусственный интеллект в диагностике и мониторинге XII Международный симпозиум

Проблемные вопросы глаукомы: Искусственный интеллект в диагностике и мониторинге XII Международный симпозиум

Сателлитные симпозиумы в рамках 23-го Всероссийского научно-практического конгресса с  международным участием «Современные технологии  катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

Сателлитные симпозиумы в рамках 23-го Всероссийского научно-практического конгресса с международным участием «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

NEW ERA Способы трансcклеральной фиксации ИОЛ

NEW ERA Способы трансcклеральной фиксации ИОЛ

Ромашка Фёдорова: 35 лет в движении. Всероссийская научно-практическая конференция

Ромашка Фёдорова: 35 лет в движении. Всероссийская научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках Северо-Кавказского офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках Северо-Кавказского офтальмологического саммита

NEW ERA Новые молекулы в лечении макулярной патологии

NEW ERA Новые молекулы в лечении макулярной патологии

Сателлитные симпозиумы в рамках XXIX Международного офтальмологического конгресса «Белые ночи»

Сателлитные симпозиумы в рамках XXIX Международного офтальмологического конгресса «Белые ночи»

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научно-практической конференции с международным участием  «Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия»

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия»

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Сателлитные симпозиумы в рамках 20 Всероссийской научно-практической конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии»

Сателлитные симпозиумы в рамках 20 Всероссийской научно-практической конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии»

NEW ERA Особенности имплантации мультифокальных ИОЛ

NEW ERA Особенности имплантации мультифокальных ИОЛ

XXX Научно-практическая конференция офтальмологов  Екатеринбургского центра МНТК «Микрохирургия глаза»

XXX Научно-практическая конференция офтальмологов Екатеринбургского центра МНТК «Микрохирургия глаза»

Прогрессивные технологии микрохирургии глаза в реальной клинической практике. Научно-практическая конференция

Прогрессивные технологии микрохирургии глаза в реальной клинической практике. Научно-практическая конференция

Пироговский офтальмологический форум

Пироговский офтальмологический форум

Глаукома. Избранные вопросы патогенеза, профилактики, диагностики, лечения. Всероссийская офтальмологическая конференция

Глаукома. Избранные вопросы патогенеза, профилактики, диагностики, лечения. Всероссийская офтальмологическая конференция

Терапия глаукомы. Практический подход и поиск решений в дискуссии

Терапия глаукомы. Практический подход и поиск решений в дискуссии

NEW ERA Хирургическое лечение глаукомы: НГСЭ

NEW ERA Хирургическое лечение глаукомы: НГСЭ

Сателлитные симпозиумы в рамках 22-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

Сателлитные симпозиумы в рамках 22-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ - 2022

Сателлитные симпозиумы в рамках РООФ - 2022

Современные достижения лазерной офтальмохирургии Всероссийский научный симпозиум

Современные достижения лазерной офтальмохирургии Всероссийский научный симпозиум

Юбилейная X научно-практическая конференция, посвященная 35-летию Чебоксарского филиала ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова»

Юбилейная X научно-практическая конференция, посвященная 35-летию Чебоксарского филиала ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» имени академика С.Н. Федорова»

NEW ERA Оптическая когерентная томография. Критерии активности макулярной неоваскуляризации

NEW ERA Оптическая когерентная томография. Критерии активности макулярной неоваскуляризации

NEW ERA Хирургия осложнённой катаракты

NEW ERA Хирургия осложнённой катаракты

NEW ERA Особенности лечения отслойки сетчатки

NEW ERA Особенности лечения отслойки сетчатки

Шовная фиксация ИОЛ

Мастер класс

Шовная фиксация ИОЛ

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Сателлитные симпозиумы в рамках I Дальневосточного офтальмологического саммита

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Рефракционная хирургия хрусталика. Точно в цель. Научно-практический семинар

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2022 Международная конференция по офтальмологии

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Вебинар

Целевые уровни ВГД в терапии глаукомы

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Сателлитные симпозиумы в рамках научной конференции «Невские горизонты - 2022»

Новые технологии в офтальмологии 2022

Новые технологии в офтальмологии 2022

ОКТ: новые горизонты

Сателлитный симпозиум

ОКТ: новые горизонты

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Вебинар

Превентивная интрасклеральная фланцевая фиксация ИОЛ при подвывихе хрусталика

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лечение глаукомы: инновационный вектор - 2022. III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Вебинар компании «Rayner»

Вебинар компании «Rayner»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Цикл онлайн дискуссий компании «Акрихин» «О глаукоме и ВМД в прямом эфире»

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Вебинар

Алгоритм ведения пациентов с астенопией после кераторефракционных операций

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Сателлитный симпозиум

Cовременные технологии диагностики патологий заднего отдела глаза

Вебинары компании  «Акрихин»

Вебинары компании «Акрихин»

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Вебинар

Снижение концентрации «Бримонидина», как новое решение в терапии у пациентов с глаукомой

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Конференция

Лазерная интраокулярная и рефракционная хирургия Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии: в фокусе – роговица

XIX Конгресс Российского глаукомного общества  «19+ Друзей Президента»

XIX Конгресс Российского глаукомного общества «19+ Друзей Президента»

Пироговский офтальмологический форум

Пироговский офтальмологический форум

Кератиты, язвы роговицы

Вебинар

Кератиты, язвы роговицы

Актуальные вопросы офтальмологии

Вебинар

Актуальные вопросы офтальмологии

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Сателлитный симпозиум

Всероссийский консилиум. Периоперационное ведение пациентов с глаукомой

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Трансплантация роговично-протезного комплекса у пациента с васкуляризированным бельмом роговицы

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Конференция

Новые технологии в офтальмологии. Посвящена 100-летию образования Татарской АССР

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Конференция

Особенности нарушения рефракции в детском возрасте Межрегиональная научно-практическая конференция

Клинические случаи в офтальмологии

Клинические случаи в офтальмологии

Онлайн доклады

Онлайн доклады

Сателлитные симпозиумы в рамках 24-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

Сателлитные симпозиумы в рамках 24-го Всероссийского научно-практического конгресса «Современные технологии катарактальной, рефракционной и роговичной хирургии»

NEW ERA Лазерная коррекция зрения: мифы и реальность

NEW ERA Лазерная коррекция зрения: мифы и реальность

Сателлитные симпозиумы в рамках XVII Российского общенационального офтальмологического форума

Сателлитные симпозиумы в рамках XVII Российского общенационального офтальмологического форума

IX Байкальские офтальмологические чтения «Традиции и инновации в офтальмологии»

IX Байкальские офтальмологические чтения «Традиции и инновации в офтальмологии»

Вопросы управления качеством медицинской организацией

Вопросы управления качеством медицинской организацией

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «XIII Съезд Общества офтальмологов России»

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «XIII Съезд Общества офтальмологов России»

Восток - Запад 2024 XIV Международная конференция по офтальмологии

Восток - Запад 2024 XIV Международная конференция по офтальмологии

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Белые ночи» 2024

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Белые ночи» 2024

Новые технологии в офтальмологии 2024. Республиканская научно-практическая конференция

Новые технологии в офтальмологии 2024. Республиканская научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научной конференции офтальмологов с международным участием «Невские горизонты - 2024»

Сателлитные симпозиумы в рамках Всероссийской научной конференции офтальмологов с международным участием «Невские горизонты - 2024»

Сателлитные симпозиумы в рамках 21-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии» 2024

Сателлитные симпозиумы в рамках 21-й Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии» 2024

Впервые выявленная глаукома: проблемы и возможности

Впервые выявленная глаукома: проблемы и возможности

Пироговский офтальмологический форум 2023

Пироговский офтальмологический форум 2023

Все видео...
 Реферат RUS  Литература  Полный текст

Выделение стволовых клеток орбитальной жировой клетчатки человека


    Актуальность

     За последние десятилетия увеличилось количество исследований, посвященных возможности применения клеточных технологий в офтальмологии. Одним из перспективных направлений является использование стволовых клеток, в том числе выделенных из орбитальной жировой клетчатки человека. Активный научный интерес к этой ткани обусловлен уникальным нейроэктодермальным происхождением отдельных ее фракций, однако актуальными остаются многие методологические вопросы. Данные литературы о методологии выделения стволовых клеток орбитальной жировой клетчатки скудны и неоднозначны [1, 2, 4, 5]. Описанные методики включали механическое измельчение образцов жировой ткани, ферментативное расщепление раствором коллагеназы, фильтрацию и центрифугирование. При этом нет единого подхода к выбору концентрации раствора коллагеназы, продолжительности ферментативного расщепления и параметров центрифугирования.

    Авторы использовали преимущественно орбитальную жировую клетчатку из верхних жировых пространств, удаляемую при выполнении косметической блефаропластики [4, 5] в объеме до 1,0 мл [3], однако другие фракции орбитальной жировой клетчатки также представляют интерес для изучения. Альтернативным материалом может служить кадаверная жировая ткань, о чем свидетельствует единичное упоминание о возможности выделения стволовых клеток из кадаверной подкожной жировой ткани [6]. По данным Y.Shi и соавторов, при выделении в течение 24 часов после смерти донора клетки сохраняли не только свою жизнеспособность, но и способность к направленной дифференцировке. Однако не обнаружено данных об использовании кадаверной жировой клетчатки орбиты для выделения стволовых клеток.

    Цель

    Определить материал и методику для выделения стволовых клеток из орбитальной жировой клетчатки человека для дальнейшего изучения и использования в регенеративной медицине и реконструктивно-пластической хирургии.

    Материал и методы

     Использовали кадаверную ретробульбарную жировую клетчатку от 11 доноров в возрасте 41-73 лет, предоставленную Глазным банком «МНТК «Микрохирургия глаза» имени акад. С.Н. Фёдорова» Минздрава России, для выделения фракции стволовых клеток. Временной интервал от момента смерти донора до начала работы с образцами ретробульбарной клетчатки в лаборатории составлял от 15 до 25 часов.

    Выполняли различные пластические хирургические вмешательства в области орбиты, включая удаление глазного яблока, по показаниям и согласно общепринятым методикам. В ходе операций анализировали возможность доступа к различным порциям орбитального жира и допустимый объем его резекции.

    Для последующего выделения фракции стволовых клеток резецировали орбитальную жировую ткань в объеме от 0,3 мл до 0,5 мл из различных жировых пространств в процессе следующих плановых операций: блефаропластика - 3, резекция леватора - 8, эвисцерация - 1, энуклеация – 1. Выделение стволовых клеток из полученных образцов проводили в сроки до 5 часов и спустя 24 часа после резекции.

    Для контроля возможного негативного функционального и косметического эффекта в результате резекции жировой ткани проводили стандартное офтальмологическое обследование, дополненное экзофтальмометрией, до и после операции.

    Выделение стволовых клеток из орбитальной жировой клетчатки человека проводили на базе Центра фундаментальных и прикладных медико-биологических проблем ФГБУ «МНТК «Микрохирургия глаза» имени акад. С.Н. Фёдорова» Минздрава России с использованием следующей методики. Образец жировой ткани выдерживали в течение 2 часов в физиологическом растворе с добавлением смеси антибиотиков (пенициллин 10000 МЕ/мл, стрептомицин 10000 мкг/мл, амфотерицин 25 мкг/мл; MPBiomedicals, LLC, США). Все последующие этапы проводили в ламинарном боксе II класса безопасности MSC-Advantage (Scientific Technologies, Германия). Жировую ткань измельчали ножницами на фрагменты диаметром 1-2 мм. Полученную массу заливали раствором коллагеназы второго типа (MPBiomedicals, LLC, США) типа в сбалансированном растворе Хенкса (ПанЭко, Россия), в соотношении 1мг/мл на 1 г жировой ткани. Инкубировали в течение 60 минут при температуре 370С при постоянном помешивании в шейкере (Asys Thermostar, Biochrom, Ltd, Великобритания) при температуре 370С. После этого полученную кашицу переливали в пластиковую центрифужную пробирку, добавляли 5 мл DMEM/F12 (полная ростовая среда Игла в модификации Дульбекко и среда Хэма F12 в соотношении 1:1 по объему, ПанЭко, Россия) с 10% эмбриональной телячьей сыворотки (HyClone, Thermo Scientific, США) и центрифугировали в лабораторной центрифуге SL-40 R (Thermo Scientific, Германия) при 1000 об/мин в течение 5 минут. После этого верхнюю фракцию собирали и переносили в культуральный флакон, а среднюю удаляли из пробирки. Осадок ресуспендировали полной культуральной средой и переносили в тот же культуральный флакон, заливали DMEM/F12 с добавлением 2 ммоль L-глутамина (ПанЭко, Россия), 10% эмбриональной телячьей сыворотки и смеси антибиотиков (пенициллин 10000 МЕ/мл, стрептомицин 10000 мкг/мл, амфотерицин 25 мкг/мл; MPBiomedicals, LLC, США). Смену среды проводили на вторые сутки (при этом удалялись осевшие эритроциты и другие клетки стромально-сосудистой фракции, а также фрагменты жировой ткани), далее среду меняли каждые 3-4 дня.

    Результаты

    При работе с кадаверной ретробульбарной жировой клетчаткой получить фракцию колониеобразующих фибробластоподобных клеток удалось только в одном случае из 11 (рис. 1). Это и определило необходимость поиска альтернативного материала для выделения стволовых клеток орбитальной жировой ткани. С этой целью были определены операции, в ходе которых возможен доступ к различным порциям орбитальной жировой клетчатки. При блефаропластике верхних век и резекции леватора возможен забор жировой клетчатки в верхнем медиальном (между сухожилием верхней косой мышцы и медиальной связкой), верхнем среднем (между краем орбиты и верхней поверхностью мышцы, поднимающей верхнее веко) и верхнем латеральном (латеральнее места прикрепления верхней прямой мышцы глазного яблока) пространствах. При блефаропластике на нижних веках доступна орбитальная жировая клетчатка в нижнем медиальном (между медиальной связкой глаза и началом нижней косой мышцы), нижнем среднем (между нижней косой мышцей глаза и дном орбиты) и нижнем наружном (между наружной щечной связкой и фасциальной растяжкой нижней прямой мышцы, идущей к наружной связке век) жировых пространствах. Ретробульбарный жир вершины мышечной воронки хорошо доступен при эвисцероэнуклеации и энуклеации.

    При всех перечисленных операциях, по данным стандартного офтальмологического обследования и экзофтальмометрии, возможна резекция жировой ткани в суммарном объеме до 0,5 мл без развития асимметрии и других негативных последствий для органа зрения.

    С помощью описанной методики из всех резецированных фрагментов орбитальной жировой клетчатки удалось выделить фракцию колониеобразующих фибробластоподобных клеток (рис. 2). При сохранении образцов жировой ткани в физиологическом растворе со смесью антибиотиков при температуре +4 0C в течение 5 часов после резекции клетки были выделены из всех 11 образцов. Спустя сутки, при тех же условиях хранения, выделить интересующие нас клетки не удалось.

    Заключение

     Кадаверная ретробульбарная жировая ткань не представляется перспективным материалом для выделения фракции стволовых клеток, учитывая возраст доноров, сроки доставки материала в Глазной банк и отсутствие стабильного результата. Орбитальная жировая ткань человека, полученная интраоперационно, является оптимальным материалом для выделения стволовых клеток. При косметической блефаропластике, резекции леватора, энуклеации, эвисцероэнуклеации возможен доступ к различным порциям орбитальной жировой клетчатки. Резекция любой порции орбитального жира в объеме до 0,5 мл не сопровождается развитием негативных функционально-эстетических последствий для пациентов.

    Указанный протокол выделения стволовых клеток позволяет получить фракцию колониеобразующих фибробластоподобных клеток из всех фракций орбитальной жировой клетчатки человека, полученной интраоперационно.


Страница источника: 10

OAI-PMH ID: oai:eyepress.ru:article17844
Просмотров: 14088





Офтальмохирургия

Офтальмохирургия

Новое в офтальмологии

Новое в офтальмологии

Мир офтальмологии

Мир офтальмологии

Российская офтальмология онлайн

Российская офтальмология онлайн

Российская детская офтальмология

Российская детская офтальмология

Современные технологии в офтальмологии

Современные технологии в офтальмологии

Точка зрения. Восток - Запад

Точка зрения. Восток - Запад

Новости глаукомы

Новости глаукомы

Отражение

Отражение

Клинические случаи в офтальмологии

Клинические случаи в офтальмологии
Bausch + Lomb
Reper
NorthStar
Виатрис
Профитфарм
ЭТП
Rayner
Senju
Гельтек
santen
Ziemer
Tradomed
Екатеринбургский центр Микрохирургия глаза
МТ Техника
Nanoptika
Rompharm
R-optics
Фокус
sentiss
nidek
aseptica