Год
2016

Изучение полиморфизма генов коллагена I, III типов как факторов риска развития первичной открытоугольной глаукомы


Органзации: В оригинале: ФГБНУ «Научно-исследовательский институт глазных болезней им Гельмгольца»
ФГБНУ «Медико-генетический научный центр»



Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук

Общая характеристика работы


Актуальность темы
    Статистические исследования, проведенные в последние годы, свидетельствуют о росте заболеваемости глаукомой по всему миру (Нероев В.В., 2015; Cook C., 2012; Tham Y.C., 2014). Первичная открытоугольная глаукома (ПОУГ) – наиболее часто встречающаяся форма глаукомы, представляет собой прогрессирующую оптическую нейропатию, характеризующуюся экскавацией (ДЗН) и характерным сужением полей зрения. Несмотря на то, что клинические проявления первичной глаукомы давно изучены, патофизиологический механизм глаукомного повреждения ДЗН до сих пор остается не до конца ясным (Нестеров А. П., 2008; Волков В. В., 2010; Tezel G., 2013; Wu M., 2015).

    Одним из наиболее значимых факторов риска ПОУГ является наследственная предрасположенность (Астахов Ю.С., 2013). Риск развития глаукомы у родственников I степени родства составляет от 9,2% до 22% (Fuse N., 2010; Wu J., 2015), при этом обнаруженные к настоящему времени причинные гены и гены-кандидаты лишь частично объясняют роль наследственности в патогенезе первичной глаукомы (Fuse N., 2010; Alward P., 2014). Другой особенностью патогенеза ПОУГ является дезорганизация соединительной ткани (СТ) глаза, в наибольшей степени затрагивающая коллагеновые структуры и рассматриваемая некоторыми авторами как начальное звено глаукомного процесса (Затулина Н.И., Панормова Н.В., Сеннова Л.Г., 2000; Журавлева А. Н., 2010; Girard M. J., 2011; Wenbin H., 2014). Известно, что в основе структурных изменений СТ лежат наследственные нарушения синтеза коллагена (Кадурина Т. И., 2009; Watts R. A., 2015). В работах А.Н. Журавлевой (2011) было показано, что при ПОУГ происходит специфическая структурная дезорганизация СТ склеры в местах, соответствующих наибольшему перераспределению коллагена I и III типа, что, по мнению автора, возможно, является проявлением наследуемой патологии этих структурных белков.

    Раннее было показано, что, изменение свойств коллагена в результате наличия генетических вариантов соответствующих генов могут приводить к нарушениям структуры СТ. Подобные взаимосвязи описаны между недифференцированной дисплазией соединительной ткани (нДСТ) и рядом синдромных заболеваний, которые характеризуются выраженным нарушением её механических свойств. В ряде работ показаны ассоциации между патологией СТ глаза и ПОУГ (Журавлева А. Н., 2008; Dalgliesh R., 2014; Sillence D., 2015).

    В настоящее время ассоциации полиморфных вариантов генов коллагена со специфическими деструктивными изменениями в СТ глаза при ПОУГ не изучены. При этом каждый из наиболее значимых факторов риска ПОУГ в той или иной мере отражает состояние СТ глаза – дисгенезия переднего сегмента глаза, близорукость, тонкая роговица (Журавлева А. Н., 2014; Wu J., 2015). Учитывая, что склера в основном состоит из коллагена I типа, а специфические деструктивные изменения СТ склеры при ПОУГ сочетаются с перераспределением в ней коллагена I и III типа, мы предполагаем, что полиморфизмы в генах коллагена I и III типа могут быть ассоциированы с ПОУГ и влиять на характер течения глаукомного процесса.
Цели и задачи исследования
    Цель исследования: изучить клинико-генетические взаимосвязи между полиморфизмами в генах коллагена I, III типа и развитием ПОУГ.

    Задачи исследования:

    1. Определить частоту встречаемости полиморфизмов с.104-441G>T гена СOL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1 у больных ПОУГ и здоровых добровольцев из популяции жителей Москвы и Московской области, оценить их диагностическую значимость в ранней диагностике ПОУГ.

    2. Оценить вклад полиморфизмов с.104-441G>T гена СOL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1 в развитие заболевания у больных ПОУГ с семейным анамнезом заболевания и без семейного анамнеза.

    3. Провести сравнительный анализ биометрических (переднее-задняя ось глаза, центральная толщина роговицы) и биомеханических (корнеальный гистерезис, фактор резистентности роговицы) параметров глаза у больных ПОУГ (семейной и спорадической) и в контрольной выборке.

    4. Сравнить частоту встречаемости фенотипических проявлений нДСТ у больных ПОУГ и в контрольной группе.

    5. Оценить влияние генетических полиморфизмов с.104-441G>T гена СOL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1, наличия семейного анамнеза по первичной глаукоме, фенотипических проявлений недифференцированной патологии соединительной ткани на характер течения глаукомного процесса.
Научная новизна
    Впервые, на клиническом материале изучены частоты полиморфизмов с.104-441G>T гена СOL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1 у пациентов с ПОУГ в сравнении с группой контроля и показан их вклад в развитие ПОУГ. Впервые установлена ассоциация между семейной ПОУГ и носительством аллелей (с.2092A, с.2244С) и генотипа (с.2092 G/A+A/A) гена COL3A1. Впервые изучены особенности глазных и фенотипических проявлений диспластико-зависимого характера у больных ПОУГ во взаимосвязи с полиморфизмами в генах коллагена и проанализирована их роль в патогенезе заболевания. Предложены новые критерии для выявления групп риска прогрессирующего течения ПОУГ: носительство генотипа с.2092А/А гена СOL3A1 в сочетании с фенотипическими проявлениями нДСТ.
Практическая значимость
     Усовершенствование подходов к ранней диагностике ПОУГ путем внедрения в клиническую практику методов молекулярно-генетических (определение полиморфизмов с.104-441G>T гена СOL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1) и клинических исследований (определение фенотипических маркеров нДСТ) для выявления лиц с повышенным риском развития ПОУГ. Полученные результаты молекулярно-генетических и клинических исследований больных ПОУГ позволяют выделить группы пациентов с более высоким риском прогрессирующего характера течения заболевания, что поможет оптимизировать у них лечебные мероприятия.
Методология и методы исследования
    Работа выполнена в дизайне когортного исследования с использованием клинических, инструментальных, генетических и статистических методов
Основные положения, выносимые на защиту
    1. Полиморфизмы с.2092G>A и с.2244T>C гена СOL3A1 являются факторами риска по развитию ПОУГ у жителей Москвы и Московской области. Маркерами повышенного риска развития глаукомного процесса у больных с семейным анамнезом заболевания являются аллели с.2092А, с.2244С и генотип с.2092G/A+A/A.

    2. Клиническими особенностями ПОУГ у пациентов с семейным анамнезом заболевания являются: ранняя манифестация глаукомного процесса, быстропрогрессирующий характер течения глаукомного процесса по сравнению с больными без семейного анамнеза заболевания.

    3. Независимыми факторами риска прогрессирующего течения глаукомного процесса у больных ПОУГ жителей Москвы и Московской области являются: наличие семейного анамнеза по глаукоме и носительство генотипа с.2092А/А гена СOL3A1.
Степень достоверности и апробация результатов
    Обоснованность и достоверность научных положений определяются достаточным объёмом проведенных исследований, применяемыми современными информативными методами исследования, статистической значимостью полученных данных, использованием критериев доказательной медицины. Полнота и глубина собственного материала в достаточной мере обосновывают выводы и рекомендации, вытекающие из полученных результатов.

    Материалы работы и основные положения диссертации доложены на IV Всероссийской научной конференции с участием иностранных специалистов «РООФ» (Москва, 2011); V Всероссийской научной конференции с участием иностранных специалистов: «РООФ» (Москва, 2012); XIV Международной научно-практической конференции «Пожилой больной. Качество жизни» (Москва, 2012); IX Международной конференции «Глаукома: теории, тенденции, технологии. HRT Клуб Россия – 2012» (Москва, 2012); конференции «Глаукома: теория и практика» (Санкт-Петербург, 2012), VI Всероссийской научной конференции с участием иностранных специалистов «РООФ» (Москва, 2013); XIX Международном офтальмологическом конгрессе «Белые ночи» (Санкт-Петербург, 2013); V Международной конференции World Glaucoma Congress (Ванкувер, 2013); Всероссийском конгрессе с международным участием «Глаукома на рубеже веков» (Казань, 2013); XX Международном офтальмологическом конгрессе «Белые ночи» (Санкт-Петербург, 2014); XI международной конференции European Glaucoma Society (Ницца, 2014); X Международной Пироговской научной медицинской конференции студентов и молодых ученых (Москва, 2015); X Съезде офтальмологов РФ (Москва, 2015).
Личный вклад автора
    Автором оценена роль семейного анамнеза по ПОУГ в сочетании с генетическими полиморфизмами на характер течения глаукомного процесса. Изучены молекулярно-генетические и клинические факторы повышающие риск развития и прогрессирования ПОУГ путем исследования генов коллагена I и III типа (СOL1A1, СOL3A1), биометрических и биомеханических показателей глаз. Разработаны молекулярно-генетические тесты с целью выявления групп риска по ПОУГ. Диссертант проводил полное офтальмологическое обследование пациентов в течение всего срока наблюдения (компьютерная периметрия, измерение ВГД, исследование биомеханических и биометрических параметров глаза, HRT сканирование ДЗН), а также анализ полученных результатов и их статистическую обработку.
Публикации
    По теме диссертации опубликовано 14 работ из них 4 в рецензируемых научных журналах, утвержденным ВАК Министерства образования РФ.
Соответствие диссертации Паспорту научной специальности
    Диссертационное исследование проведено в соответствии со специальностями: 14.01.07 – Глазные болезни, 03.02.07 – Генетика, охватывающими проблему диагностики ПОУГ, а также направленные на разработку молекулярно-генетических тестов для выявления групп риска ПОУГ.
Благодарность
    Автор выражает глубокую благодарность за неоценимый вклад в написание работы научному сотруднику отдела глаукомы ФГБУ МНИИ ГБ им. Гельмгольца, к.м.н. А.Н. Журавлевой.
Внедрение результатов работы в практику
    Разработанный алгоритм диагностики глаукомы внедрен в практику работы отдела глаукомы ФГБУ «Московский научно-исследовательский институт глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава РФ.
Структура и объем диссертации
    Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов и практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 22 таблицами, 19 рисунками. Список литературы содержит 175 источников (42 – отечественных, 133 – зарубежных).

Содержание работы


Материалы и методы исследования
     Обследовано 240 человек (мужчин – 74, женщин – 166), средний возраст (60,37±9,63), не состоящих в родстве, проживающих на территории Москвы и Московской области, из них 155 человек (мужчин – 50; женщин – 105) с диагнозом ПОУГ I-III стадий на одном или обоих глазах (средний возраст больных – 68,8±5,9 лет) и 85 относительно здоровых человек (мужчин – 24; женщин – 61), средний возраст – (65,1±6,9 лет). Пробанды с диагнозом ПОУГ были разделены на две группы. В 1-ю группу вошли 74 человек с семейной формой заболевания, которая определялась на основании собранного анамнеза при наличии у пробанда 2-х больных родственников. Во 2-ю группу вошли 81 человек без отягощенного семейного анамнеза заболевания. В 3-ю (контрольную группу) вошли 85 относительно здоровых человек без манифестной офтальмопатологии. Допустимая сопутствующая офтальмопатология – начальная катаракта, миопия слабой степени. Дополнительным критерием отбора являлось отсутствие каких-либо анамнестических данных о болезнях СТ. Сопутствующая общесоматическая патология имела возрастной характер и была представлена, в основном, ишемической болезнью сердца, атеросклерозом, гипертонической болезнью 1-2 стадий, остеохондрозом. Срок наблюдения за пациентами составил 1 год.

    Клинико-диагностические методы исследования. Всем больным ПОУГ и здоровым добровольцам на базе отдела глаукомы ФГБУ МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца Минздрава РФ (начальник отдела – д.м.н., О.А. Киселева) проводились стандартные и специальные офтальмологические исследования (выполнены автором самостоятельно): визометрия, рефрактометрия, тонометрия по Маклакову, тонография, биомикроскопия, гониоскопия, офтальмоскопия, кинетическая периметрия, конфокальная лазерная сканирующая офтальмоскопия (Heidelberg Retina Tomograph III «Heidelberg Engenering»), статическая компьютерная периметрия (AP-5000C «Kowa Optimed» по программам 30/2, 24/2), исследование вязко-эластических свойств роговицы (Ocular Response Analyzer, Reichert «Reichert Ophthalmic Instruments»). Изучение биометрических показателей глаза проводилось на базе отдела ультразвуковых исследований «МНИИ глазных болезней им. Гельмгольца» Минздрава РФ (начальник отдела – д.м.н., профессор Киселева Т.Н.).

    В ходе работы все больные ПОУГ и здоровые добровольцы были обследованы в ФГБНУ «Научно-исследовательский институт ревматологии им. В.А. Насоновой» (директор – акад. РАН Е.Л. Насонов) с целью выявления фенотипических проявлений недифференцированной дисплазии соединительной ткани (нДСТ).

    Молекулярно-генетические методы исследования. Для проведения молекулярно-генетических исследований у всех обследуемых проводилось изучение анамнеза жизни с последующим забором крови из вены объемом 9 мл в вакуумные пробирки с ЭДТА в отделе глаукомы ФГБУ «МНИИ ГБ им. Гельмгольца». ДНК выделяли из лейкоцитарной фракции венозной крови с использованием набора «Wizard DNA Purification Kit» (Promega) по инструкции производителя. Исследование полиморфизмов генов проводилось методом минисеквенирования с последующей времяпролетной масс-спектрометрией образца на матрице (MALDI-TOF) в клинико-диагностической лаборатории ООО НПФ «ЛИТЕХ» (заведующая клинико-диагностической лабораторией –Джеджеиа Л.В.) по стандартному протоколу (Wise C.A., 2003). Список исследованных полиморфизмов, а также их характеристика представлены в таблице 1. Для амплификации локусов, содержащих исследуемые нуклеотидные замены, были использованы следующие праймеры, которые были синтезированы в НИИ ФХМ (таблица 2).

     Для реакции минисеквенирования были использованы праймеры, которые были синтезированы в НИИ ФХМ (таблица 3).

    ПЦР реакция проводилась на Термоциклере Labcycler производства SensoQuest (Германия) в 10 микролитрах реакционной смеси, содержащей (PCR-bufer, dNTP, Taq-pol и праймеры в концентрациях, рекомендованных производителями тест систем ООО «Литех» по программе – 384U2_62: инкубация 94° – 5 мин, 94° – 15с, 62° – 25с, 72° – 20с, цикл от 2 до 40, инкубация 72° – 1,5 мин

    Cтатистические методы исследования. Все полученные результаты наблюдения и обследования вносились в специально разработанную тематическую карту. Статистическая обработка полученных результатов была проведена автором самостоятельно на персональном компьютере при помощи программного пакета “Spss 21 for Windows”. Различия распределения аллелей и генотипов исследуемых полиморфных маркеров в исследованных группах были изучены с помощью критерия χ² (хи-квадрат). Достоверными считали различия при p<0,05. Вероятность развития заболевания оценивали с помощью показателя соотношения шансов (ОШ) с оценкой 95% доверительного интервала (95% ДИ). Соответствие распределения генотипов равновесию Харди-Вайнберга проводили с использованием программы Hardy-Weinberg equilibrium calculator (http://www.oege.org/software/hwe-mr-calc.html). Для изучения влияния нескольких факторов на количественный признак использовался многофакторный дисперсионный анализ. Статистический анализ результатов клинического исследования проводили с использованием непараметрических статистик (критерий Манна-Уитни, критерий χ² , ранговая корреляция по Спирмену). Изучение распределения показателей корнеального гистерезиса (КГ) и фактора резистентности роговицы (ФРР) в зависимости от наличия или отсутствия семейного анамнеза по глаукоме проводилось с помощью дисперсионного анализа. Многофакторный анализ проводился при помощи модели многофакторной логистической регрессии. Достоверными считались различия при p<0,05.
Результаты исследования и их обсуждение
     В результате молекулярно-генетического анализа проведенного под руководством д.м.н. В.Л. Ижевской при участии д.м.н. О.А. Киселевой и А.Н. Журавлевой были получены данные по частотам аллелей и генотипов полиморфных маркеров c.104-441G>T гена COL1A1, с.2092G>A и с.2244T>C гена COL3A1. Частоты аллелей и генотипов изученных полиморфных маркеров не отклонялись от равновесия Харди-Вайнберга. Распределение аллелей изучаемых полиморфизмов в образцах крови контрольной группы соответствовали общемировым показателям, представленным в медико-генетических базах данных NCBI и Ensembl.

    В результате анализа полиморфизма с.104-441 G>T гена COL1A1 установлено, что из обследованных 74 больных сПОУГ 82% являются носителями генотипа G/G, 18% – носителями гетерозиготного генотипа G/T, носителей генотипа Т/Т не выявлено. Во 2 группе выявлено 76% носителей генотипа G/G, 24% носителей генотипа G/T, мутантных гомозигот не выявлено. Распределение генотипов в группе контроля существенно не отличалось от больных 1 и 2 групп и составило: G/G – 80%, G/T – 20%, T/T – 0% (таблица 4).

    При анализе распределения генотипов и аллелей между обследуемыми группами достоверных различий не найдено (таблица 5).

     Отсутствие достоверных различий по распространенности аллелей и генотипов полиморфизма с.104-441G>T гена COL1A1 между больных семейной и спорадической ПОУГ и контрольной группой указывает на то, что варианты с.104-441G>T не ассоциированы с первичной глаукомой в обследованной выборке.

    Анализ полиморфизма с.2092G>A гена COL3A1 показал следующее распределение G/G, G/A и A/A генотипов в 1 группе: 49%, 43% и 8%. Во 2 группе частота генотипов G/G, G/A и A/A составила: 53%, 44% и 3%. В группе контроля генотип G/G встречался в 65% случаев, в то время как генотипы G/A и A/A в 33% и 2% случаев соответственно (таблица 6).

    Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфизма с.2092G>A гена COL3A1 показал, что аллель A и комбинация генотипов G/A+А/A являются более распространенными у больных 1 группы, чем в контрольной группе (p=0,02; ОШ=1,82; 95%ДИ, 1,08-3,07) и (p=0,04; ОШ=1,94; 95%ДИ, 1,02-3,66) соответственно (таблица 7). Таким образом, на основании полученных данных можно сказать, что носительство аллеля А и генотипов G/A+А/А ассоциировано с сПОУГ. Данный факт может указывать на наследственно обусловленное нарушение свойств СТ при сПОУГ, что подтверждается результатами ранее проведенного исследования (Kluivers K.B., 2009).

     Генотипы T/T, T/C и C/C полиморфизма с.2244T>C гена COL3A1 в 1 группе распределялись следующим образом: 54%, 33% и 12%. Во 2 группе распределение генотипов было следующим: 61%, 34% и 5%. В группе контроля гомозиготный генотип T/T встречался в 69% случаев, в то время как генотипы G/A и A/A в 27% и 4% случаев соответственно (таблица 8).

    В результате сравнительного анализа распределения частот аллелей и генотипов полиморфизма с.2244T>C гена COL3A1 установлено, что аллель С достоверно чаще встречается у больных 1 группы (p=0,02; ОШ=1,84; 95%ДИ, 1,08-3,11). В тоже время отмечалась тенденция к увеличению частот генотипа С/С у больных сПОУГ по сравнению с контрольной группой, однако различия оказались не достоверны (p=0,07; ОШ=1,83; 95%ДИ, 0,96-3,48). Результаты сравнительного анализа указывают на то, что носительство аллеля С ассоциировано с сПОУГ.

    Представленные в литературе результаты морфологических и биомеханических исследований глаукомных глаз свидетельствуют о нарушении свойств СТ склеры (Журавлева А.Н., 2010; Иомдина Е.Н., 2014;). Можно предположить, что полиморфизмы гена играют важную роль в нарушении свойств СТ глаза. Учитывая близкое расположение полиморфизмов с.2244T>C и с.2092G>A гена COL3A1 на хромосоме, нами был проведен анализ сцепления, в результате которого выявлено неравновесие по сцеплению LOD=8,71. Данный факт указывает на то, что аллели, расположенные в одном сегменте длинного плеча второй хромосомы – 2q32.2, чаще, чем при случайном распределении появляются вместе в одном и том же гаплотипе. Полученные нами результаты, могут свидетельствовать о том, что в развитии ПОУГ определенную роль играют наследуемые варианты с.2244T>C и с.2092G>A гена COL3A1, который кодирует один из структурных белков СТ, глаза и других органов – коллаген III типа.

     В контрольной группе и у больных ПОУГ с помощью инструментальных методов исследований получена информация о размерах переднезадней оси глаза (ПЗО), центральной толщины роговицы (ЦТР), и определены биомеханические параметры – корнеальный гистерезис (КГ) и фактор резистентности роговицы (ФРР). В глазах без глаукомного процесса значения ПЗО варьируют от 21,03 до 24,31мм (22,79±0,77 мм). В 1-й группе значение длины ПЗО глаза составило в среднем 22,95±0,72 мм, что на 0,11 мм больше среднего значения 22,84±0,80 мм, полученного во 2-й группе и на 0,16 мм больше среднего значения 22,79±0,77 мм, полученного в контрольной группе. По данным авторефрактометрии среднее значение сфероэквивалента (СЭ) в контрольной группе оставило -0,04 ±1,57 дптр. При этом среднее значение СЭ в 1 группе составило -0,12±1,84 дптр, во 2 группе -0,09±1,93 дптр. (таблица 10). ЦТР в контрольной группе составила в среднем 545±28 мкм, в то время как у больных 1 группы 538±28,8 мкм, у больных 2 группы – 544±29,4 мкм соответственно (таблица 10).

    Показатель КГ в контрольной группе составил в среднем – (10,8±1,6 мм рт. ст.), что соответствует средним значениям, полученным в ранее проведенных исследованиях (Еричев В.П. 2007; Арутюнян Л.Л., 2009). В 1 группе значение КГ составило в среднем – (10,3±1,4 мм рт. ст.), при I стадии ПОУГ (53 глаза) – (10,7±1,2 мм рт. ст.), во II стадии (33 глаза) – (10,4±1,3 мм рт. ст.), в III стадии (55 глаз) – (9,7±1,7 мм рт. ст.; таблица 11). У больных 2 группы значение КГ составило в среднем – (10,8±1,9 мм рт. ст.), при I стадии ПОУГ (72 глаза) – (10,6±1,5 мм рт. ст.), во II стадии (39 глаз) – (10,6±2,1 мм рт. ст.), в III стадии (48 глаз) – (10,2±2,2 мм рт. ст.; таблица 11).

     Среднее значение ФРР в контрольной группе составило – (10,9±1,5 мм рт. ст.). В 1 группе значения ФРР составили в среднем – 10,5±1,5 мм рт. ст. При I стадии ПОУГ (53 глаза) среднее значение ФРР составило – 10,9±1,4 мм рт. ст., во II стадии (33 глаза) – 10,6±1,6 мм рт. ст., в III стадии (55 глаз) – 9,9±1,9 мм рт. ст. У больных 2 группы значение ФРР составило в среднем – 10,8±2,0 мм рт. ст. При I стадии ПОУГ (72 глаза) среднее значение ФРР составило – 10,9±2,1 мм рт. ст., во II стадии (39 глаз) – 10,8±1,3 мм рт. ст., в III стадии (48 глаз) – 10,4±1,9 мм рт. ст. (таблица 11). Параметры Стадия ПОУГ 1 группа 2 группа 3 группа КГ, мм рт. ст. I стадия 10,7±1,2 10,8±1,5 10,8±1,6 II стадия 10,4±1,3 10,6±2,1 III стадия 9,7±1,7 10,2±2,2 ФРР, мм рт. ст. I стадия 10,9±1,4 10,9±2,1 10,9±1,5 II стадия 10,6±1,6 10,8±1,3 III стадия 9,9±1,9 10,4±1,9

    Результаты сравнительного анализа показали, что у больных 1-й группы наблюдаются достоверно более высокие показатели длины ПЗО глаза, чем во 2-й и 3-й группах (p=0,01). В то же время нами не найдено достоверных различий по длине ПЗО между больными 2-ой и контрольной группой (p=0,23; рис. 1).

    Корреляционный анализ показал положительную корреляцию между ВГД и ПЗО (r=0,19; p=0,02; рис.2) в отличие от 2-ой и контрольной группы.

     Корреляционную связь между ПЗО и ВГД подтверждает ранее проведенные исследования (Tomlinson А., 1970; Iomdina E.N., Khoroshilova-Maslova I.P., 2015). По мнению некоторых авторов, высокие значения ВГД обуславливают увеличение ПЗО за счет деформации корнеосклеральной оболочки (Read S.A., 2008; Chakraborty R., 2011), при сПОУГ это может быть обусловлено структурными нарушениями СТ корнеосклеральной оболочки.

    У больных 1-ой группы показатели ЦТР были достоверно ниже, чем у больных 2-ой и контрольной группы (p<0,01), при этом различия между 2-ой и контрольной группой не выявлены (p=0,18; рис. 3).

    Результаты свидетельствуют об отличительных особенностях толщины роговицы больных сПОУГ, что согласуется с результатами других исследований (Quantock A. J., 2008; Desronvil T., 2010).

    Установлено, что у больных 1 группы значения КГ меньше, чем у больных 2-ой и контрольной группы (p<0,01). При этом показатели КГ во 2-ой и контрольной группе значимо различались (p<0,01; рис. 4).

     При сравнительном анализе было установлено, что показатель ФРР у больных 1 группы меньше, чем у больных 2-ой и контрольной группы (p<0,01). Кроме того выявлены достоверные различия по показателям ФРР между 2-ой и контрольной группой (p=0,03; рис. 5).

    Снижение показателя ФРР в 1 группе обусловлено более тонкой роговицей, о чем свидетельствует ранее выявленная нами корреляция ЦТР и ФРР (рис. 6).

    При проведении дисперсионного анализа установлено, что отягощенный анамнез по глаукоме наряду со стадией глаукомного процесса являлся независимым предиктором снижения показателей КГ и ФРР p<0,05 (табл. 12).

     Полученные нами данные свидетельствуют о том, что у больных сПОУГ склера характеризуется более выраженными нарушением свойств СТ корнеосклеральной оболочки, приводящим к изменению ее биометрических и биомеханических свойств, что согласуется с данными других авторов. (Кулешова О.Н., 2012; Quigley H.A., 2013).

    Фенотипические проявления патологии СТ были обнаружены у 78% больных 1 группы. Установлены достоверные различия по частоте встречаемости гиперэластичной кожи, гипермобильности суставов, пролапса митрального клапана между 1-й и 3-й группами (p<0,05). Кроме того выявлена достоверная разница по частоте встречаемости гипермобильности суставов и гиперэластичной кожи между 2-й и 3-й группами (p=0,03 и p=0,02 соответственно). Результаты сравнительного анализа указывают на то, что системные проявления патологии СТ более выражены у больных семейной и спорадической ПОУГ, чем в контрольной группе.

    По данным анамнеза средний возраст манифестации глаукомного процесса в 1-й группе составил 55,67±6,1 лет, что достоверно меньше, чем во 2-й группе – 61,23±5,4 лет (p=0,04). Ранняя манифестация глаукомного процесса, возможно, свидетельствует о том, что у больных сПОУГ механизмы гомеостаза менее стойки, что усиливает роль провоцирующих факторов способствующих развитию патологического процесса в более ранние сроки.

     При изучении влияния отягощенной наследственности на характер глаукомного процесса было установлено, что у больных 1-й группы в развитой стадии ПОУГ наблюдалось более существенное ухудшение морфометрических показателей: показатель Э/Д увеличился с 0,64±0,12 до 0,69±0,19; объем НРП уменьшился с 0,18±0,08 до 0,16±0,09 мм³ ; ТНВ уменьшилась с 0,13±0,05 до 0,12±0,09 мм. При исходном отсутствии достоверных различий в средних значениях морфометрических показателей через 12 месяцев наблюдения между 1-й и 2-й группами наблюдались достоверные различия (p<0,05; таблица 13). Исходно равные значения индекса MD у больных 1-й и 2-й групп в развитой стадии достоверно различались через 12 месяцев наблюдения (р=0,02). Так у больных 1-й группы индекс MD снизился с -7,62 до -9,78 дБ (-2,16 db±1,21 дБ). В то время как у больных 2 группы индекс MD снизился с -7,59 до -8,06 дБ, (-0,47±0,14 дБ). Сопоставляя полученные данные с критериями оценки динамики ПОУГ можно заключить, что глаукомный процесс у больных сПОУГ характеризуется как быстропрогрессирующий. Это подтверждается снижением показателя MD в среднем более чем на 2db за год наблюдения, в то время как у больных спПОУГ этот показатель снизился лишь на 0,47db. Полученные результаты исследования могут говорить о том, что данный факт напрямую связан с наследственным фактором. Была построена прогностическая модель оценки риска быстрого прогрессирования ПОУГ, в которую были включены клинические и демографические показатели, а также генетические маркеры. Установлено, что значимое негативное влияние на скорость прогрессирования ПОУГ оказывали возраст больных, III стадия ПОУГ, семейный анамнез по глаукоме, носительство аллеля с.2092А гена COL3A1 (таблица 14).

    Полученные результаты указывают на то, что носительство аллели А может быть независимым фактором риска быстропрогрессирующего характера течения глаукомного процесса. Кроме того, полученные результаты свидетельствует в пользу предложенной ранее концепции о существенной роли наследуемой патологии СТ в патогенезе ПОУГ (Журавлева А.Н., 2014). Выявленные особенности могут быть полезными при планировании лечебно-профилактических мероприятий.

Выводы

    1. Распространенность аллеля А (21%) полиморфного варианта с.2092G>A и аллеля С (23%) полиморфного варианта с.2244T>C у больных ПОУГ выше, чем в контрольной выборке (13% и 15% соответственно) из популяции жителей Москвы и Московской области (p=0,03 и p=0,05 соответственно).

    2. Полиморфизмы с.2092G>A и с.2244T>C гена COL3A1 ассоциированы с семейной ПОУГ. Аллель A и комбинация генотипов G/A+А/A полиморфизма с.2092G>A (ОШ=1,82; 95%ДИ, 1,08-3,07 и ОШ=1,94; 95%ДИ, 1,02-3,66, соответственно) и аллель С полиморфизма с.2244T>C (ОШ=1,84; 95%ДИ, 1,08-3,11) являются маркерами повышенного риска семейной ПОУГ. Полиморфизм с.104-101G>T гена COL1A1 не ассоциирован с ПОУГ в выборке пациентов из Москвы и Московской области.

    3. Впервые выявлено, что прогрессирующий характер течения ПОУГ ассоциирован с носительством аллеля А по маркеру с.2092G>A гена COL3A1 и семейным анамнезом по глаукоме.

    4. У больных ПОУГ с семейным анамнезом заболевания биометрические (ПЗО и ЦТР) и биомеханические (КГ и ФРР) показатели характеризуются: статистически значимым увеличением среднего значения длины ПЗО глаза и уменьшением значений ЦТР, КГ и ФРР (p<0,01) по сравнению с больными без семейного анамнеза.

    5. У больных семейной и спорадической ПОУГ чаще, чем в контрольной группе наблюдаются системные проявления патологии соединительной ткани. Это подтверждается достоверными различиями по частоте встречаемости гипермобильности суставов, гиперэластичной кожи и пролапса митрального клапана (p<0,05).

Практические рекомендации

    1. Генетическое тестирование на наличие полиморфизмов с.2092G>A и с.2244T>C гена COL3A1 может быть рекомендовано для использования в комплексе методов, ориентированных на преморбидную диагностику ПОУГ.

    2. Результаты исследования позволяют рекомендовать использование генетических тестов по маркерам с.2092G>A и с.2244T>C гена COL3A1 для прогнозирования характера течения ПОУГ.

    3. Учитывая большую распространенность патологии соединительной ткани у больных ПОУГ, в план обследования рекомендуется включать консультацию ревматолога. Наличие признаков нДСТ (варикозное расширение вен нижних конечностей, сколиоз) является одним из факторов, предрасполагающих к ПОУГ.

Список работ, опубликованных по теме диссертации

    1. Журавлева А.Н. Новый взгляд на роль соединительной ткани глаза в патогенезе первичной глаукомы / А.Н. Журавлева, О.А. Киселева, Ш.А. Халилов // IX Международная конференция: сб. трудов. – Москва, 2011. – С. 104-107.

    2. Киселева О.А. Наследственность – фактор риска или одно из звеньев в патогенезе первичной глаукомы? (обзор литературы) / О.А. Киселева А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Офтальмология. – 2011. – № 4. – С. 4-7.

    3. Киселева О.А. Роль мутаций и полиморфизмов в генах коллагена в изучении патогенеза первичной глаукомы / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // IV Российский общенациональный офтальмологический форум: сб. трудов. – Москва, 2011. – Т.1. – С. 266-269.

    4. Киселева О.А. Наследственный фактор в патогенезе первичной глаукомы / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Клиническая геронтология. – 2011. –Т.17, № 9-10. – С. 92.

    5. Киселева О.А. Молекулярно-генетические исследования в изучении патологии соединительной ткани глаза при первичной глаукоме / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Глаукома: теория и практика: сб. трудов. – Санкт-Петербург, 2012. – С. 128-129.

    6. Киселева О.А. Роль наследственного фактора в развитии патологии соединительной ткани глаза при первичной открытоугольной глаукоме / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Е.П. Кантаржи, Ш.А. Халилов // V Российский общенациональный офтальмологический форум: сб. трудов. – М., 2012. – Т.1. – С. 60-63.

    7. Ижевская В.Л. Полиморфизмы генов коллагена I и III типов и их связь с развитием ПОУГ / В.Л. Ижевская, О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Генетика. – 2013. – Т. 12, № 6. – С. 33-37.

    8. Кiseleva О.A. Association between scleral structure changes in primary open-angle glaucoma and genetic specifics of connective tissue constituent proteins / О. A. Кiseleva, А.N. Zhuravleva, Sh.A. Khalilov. // 5 th World Glaucoma congress. – Vancouver. – 2013. – Vol. 284. – P. 653-654.

    9. Киселева О.А. Ранняя диагностика глаукомы. Генетические подходы. / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Глаукома на рубеже веков: сб. трудов. – Москва, 2013. – С. 90 - 93.

    10. Киселева О.А. Изучение роли полиморфизмов в генах COL1A1 rs1800012, COL3A1 rs1800255, COL3A1 rs1801184 в развитии первичной открытоугольной глаукомы / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // VI Российский общенациональный офтальмологический форум: сб. трудов. – Москва, 2013. – Т.2. – С. 495-501.

    11. Киселева О.А. Ранняя диагностика глаукомы. Генетические подходы / О.А. Киселева, А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов // Всероссийский конгресс с международным участием «Глаукома на рубеже веков» сб. трудов. – Казань, 2013. – С. 90-93.

    12. Zhuravleva А.N. Association between scleral structure changes in primary open-angle glaucoma and genetic specifics of connective tissue constituent proteins / А.N. Zhuravleva, Sh.A. Khalilov. // 11 th European Glaucoma society. – Nice. – 2014. – P. 64.

    13. Журавлева А.Н. Изучение биометрических и биомеханических параметров глаза у больных семейной и спорадической первичной открытоугольной глаукомой / А.Н. Журавлева, Ш.А. Халилов, О.А. Киселева // X Съезд офтальмологов: сб. трудов. – Москва, 2015. – С. 83.

    14. Халилов Ш.А. Характер прогрессирования семейной и спорадической первичной открытоугольной глаукомы / Ш.А. Халилов, А.Н.Журавлева //Вестник РГМУ. – 2015.– С. 678.

Список сокращений


Список сокращений и условных обозначений
    ВГД - внутриглазное давление

    ДЗН - диск зрительного нерва

    ПОУГ - первичная открытоугольная глаукома

    сПОУГ - семейная первичная открытоугольная глаукома

    спПОУГ - спорадическая первичная открытоугольная глаукома

    ОШ - отношение шансов

    ДИ - доверительный интервал

    HRT - Гейдельбергская ретинальная лазерная томография

    MD - среднее отклонение светочувствительности сетчатки

    нДСТ - недифференцированная дисплазия соединительной ткани

    Э/Д - отношение диаметра экскавации к диаметру диска зрительного нерва

    vНРП - объем нейроретинального пояска

    ТНСВ - толщина слоя нервных волокон

    ЭДТА - этилендиаминтетраацетат

    КГ - корнеальный гистерезис

    ФРР - фактор резистентности роговицы

    СТ - соединительная ткань


Город: Москва – 2016
Темы: 14.01.07 – глазные болезни
Дата добавления: 01.12.2018 12:29:55, Дата изменения: 01.12.2018 12:29:55

Роговица III. Инновации  лазерной коррекции зрения и кератопластикиРоговица III. Инновации лазерной коррекции зрения и кератоп...

ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вместе против слепоты»ХVI Ежегодный конгресс Российского глаукомного общества «Вме...

Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и иммунодефицитные заболевания»Сессии в рамках III Всероссийского конгресса «Аутоимунные и ...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

«Живая» хирургия в рамках конференции  «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2018»«Живая» хирургия в рамках конференции «Современные технолог...

Сателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках XI Российского общенациональ...

Федоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2018 XV Всероссийская научно-практическ...

Актуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XIII Всероссийская научная...

Восток – Запад 2018  Международная конференция по офтальмологииВосток – Запад 2018 Международная конференция по офтальмологии

«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»«Живая хирургия» в рамках конференции «Белые ночи - 2018»

Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Международного офтальмологического конгресса Белые ночи - 2018 Сателлитные симпозиумы в рамках XXIV Между...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизонты -  2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Невские горизон...

Сателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКОСателлитные симпозиумы в рамках VIII ЕАКО

VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)VIII Евро-Азиатская конференция по офтальмохирургии (ЕАКО)

XVII Всероссийская школа офтальмологаXVII Всероссийская школа офтальмолога

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018»Сателлитные симпозиумы в рамках конференции «Современные тех...

Современные технологии лечения витреоретинальной патологии - 2018 ХVI Научно-практическая конференция с международным участиемСовременные технологии лечения витреоретинальной патологии -...

Роговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научно-практическая конференция с международным участиемРоговица II. Топография роговицы. Аберрации глаза 2018 Научн...

 ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества ХV Юбилейный конгресс Российского глаукомного общества

Сателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Российского глаукомного обществаСателлитные симпозиумы в рамках ХV Юбилейного конгресса Росс...

Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Сателлитные симпозиумы в рамках конференции Современные техн...

Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017Современные технологии катарактальной и рефракционной хирург...

«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологии катарактальной и рефракционной хирургии - 2017»«Живая хирургия» в рамках конференции «Современные технологи...

Эндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференцияЭндокринная офтальмопатия Научно-практическая конференция

Сателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенационального офтальмологического форумаСателлитные симпозиумы в рамках X Российского общенациональн...

Фемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всероссийская научно-практическая конференцияФемтосекундные технологии в офтальмологии Юбилейная всеросси...

Федоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практическая конференция с международным участиемФедоровские чтения - 2017 XIV Всероссийская научно-практичес...

Федоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XIV Всероссийской научно-практической конференцииФедоровские чтения - 2017 Сателлитные симпозиумы в рамках XI...

Актуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная конференция молодых ученыхАктуальные проблемы офтальмологии XII Всероссийская научная ...

Top.Mail.Ru


Open Archives