Медико-технологическая основа деятельности Глазного тканевого банка МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Федорова

    Вопрос о необходимости заготовки трупных роговиц в Московском НИИ микрохирургии глаза был поднят профессором В.Г. Копаевой в начале 1970-х годов прошлого века на основании результатов серьезных морфологических исследований донорского материала, доказавших нецелесообразность использования роговицы, сохраняемой по методу В.П. Филатова более 24 часов. Профессор З.И. Мороз поддержала идею организации Российской специализированной донорской службы. В 1980-е годы начались фундаментальные исследования жизнеспособности донорских роговиц и поиск эффективных способов консервации для сквозной кератопластики. Получили развитие методы иммунологической диагностики и фармакологической защиты реципиентов в группах риска [9–13, 17, 28]. В 1988 г., уже в МНТК «Микрохирургия глаза», академик С.Н. Федоров подписал приказ о создании Глазного тканевого банка, организатором и первым руководителем которого стал профессор С.А. Борзенок.

    Методологическая концепция Глазного тканевого банка

    В основу деятельности Глазного тканевого банка МНТК «Микрохирургия глаза» заложена научная концепция фармакологической защиты донорского материала, разработанная трансплантологами В.И. Шумаковым и Н.А. Онищенко [31]. При этом мероприятия по фармакологической защите сквозного трансплантата роговицы направлены на профилактику и коррекцию энергодефицитных состояний как в трупной донорской роговице, так и в организме реципиента. В рамках медицинских и ряда технологических воздействий сквозной трансплантат роговицы обеспечивается фармакологической защитой на всех подготовительных этапах – от забора и консервации изолированных трупных роговиц человека до метаболической коррекции реципиентов в посттрансплантационном периоде.

    Структура Глазного тканевого банка

    Медико-технологическая структура Глазного тканевого банка представлена двумя взаимосвязанными разделами: «ДОНОР» и «РЕЦИПИЕНТ» в нескольких уровнях.

    На первом уровне в разделе «ДОНОР» осуществляется скрининговая серологическая диагностика инфицированности роговиц доноров-трупов гемотрансмиссивными инфекциями.

    При этом, согласно действующим приказам Минздрава России, для выявления антител к ВИЧ в сыворотке крови человека, для выявления поверхностного антигена вируса гепатита В HbsAg и антител к вирусу гепатита С параллельно выполняются две методики иммуно-ферментного анализа (ИФА) для освидетельствования донорских тканей и органов – скрининговая и подтверждающая.

    Нельзя использовать роговицу в следующих случаях: если неизвестна причина смерти, при наличии у донора инфекционных заболеваний центральной нервной системы (системного склеротизирующего панэнцефалита, прогрессивной мультифокальной лейкоэнцефалопатии), при наличии у донора некоторых системных инфекций (СПИДа, вирусного гепатита, сифилиса, септицемии), при наличии лейкемии или диссеминированной лимфомы, при наличии заболеваний глаз (злокачественных образований, воспалений в активной стадии) и после перенесенных операций на глазах.

    На втором уровне в разделе «ДОНОР» осуществляются прогнозирование и отбор по критериям трансплантабельности жизнеспособного донорского материала. С целью определения жизнеспособности трупных роговиц по глубине энергодефицитного состояния применяется адреналиновая проба по методике С.А. Борзенка, основанная на скрининговом неинвазивном биологическом тестировании [1].

    Отобранный жизнеспособный трупный пересадочный материал далее подвергается холодовой консервации с последующей передачей в клинику для конкретного пациента, состоящего на Листе ожидания донорского материала в учреждении. Нежизнеспособный и нетрансплантабельный донорский материал используется для производства роговично-протезных комплексов и проведения экспериментальных исследований.

    На третьем уровне раздела «ДОНОР» производится холодовая консервация отобранного трупного материала в жидких питательных средах. При этом базисным является метод холодовой консервации при +6° С в отечественной культуральной среде (пропись Борзенка – Мороз), разрешенной Росздравнадзором к медицинскому применению на всей территории Российской Федерации. Метод холодовой консервации в среде Борзенка – Мороз позволяет сохранять донорские роговицы без потери жизнеспособности и снижения плотности клеток заднего эпителия роговицы до 6 суток и более [1].

    Перед выдачей трансплантационного материала в клинику из консервационной среды, в которой находилась роговица, производится забор проб для бактериологического исследования. Также производится определение плотности клеток заднего эпителия консервированных роговиц с помощью компьютеризированного кератоанализатора для Глазных тканевых банков или же рутинным способом с помощью светового микроскопа модели и окраски клеток заднего эпителия роговицы витальным красителем – трипановым синим [18, 30, 32].

    В отличие от системы европейских Глазных банков, в нашу медико-технологическую основу введен раздел «РЕЦИПИЕНТ».

    На первом уровне в разделе «РЕЦИПИЕНТ» применяется клинико-цитохимический метод определения ферментного статуса лимфоцитов периферической крови пациента по Р.П. Нарциссову [19] для выявления риска развития посттрансплантационных осложнений, связанных с метаболическими и иммунными нарушениями.

    На втором уровне в разделе «РЕЦИПИЕНТ» с помощью разработанных в Глазном тканевом банке математических алгоритмов и компьютерных программ производится прогнозирование биологического результата сквозной кератопластики у реципиентов группы риска. В случае необходимости выполняется индивидуальная метаболическая коррекция иммунного и ферментного статуса лимфоцитов перед кератопластикой, а также в послеоперационном периоде при возникновении иммунного конфликта. В связи с простотой в постановке и считывании результатов клинико-цитохимический метод по Нарциссову широко используется для мониторирования реципиентов группы риска по характеру приживления роговичных трансплантатов.

    Перед кератопластикой необходимо обратить внимание на некоторые данные клинического обследования реципиента, поскольку они могут ухудшать прогноз операции. К таковым относятся: аномалии век (блефарит, энтропия, эктропия, трихиаз), воспаление конъюнктивы. Они должны быть исправлены или пролечены до кератопластики. Осложняют прогноз операции дисфункция слезной пленки, выраженная васкуляризация стромы или истончение роговицы, отсутствие чувствительности роговой оболочки, некомпенсированная глаукома.

    На третьем уровне раздела «РЕЦИПИЕНТ» консервированные донорские роговицы с соответствующей сопроводительной документацией поступают в клинику в адрес конкретного пациента для выполнения кератопластики.