1.4 Основные направления подготовки донорского материала для кератопластики

    Выдающийся вклад в разработку проблемы пересадки роговицы и внедрение этой операции в клиническую практику внес В.П. Филатов [69, 70].

    В течение последней четверти ХХ века возможности офтальмохирургов в области пересадки роговицы значительно расширились благодаря совершенствованию микрохирургической техники, тщательному отбору донорского материала, внедрению новейших методов консервации донорской роговицы [22, 76, 11, 120]. Несмотря на это, часть операций до сих пор не приносит успеха не только в функциональном отношении, но и не дает биологического результата - трансплантат приживает непрозрачно, а иногда и вовсе происходит лизис донорской роговицы. В то же время расширение возможностей хирургии роговичной патологии привело к увеличению доли повторных пересадок роговицы в общей структуре кератопластик [41].

    Увеличившееся количество операций и не всегда благоприятный результат заставили ученых заняться исследованием особенностей проведения повторной кератопластики и особенностей подготовки донорского материала.

    До настоящего времени в нашей стране и за рубежом продолжают использовать роговичные трансплантаты обезвоженные над силикагелем. Простота метода, длительность сроков хранения, позволяющая накапливать трансплантационный материал, легкость транспортировки являются существенными достоинствами для использования такого материала в ургентной офтальмохирургии. Вместе с тем, обезвоженные трансплантаты лишены жизнедеятельности и, в первую очередь, слоя эндотелиальных клеток. Они выполняют лишь аллостатическую (каркасную) функцию и потому рассчитывать на их прозрачное приживление не приходится. Поэтому после регидратации этот материал может быть использован только для передней послойной кератопластики преимущественно не с оптической, а с лечебной, мелиоративно- тектонической целью. При угрозе или развитии перфорации роговицы в результате тяжелых и особо тяжелых ожогов глаз данные трансплантаты могут использоваться как биологическая повязка при васкуляризирующих операциях.

    Наиболее перспективным способом длительной (месяцы и годы) консервации роговиц для послойной и особенно сквозной кератопластики является низкотемпературное (-196° С) содержание их в жидком азоте с использованием различных криопротекторов.

    Так, замораживание роговиц с каймой склеры, помещенных в 10% раствор криопротектора полиэтиленоксида с молекулярной массой 400 дальтон, производится по двухэтапной программе со скоростью охлаждения на 1-м этапе 1-2 град/мин до начала кристаллизации и на 2-м этапе - 300-400 град/мин до -196° С. Такая программа способствует сохранению структурно-функциональных свойств ткани роговицы. Биологические и оптические результаты кератопластики, полученные при использовании консервированных таким образом трансплантатов, не уступают в ряде случаев свежеконсервированным. Поэтому криоконсервация обещает стать единственным методом консервации роговиц с неограниченным сроком хранения. Однако, дороговизна методики и возникающие повреждения (хотя и обратимые) эндотелиальных клеток, препятствуют широкому внедрению в клинику данного метода консервирования [154].

    Хотя уже в 1953-м году было показано, что критическая длительность консервации роговиц определяется сроком жизни эндотелиальных клеток, только в 1974 году биохимику Б. МакКери и офтальмологу Г. Кауфману [4, 5, 42] удалось создать среду, которая позволила надежно консервировать роговицу н а срок до 48 часов. При этом корнеосклеральный трансплантат помещали в среду для культуры клеток ТС-199, содержащую декстран с добавлением антибиотиков, и хранили при температуре 4° С. В настоящее время для краткосрочного культивирования используют и другие среды (Chondroitin Sulphate, K-Sol, Dexsol, Optisol, Eusol), позволившие увеличить максимальное время хранения до 10 дней, но они, в конечном счете, являются производными среды МакКери-Кауфмана. Надежным, но дорогостоящим методом, позволяющим сегодня сохранять роговицы до 35 дней, является хранение в среде для культуры органов в условиях термостата (t = 32-37° С), заполненного для создания буферных свойств среды 5% углекислым газом.

    Получение качественного донорского материала было и остается одной из кардинальных проблем в пересадке роговицы. Огромное значение имела разработанная в 1930-е годы академиком В.П.Филатовым методика консервации донорской трупной роговицы. Начиная с первых работ В.П.Филатова наша страна являлась признанным мировым лидером в разработке проблемы трансплантации роговицы [92, 113]. Школа академика Федорова C. Н. также внесла весомый вклад в мировую офтальмологию, доказав на практике и в фундаментальных исследованиях возможность широкого применения нативных донорских роговиц человека для сквозной кератопластики [64, 65, 66].

    В МНТК МГ разработан отечественный раствор для хранения роговицы ТУ №9398-013-29039336-2008 ( среда Борзенка-Мороз) для гипотермической консервации жизнеспособных трупных роговиц человека, обладающая высокими защитными свойствами, обеспечивающая стабилизацию клеточных мембран, сохранность макроэргических соединений и стабильность плотности эндотелиальных клеток в процессе холодового хранения [4]. Однако совершенствования методов подготовки донорского материала не решили до конца проблему рецидивов заболеваний роговицы. До сих пор остается актуальным вопрос об уменьшении количества повторных кератопластик в связи с рецидивом заболевания.