2.2. Клинико-функциональные методы исследования

    Объективному обследованию органа зрения всех пациентов предшествовал тщательный сбор анамнеза по поводу жалоб, течения, времени возникновения и динамики заболевания, а также наличия сопутствующих заболеваний, предшествующих офтальмологических вмешательств и травм глаз.

    Всем пациентам, вошедшим в данное исследование, проводили комплексное офтальмологическое обследование включающее: авторефрактометрию, визометрию без коррекции и с коррекцией, периметрию, тонометрию, тонографию, биомикроскопию, офтальмоскопию, ультразвуковую эхобиометрию и электрофизиологические исследования (определение порогов электрической чувствительности и электрической лабильности), конфокальную микроскопию.

    Следует отметить, что выполнение авторефрактометрии, бесконтактной тонометрии, офтальмоскопии и оптической когерентной томографии сетчатки было возможным в подавляющем большинстве случаев у больных с I стадией развития ДФ и в некоторых случаях II стадии. Выполнение вышеописанных методик было невозможным у больных с отеком роговицы и буллезными изменениями эпителия роговицы, наблюдаемыми при III и IV стадиях заболевания. Диагностика сопутствующих изменений глаза (индуцированная аметропия, заболевания сетчатки и зрительного нерва) по той же причине была невозможной и могла быть выявлена в послеоперационном периоде.

    Визометрия проводилась без коррекции и с максимальной очковой коррекцией на рефракционном комбайне фирмы «Rodenstock» (Германия) с использованием проектора оптотипов фирмы «Zeiss» (Германия). У части больных с выраженным отеком роговицы и возможными изменениями поверхности эпителия вид и сила коррекции при определении остроты зрения определялась опытным путем.

    Авторефрактометрию выполняли на аппарате RC-5000 фирмы «Tomey» (Япония) в естественных условиях, погрешность измерения прибора составляет ± 0,25дптр.

    Динамическую периметрию проводили на проекционном периметре АППЗ-01 (Россия) по общепринятой методике с использованием объектов белого цвета различной величины и яркости, в зависимости от исходной остроты зрения.

    Тонометрию выполняли на пневмотонометре фирмы «Topcon» (Япония) и контактным методом с помощью аппланационного тонометра Маклакова под местной анестезией раствором алкаина. При необходимости проводили тонографию.

    Тонографию выполняли при помощи компрессионного тонографа ТНС-100 (Россия) в течение 4 минут. Определялись основные гидродинамические показатели: истинное внутриглазное давление (Ро) в мм рт. ст.; коэффициент легкости оттока (С) в мм³ /мин/мм рт. ст.; минутный объем камерной влаги (F) мм³ /мин; коэффициент Беккера (КБ - Ро/С). Расчет тонографических показателей производился по общепринятой методике.

    Биомикроскопию переднего отрезка глаза проводили с использованием щелевой лампы модели SL-30 фирмы «Opton» (Германия). Первично оценивалось состояние ресниц, век, тарзальной и бульбарной конъюнктивы, переднего и заднего отрезка глаза. При осмотре век отмечалась гиперемия краев во всех случаях при наличии у больного роговичного синдрома. При осмотре роговицы отмечались признаки эндотелиальной дистрофии, наличие патологических гутт (от единичных до сливных) на эндотелии в срезе щелевой лампы и при ретролюминесценции, наличие симптома «битого металла» в виде неравномерности Десцеметовой мембраны с отливом бронзового цвета. Также в некоторых случаях отмечалось наличие дисперсии пигмента и преципитатов на поверхности эндотелия при cornea guttata.

    Оценивали состояние Десцеметовой мембраны, наличие складок и целостность. При отеке роговицы определяли его локализацию и степень выраженности, толщину роговицы в оптическом срезе щелевой лампы и вовлечение поверхностного эпителия роговицы (наличие неравномерности эпителия, буллезности). Оценивали глубину и равномерность передней камеры глаза, наличие спаек и гониосинехий и их протяженность. Изучали состояние радужной оболочки, формы, размера и целостности пигментной каймы зрачка, а так же наличие колобом. При наличии ИОЛ определяли ее положение, место и степень фиксации. При наличии нативного хрусталика оценивали степень его прозрачности с целью планирования проведения комбинированного вмешательства (ТДМ/ЗАПК + ФЭК + ИОЛ).

    Офтальмоскопию выполняли при достаточной прозрачности сред переднего отрезка глаза с помощью линзы «Max field» 90 дптр фирмы «Ocular Instruments» (США). Оценивали состояние диска зрительного нерва, цвет, границы, форму и глубину экскавации, состояние макулярной зоны, калибр и ход сосудов глазного дна, их световые рефлексы.

    Ультразвуковое А- и В-сканирование осуществляли на аппарате “SONOMED” (США). Измеряли следующие параметры: глубина передней камеры, толщина хрусталика, величина переднезадней оси глазного яблока. В ходе исследования исключали наличие гемофтальма, отслойки сетчатки и внутриглазных новообразований.

    Исследование толщины роговицы определяли при проведении Оптической когерентной томографии роговицы на приборе для бесконтактного исследования переднего отрезка глаза Visante OCT (Carl Zeiss, Германия) с длиной волны 1300 нм. Применяли панорамное сканирование переднего сегмента глаза размером 16 х 6 мм и сканирование роговицы в зоне разреза с высоким разрешением размером 10х3мм, частота сканирования 256 А-сканов в одном поперечном срезе, время получения одного снимка 0,125 сек. Метод ОКТ позволяет с высокой точностью исследовать анатомическое и структурное состояние тканей переднего отрезка глаза, адаптацию трансплантата, а также состояние зоны интерфейса донор – реципиент. Исследование выполняли бесконтактно и является безопасным, что особенно важно в случаях необходимости его проведения в раннем послеоперационном периоде. При проведении ОКТ оценивали следующие параметры: 1) равномерность и полнота прилегания трансплантата задних слоев роговицы донора к задней поверхности роговицы реципиента 2) выявление и подтверждение локальной или полной отслойки трансплантата 3) адаптация трансплантата в области внутренних краев основного тоннельного разреза 4) общая толщина роговицы реципиента 5) центральная толщина трансплантата задних слоев.

    Подсчет плотности эндотелиальных клеток и оценку динамики их количества проводили методом конфокальной микроскопии с помощью прибора Confoscan 4 (Nidek, Япония) со следующими параметрами: линза для исследования – 40х, NA 0,75, рабочая дистанция - 1,98 мм, исследуемая зона роговицы – 460 х 345 мкм, размеры получаемого изображения – 768 х 576 pixel, латеральное разрешение - 0,6 мкм/pixel, скорость сканирования – 25 снимков в секунду. При исследовании использовали функцию автоматического и мануального подсчета плотности эндотелиальных клеток. Обследование проводили после однократной инстилляции местного анестетика через иммерсионный гель (препарат «Солкосерил»).

    Фотосъёмку глаз пациентов осуществляли при помощи фотощелевой лампы TOPCON DC-1 (Япония).

    Все результаты клинико-функциональных исследований заносили в сводные таблицы программы Excel пакета Microsoft Office 2010. Статистическая обработка полученных результатов исследования осуществлялась с использованием программ Microsoft Excel 2010 и Statistica 6.0. Результаты представлены в виде М ± SD, где М – среднее значение; SD – стандартное отклонение. Исследование уровня достоверности различий средних значений изучаемых данных в группах сравнения выполнялось с помощью t-критерия Стьюдента. Во всех случаях коэффициент достоверности р < 0,05 считался статистически значимым.