2.3 Сравнительный анализ различных методов оперативного вмешательства, используемых в лечении эндофтальмитов, методика эксперимента in vivo на интактных глазах

     Целью исследования стала оценка безопасности для сетчатки различных способов хирургического лечения эндофтальмита по выявлению ее структурно-функциональных изменений в послеоперационном периоде.

    При возникновении эндофтальмита токсическое воздействие бактерий на сетчатку и зрительный нерв неизбежно. Отличить данное токсическое влияние от повреждений, возникающих вследствие операционной травмы, и воздействия лекарственных препаратов в ходе лечения достаточно сложно.

    Поэтому исследование безопасности различных методов лечения эндофтальмита проводили на изначально интактных глазах кроликов.

    Экспериментальное исследование проведено на 28 кроликах породы шиншилла, возрастом 3,5–4,5 месяца, массой 3–4 кг. В начале эксперимента и в ходе его проведения (на 3, 7, 14-е сутки после операции) всем кроликам были проведены исследования: B-сканирование для выявления возможных осложнений (гемофтальм, отслойка сетчатки), ОСТ заднего отрезка с измерением толщины сетчатки в зоне лучистости и на средней периферии, лазерная тиндалеметрия (FCM) для анализа уровня потока белка и количества клеток в передней камере, электроретинография.

    Анестезия заключалась во в/м инъекциях 0,2 мл 0,1% раствора Атропина, 1мг/1мл раствора Феназепама и масочном наркозе Севофлюраном 2,0 об% + О 2 1,5 л в минуту. Дополнительно во время операции вводили в субтеноново пространство 1,0–1,5 мл 2% раствора лидокаина.

    В соответствии с дальнейшим хирургическим лечением все кролики были разделены на 4 группы:

    I группу составили 7 кроликов (7 глаз), которым выполняли витрэктомию с замещением СТ 1,0–1,5 мл перфтордекалина (Dk-line, Bausch + Lomb), с добавлением в конце операции 1 мг ванкомицина в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида.

    II группу – 7 кроликов (7 глаз), которым выполняли витрэктомию с интравитреальным введением 1 мг ванкомицина в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида.

    III группу – 7 кроликов (7 глаз), которым выполняли интравитреальное введение 1 мг ванкомицина в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида.

    IV группу – 7 кроликов (7 глаз), которым выполняли витрэктомию с замещением СТ 1 мл СМ (Oxane 5700, Bausch + Lomb), тампонаду проводили в среде: физиологический раствор – воздух – СМ.

    Дизайн исследования представлен в Таблице 5.

    Сроки наблюдения в послеоперационном периоде – 3, 7, 14-е сутки после операции. На 14-е сутки все кролики были выведены из эксперимента и проведено морфологическое исследование сетчатки энуклеированных глаз в зоне лучистости и на средней периферии.

    2.3.1 Техника выполнения операций (интравитреальное введение АБ препаратов, витрэктомия)

    Кроликам III группы (сравнения) выполняли интравитреальное введение АБ препаратов. Для этого предварительно были заготовлены растворы АБ препаратов с соответствующей концентрацией.

    Интравитреальное введение антибиотиков выполнялось под общим наркозом для снижения риска интраоперационных осложнений, а также для создания одинаковых условий анестезиологического пособия у кроликов всех групп. Перед интраокулярным введением препаратов всем кроликам III группы выполняли роговичный парацентез с выпусканием влаги передней камеры (0,15–0,2 мл) для профилактики офтальмогипертензии. Далее в 3 мм от лимба выполняли инъекцию 1 мг ванкомицина иглой 30G. Срез иглы был направлен вверх, в противоположную сторону от макулы. Введение 0,1 мл раствора ванкомицина проводили очень медленно, не менее 1,5-2 мин. Далее проверяли офтальмотонус, при гипертензии дополнительно выпускали жидкость из передней камеры. Далее вводили раствор цефтазидима по такой же методике.

    Кроликам I и II группы интравитреальное введение комбинации АБ проводили аналогично на завершающем этапе витрэктомии.

    Кроликам I, II и IV групп была выполнена витрэктомия по стандартной трехпортовой методике на комбайне Accurus (Alcon, США) с использованием клапанных портов 25G.

    Технически выполнение витрэктомии у кроликов мало чем отличалось от техники хирургии у человека. Е динственное существенное отличие – маленький объем витреальной полости при достаточно большом хрусталике, поэтому периферию СТ удалить было достаточно сложно. В конце операции на все склеротомические отверстия наложены узловые швы 8- 00 из полигликоида. Отличие в группах заключалось в дополнительном интравитреальном введении веществ в конце операции.

    Кроликам I группы в конце операции выполнено в ведение в витреальную полость 1–1,5 мл ПФОС и интравитреальное введение 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл физиологического раствора.

    Кроликам II группы после выполнения витрэктомии выполнено интравитреальное введение 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл физиологического раствора.

    Кроликам IV группы после выполнения витрэктомии проводили тампонаду витреальной полости воздухом с последующим замещением на СМ.

    В конце операции всем кроликам выполняли инстилляции 0,3% раствора антибиотика ципрофлоксацина и субконъюнктивальную инъекцию 20 мг гентамицина в 0,5 мл физиологического раствора и 0,5 мл 0,1% раствора дексаметазона. В послеоперационном периоде все кролики получали одинаковое лечение – инстилляции комбинированного препарата ципрофлоксацина и дексаметазона 4 раза в день. Интраоперационных осложнений не было.