2.5. Исследование биосовместимости различных моделей опорной пластины кератопротеза в эксперименте in vivo на экспериментальных животных

    Материалом для исследования in vivo послужили кролики породы Шиншилла (n=15). Исследования проводили в экспериментальной лаборатории Калужского филиала ФГАУ «НМИЦ «МНТК «Микрохирургия глаза» им. акад. С.Н. Фёдорова» Минздрава России. Для проведения экспериментов в соответствии с дизайном имплантируемых материалов, были сформированы 3 группы исследования. Первую составили 5 кроликов (5 глаз), в роговицу которых имплантировали ОПК из гидрофобного акрила со сквозными квадратными отверстиями размерами 200х200 мкм (модель №1). Во вторую группу вошли 5 кроликов (5 глаз), в роговицу которых имплантировали ОПК из гидрофобного акрила со сквозными отверстиями трапециевидной формы и изменяющейся величины от периферии к центру с размерами ячеек от 170х130 мкм до 180х70 мкм (модель №2). Животным контрольной группы имплантировали ½ части ОПК модели Федорова-Зуева, выполненную из титана.

    При моделировании эксперимента на животных учитывали факт наличия у кроликов тонких роговиц (от 350 мкм в центральной области и до 400 мкм на периферии), что предопределяло техническую сложность хирургического вмешательства, связанную с высоким риском перфорации роговицы. С учетом биоэтических норм и правил гуманного обращения с животными, операции проводили под общей анестезией (наркоз севараном).

    После обработки операционного поля и установки векорасширителя, производили несквозной разрез в прозрачной части роговицы кролика протяженностью 5 мм на 2/3 глубины концентрично лимбу и отступая от него на 1-1,5 мм. Металлическим расслаивателем формировали карман в центральной зоне роговицы диаметром 4 мм, что соответствовало диаметру ОПК. Опорные пластины имплантировали в сформированное роговичное ложе, на разрез накладывали узловые швы (нейлон 10-0) с последующим введением под конъюнктиву растворов антибиотика (гентамицин 0,3 мл) и стероида (дексаметазон 0,4 мл). Операцию завершали частичной блефарорафией единичным швом (викрил 6-0). В послеоперационном периоде проводили терапию в виде инстилляций в конъюнктивальную полость растворов антибиотика (моксифлоксацин 0,5%) и стероида (дексаметазон 0,1%) 2 раза в день в течение 7 дней.

    В каждой группе экспериментальных животных наблюдали с выполнением биомикроскопии и оптической когерентной томографии (ОКТ) роговицы (Optovue, США) в сроки 1, 3, 7, 14, 30 и 90 сутки. При изучении структурных особенностей роговицы после операции регистрировали следующие параметры: глубина и равномерность залегания ОПК, наличие протрузии или экструзии, глубина формирования интрастромального кармана, толщина роговицы в проекции ОПК и вне её.

    На сроке 3 месяца животных выводили из эксперимента под внутривенным наркозом (этаминалом натрия в дозе 50 мг/кг) методом воздушной эмболии через ушную артерию, производили энуклеацию глаза, с дальнейшим промыванием его физиологическим раствором. Выкроенные корнеосклеральные диски помещали в 10% раствор забуференного нейтрального формалина (pH 7,4) на срок 24 часа, для дальнейшего проведения морфологических исследований.