3.1. Особенности клиники лазериндуцированного кросслинкинга при эксимерлазерной абляции роговицы с рибофлавином в экспериментах in vivo

     Для объективной оценки разницы заживления в раннем послеоперационном периоде все экспериментальные животные (32 кролика) были разделены на следующие группы:

    Группа 1.1 – 16 глаз 16 кроликов после трансФРК на глубину 100 мкм без и с предварительным насыщением стромы раствором рибофлавина:

    - подгруппа 1.1А – 8 глаз 8 кроликов после трансФРК с предварительным насыщением рибофлавином;

    - подгруппа 1.1Б – 8 глаз 8 кроликов после трансФРК без насыщения рибофлавином;

    Группа 1.2 – 16 глаз 16 кроликов после трансФРК на глубину 50 мкм без и с предварительным насыщением стромы раствором рибоф лавина:

    - подгруппа 1.2А – 8 глаз 8 кроликов после трансФРК с предварительным насыщением рибофлавином;

    - подгруппа 1.2Б – 8 глаз 8 кроликов после трансФРК без насыщения рибофлавином.

     Клиническое течение послеоперационного периода при абляции на глубину 100 мкм (при осмотре животных из группы 1.1):

    - на 1-е сутки после абляции средняя оценка глаз, на которых была осуществлена эксимерлазерная абляция с рибофлавином, составила 12 ± 1,1 баллов; в то время, как средний балл глаз, на которых абляция проводилась без предварительного насыщения стромы рибофлавином, равнялся 12,3 ± 0,5. В обоих вариантах наблюдались сильное слезотечение, умеренная светобоязнь, умеренное отделяемое. Эрозия эпителия составляла не менее 3 /4 зоны абляции. Эпителий рыхлый, несостоятельный. Наблюдалась отечность стромы роговицы. Однако при абляции с предварительным насыщением стромы роговицы раствором рибофлавина отмечалась равномерная по все й окружности зоны абляции эпителизация. На глазах без предварительного насыщения стромы роговицы рибофлавином чаще всего эпителизация была неравномерной, очаговой с хаотичным расположением эпителия по всей зоне абляции;

    - на 3-и сутки средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составил 6,7 ± 1,4; в то время, как средний балл глаз после абляции без рибофлавина был равен 9,8 ± 4,6 баллов. При осмотре слезотечение на глазах после абляции с рибофлавином было слабым, светобоязнь практически отсутствовала. На глазах после абляции без рибофлавина сохранялись умеренное слезотечение, небольшое количество отделяемого, слабая светобоязнь. В обоих вариантах отмечена равномерная краевая эпителизация по всей зоне абляции. Эрозия эпителия составляла не менее 1/2 зоны абляции. Сохранялась отечность стромы роговицы;

    - на 7-е сутки после абляции в обоих случаях не наблюдались светобоязнь и слезотечение, отделяемого также не было. Средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составлял 4,3 ± 3,9 баллов, на глазах после абляции без рибофлавина – 7,5 ± 2,6 баллов соответственно. В обоих вариантах отмечена равномерная краевая эпителизация по всей зоне абляции. Эрозия эпителия составляла не менее 1/2 зоны абляции. Сохранялась отечность стромы роговицы. При окрашивании роговицы раствором флюоресцеина глаз после абляции без предварительного насыщения стромы раствором рибофлавина в центральной зоне наблюдался выраженный дефект эпителия (Рисунок 10);

    - на 14-е сутки после абляции средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составил 3,2 ± 1,9 баллов и 6,3 ± 2,6 баллов – после абляции без рибофлавина. Слезотечения и светобоязни не выявлено. Наблюдалось небольшое количество отделяемого на глазах после абляции без рибофлавина. В обоих вариантах сохранялась неполная эпителизация роговицы, с выраженным дефектом эпителия не менее ⅓ -¼ зоны абляции в центральной оптической зоне. Эпителий рыхлый, поверхность ровная, слегка утолщен в срезе. При окрашивании флюоресцеином наблюдалось 4-5 точек прокрашивания;

    - на 21-е сутки после абляции средний балл оценки клинического состояния роговицы глаз после абляции с рибофлавином составил 3,8 ± 1,0 баллов; глаза после абляции без рибофлавина – 6,3 ± 3,3 баллов. Слезотечения и светобоязни не выявлено в обоих вариантах, сохранялась неполная эпителизация роговицы, с выраженным дефектом эпителия не менее ¼ зоны абляции в центральной оптической зоне. Эпителий рыхлый, поверхность ровная, слегка утолщен в срезе. При окрашивании раствором флюоресцеина сохранялись небольшие зоны прокрашивания в центральной оптической зоне на глазах после абляции с рибофлавином. На глазах после абляции без рибофлавина, помимо дефекта эпителия в центральной оптической зоне, окрашивались 3-4 участка в параоптической зоне, на периферии зоны абляции. При осмотре сохранялась выраженная отечность стромы роговицы, равная площади абляции (Рисунок 11).

     Уже на ранних сроках послеоперационного периода полученные клинические данные позволили судить о проведённом избыточном объеме абляции в группе 1.1, что привело к возникновению ответной асептической воспалительно-регенераторной реакции, выраженной в появлении множественных «хейзов», неполной эпителизации, устойчивом помутнении стромы роговицы на обоих глазах, а также сохранявшегося дефекта эпителия в центральной оптической зоне роговицы.

    Клиническое течение послеоперационного периода при абляции на глубину 50 мкм (при осмотре животных из группы 1.2):

    - на 1-е сутки после абляции средняя оценка глаз после абляции с рибофлавином составила 12,6 ± 0,5 баллов, в то время как средний балл глаз после абляции без рибофлавина был 12,7 ± 0,5. В обоих вариантах наблюдались сильное слезотечение, умеренная светобоязнь, умеренное отделяемое, выраженная отечность стромы. Эрозия эпителия составляла не менее ¾ зоны абляции. Эпителий рыхлый, несостоятельный. Эпителизация равномерная, по всей окружности зоны абляции (Рисунок 12); трансФРК на глубину по центру 50 мкм с рибофлавином (I) и без рибофлавина (II)

    - на 3-и сутки после абляции при оценке клинических данных, полученных при осмотре животных, средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составил 6,2 ± 0,5; в то время, как средний балл глаз после абляции без рибофлавина был равен 6,4 ± 0,6 баллов. При осмотре слезотечение на глазах после абляции с рибофлавином было слабым, светобоязнь практически отсутствовала. На глазах после абляции без рибофлавина сохранялись умеренное слезотечение, небольшое количество отделяемого, слабая светобоязнь. В обоих вариантах отмечена равномерная эпителизация по всей зоне абляции. На глазах после абляции без рибофлавина отмечалась небольшая эрозия эпителия в центральной зоне абляции. Сохранялась небольшая отечность стромы роговицы ( Рисунок 13);

    - на 7-е сутки после абляции средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составлял 1,7 ± 0,5 баллов, на глазах после абляции без рибофлавина – 1,7 ± 0,5 баллов. В обоих вариантах не наблюдались светобоязнь и слезотечение, отделяемого не было. Отмечена равномерная краевая эпителизация по всей зоне абляции. Эрозия эпителия составляла не более 1/5 зоны абляции. Сохранялась небольшая отечность стромы роговицы. При окрашивании роговицы раствором флюоресцеина на глазах после абляции без рибофлавина в центральной части зоны абляции наблюдался незначительный точечный дефект эпителия;

    - на 14-е сутки после абляции средний балл на глазах после абляции с рибофлавином составил 1,7 ± 0,5 баллов и 2,0 ± 0,1 баллов – на глазах после абляции без рибофлавина соответственно. Слезотечения и светобоязни не выявлено. Наблюдалось незначительное количество отделяемого на глазах после абляции без рибофлавина. В обоих вариантах отмечена полная эпителизация роговицы. Эпителий рыхлый, поверхность ровная, слегка утолщен в срезе;

    - на 21-е сутки после абляции средний балл оценки клинического состояния роговицы глаз после абляции с рибофлавином составил 1,3 ± 0,5 баллов; глаз после абляции без рибофлавина – 1,7 ± 0,5 баллов. Слезотечения и светобоязни не выявлено в обоих вариантах. Эпителизация роговицы полная, неравномерная в случае глаз после абляции без рибофлавина. При окрашивании раствором флюоресцеина прокрашивания в оптической и параоптической зонах не выявлено.

     Отмечено, что на протяжении всего периода наблюдений, при обоих вариантах глубины абляции диагностирована разница в выраженности воспалительных и регенераторных процессов. Так, на глазах после абляции с рибофлавином все вышеперечисленные реакции проходили заметно менее выраженно, о чем свидетельствуют среднебалльные оценки всех экспериментальных животных из обеих групп, что не может не свидетельствовать о фотопротекто рных свойствах рибофлавина (Таблица 33, Рисунки 14 и 15).

    Таким образом, на основании полученных в ходе эксперимента данных, можно сделать вывод о том, что наличие предварительного насыщения стромы роговицы 0,25% изотоническим раствором рибофлавина в ходе эксимерлазерной фоторефракционной абляции оказывает фотопротекторный эффект, который характеризуется снижением среднебалльной оценки клинического состояния глаз экспериментальных животных, а также слабовыраженной ответной асептической воспалительно-регенераторной реакцией.