Рисунок 8 – Рост культур в чашках групп I, где культивирование проведено с раствором BSS без антибиотика А – эксперимент № 1; Б – эксперимент № 2
Рисунок 9 – Отсутствие роста колоний в чашках групп II, где культивирование проведено с растворами антибиотиков А – эксперимент № 1; Б – эксперимент № 2
Наиболее интенсивный рост колоний прослеживался в чашках групп I экспериментов № 1 и 2, где культивирование проводили с раствором BSS без антибиотика (Рисунок 8). В эксперименте № 1 наблюдался интенсивный рост колоний как на МПА, так и на поверхности BSS. В эксперименте № 2 наблюдался самый интенсивный рост, сплошным газоном.
В чашках групп II, где культивирование проведено с растворами антибиотиков, обнаружено полное отсутствие роста колоний в обоих экспериментах (Рисунок 9).
В чашках групп III, где культивирование проведено с добавлением перфтордекалина, зафиксирован умеренный рост колоний S. epidermidis (Рисунок 10).
Рисунок 10 – Умеренный рост колоний S. epidermidis в чашках групп III, где культивирование проведено с добавлением ПФОС А – эксперимент № 1; Б – эксперимент № 2
Рисунок 11 – Умеренный рост колоний S. epidermidis в чашках контрольных групп, где проведено культивирование без добавления дополнительных веществ А – эксперимент № 1; Б – эксперимент № 2
В чашках групп IV обоих экспериментов, где культивирование проводилось с добавлением перфтордекалина и локальным нанесением растворов АБ препаратов, получено изолированное отсутствие роста колоний в месте нанесения антибиотиков (Рисунок 12).
В чашках группы IV в эксперименте № 2 также прослеживался более интенсивный рост колоний в отлич ие от эксперимента № 1. Учитывая локальное отсутствие роста колоний именно в месте нанесения растворов антибиотиков, было решено продолжить экспериментальную работу с данной группой. Далее проведено перемешивание ПФОС с растворами АБ препаратов путем аккур атного покачивания всех чашек групп IV обоих экспериментов и дальнейшее культивирование в термостате при температуре 37 °C в течение 24 часов. Через 24 часа получено подавление роста колоний во всех чашках групп IV. В эксперименте № 1 выявлена 1 чашка с двумя колониями, в эксперименте № 2 – 1 чашка с двумя колониями и 1 чашка с тремя колониями (Рисунок 13).
3.1.2 Количественный анализ роста колоний S. epidermidis
Рисунок 12 – Чашка IV группы, изолированное отсутствие роста колоний в местах нанесения растворов антибиотиков А – эксперимент № 1; Б – эксперимент № 2
Рисунок 13 – Единичные колонии в чашке группы IV после перемешивания перфтордекалина и растворов антибиотиков и дополнительного культивирования еще 24 часа, эксперимент № 2
Во всех чашках групп II полностью отсутствовал рост колоний S. epidermidis. Поэтому дальнейшую статистическую обработку данных этой группы не проводили, учитывая очевидное отличие от других групп.
Количественные результаты роста колоний в чашках групп контроля, I, III, IV экспериментов № 1 и 2 отражены в Таблицах 8, 9.
Таблица 8 – Количественная оценка роста колоний S. epidermidis, эксперимент № 1, количество колоний Мe (Q 25% ; Q 75% ), n=120
Таблица 9 – Количественная оценка роста колоний S. epidermidis, эксперимент № 2, количество колоний Мe (Q 25% ; Q 75% ), n=120
После перемешивания перфтордекалина и растворов антибиотиков в чашках групп IV и дополнительного культивирования еще в течение 24 часов обнаружены единичные колонии: в эксперименте № 1 – 1 чашка с двумя колониями, в эксперименте № 2 – 1 чашка с двумя колониями и 1 чашка с тремя колониями. При сравнении данных групп с группами II не выявлено статистически значимого отличия между группами (в эксперименте № 1 p=0,333, в эксперименте № 2 p=0,16).
Таким образом, в ходе экспериментальной работы in vitro было определено, что водно-солевой раствор BSS, применяемый в офтальмологии в качестве ирригационной жидкости, является дополнительной питательной средой для S. epidermidis. Установлено, что растворы АБ препаратов не растворялись в перфтордекалине, а образовывали смесь. Без перемешивания антибиотики действовали локально, при перемешивании бактерицидное и бактериостатическое действие АБ препаратов в смеси с ПФОС не уменьшалось.
Также в ходе экспериментальной работы in vitro подтверждено, что комбинация 1 мг ванкомицина в 0,1 мл физиологического раствора и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл физиологического раствора подавляет рост и размножение S. epidermidis с концентрацией клеточной взвеси, более чем в 10000 раз превышающей минимально необходимую для развития эндофтальмита.
