3.1 Результаты исследования влияния смеси ПФОС с растворами АБ препаратов на рост микроорганизмов in vitro

    3.1.1 Качественный анализ роста колоний S. epidermidis

     После 24-часового культивирования получены идентичные результаты в одинаковых группах экспериментов № 1 и 2 (концентрация бактериальной взвеси в эксперименте № 1 соответствовала 5 Ед стандарта мутности, в эксперименте № 2 – 10 Ед). Отличие было лишь в том, что в эксперименте № 2 в чашках прослеживался более интенсивный рост колоний в сравнении с чашками этих же групп эксперимента № 1.

    Наиболее интенсивный рост колоний прослеживался в чашках групп I экспериментов № 1 и 2, где культивирование проводили с раствором BSS без антибиотика (Рисунок 8). В эксперименте № 1 наблюдался интенсивный рост колоний как на МПА, так и на поверхности BSS. В эксперименте № 2 наблюдался самый интенсивный рост, сплошным газоном.

    В чашках групп II, где культивирование проведено с растворами антибиотиков, обнаружено полное отсутствие роста колоний в обоих экспериментах (Рисунок 9).

    В чашках групп III, где культивирование проведено с добавлением перфтордекалина, зафиксирован умеренный рост колоний S. epidermidis (Рисунок 10).

     Во всех чашках III группы эксперимента № 2 наблюдался более интенсивный рост, чем в чашках III группы эксперимента № 1. Интенсивность роста колоний в чашках групп III обоих экспериментов была сопоставима с контрольными группами (Рисунок 10, 11). Данная динамика прослеживалась как в эксперименте № 1, так и № 2 с такой же закономерностью более интенсивного роста в эксперименте № 2.

    В чашках групп IV обоих экспериментов, где культивирование проводилось с добавлением перфтордекалина и локальным нанесением растворов АБ препаратов, получено изолированное отсутствие роста колоний в месте нанесения антибиотиков (Рисунок 12).

    В чашках группы IV в эксперименте № 2 также прослеживался более интенсивный рост колоний в отлич ие от эксперимента № 1. Учитывая локальное отсутствие роста колоний именно в месте нанесения растворов антибиотиков, было решено продолжить экспериментальную работу с данной группой. Далее проведено перемешивание ПФОС с растворами АБ препаратов путем аккур атного покачивания всех чашек групп IV обоих экспериментов и дальнейшее культивирование в термостате при температуре 37 °C в течение 24 часов. Через 24 часа получено подавление роста колоний во всех чашках групп IV. В эксперименте № 1 выявлена 1 чашка с двумя колониями, в эксперименте № 2 – 1 чашка с двумя колониями и 1 чашка с тремя колониями (Рисунок 13).

    3.1.2 Количественный анализ роста колоний S. epidermidis

     Для количественной оценки результатов эксперимента проведен подсчет количества выросших колоний во всех экспериментальных чашках. В чашках групп I в обоих экспериментах наблюдался рост S. epidermidis сплошным газоном, поэтому количество колоний оценено по площади роста колоний на питательной среде и средней площади одной колонии.

    Во всех чашках групп II полностью отсутствовал рост колоний S. epidermidis. Поэтому дальнейшую статистическую обработку данных этой группы не проводили, учитывая очевидное отличие от других групп.

    Количественные результаты роста колоний в чашках групп контроля, I, III, IV экспериментов № 1 и 2 отражены в Таблицах 8, 9.

     В ходе экспериментов № 1 и 2 получено статистически значимое отличие в количестве колоний между группами I, III, IV (p<0,0001). При сравнении количества колоний данных групп с контролем выявлены статистически значимые различия между группами I и IV (p<0,0001). При сравнении групп III с контролем статистически значимых различий не выявлено, в эксперименте № 1 p=0,286, в эксперименте № 2 p=0,859.

    После перемешивания перфтордекалина и растворов антибиотиков в чашках групп IV и дополнительного культивирования еще в течение 24 часов обнаружены единичные колонии: в эксперименте № 1 – 1 чашка с двумя колониями, в эксперименте № 2 – 1 чашка с двумя колониями и 1 чашка с тремя колониями. При сравнении данных групп с группами II не выявлено статистически значимого отличия между группами (в эксперименте № 1 p=0,333, в эксперименте № 2 p=0,16).

    Таким образом, в ходе экспериментальной работы in vitro было определено, что водно-солевой раствор BSS, применяемый в офтальмологии в качестве ирригационной жидкости, является дополнительной питательной средой для S. epidermidis. Установлено, что растворы АБ препаратов не растворялись в перфтордекалине, а образовывали смесь. Без перемешивания антибиотики действовали локально, при перемешивании бактерицидное и бактериостатическое действие АБ препаратов в смеси с ПФОС не уменьшалось.

    Также в ходе экспериментальной работы in vitro подтверждено, что комбинация 1 мг ванкомицина в 0,1 мл физиологического раствора и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл физиологического раствора подавляет рост и размножение S. epidermidis с концентрацией клеточной взвеси, более чем в 10000 раз превышающей минимально необходимую для развития эндофтальмита.