Рисунок 14 – Хранение и транспортировка забранного материала А – пробирка с транспортной средой Amies Б – нанесение интраокулярной жидкости на тампон из вискозы В – тампон из вискозы помещают в пробирку со средой Amies
Рисунок 15 – Посев материала на КА в лаборатории Чебоксарского филиала МНТК «Микрохирургия глаза»
Учитывая затраты времени на транспортировку материала, а также режим работы бактериологической лаборатории, посев выполнен только лишь на следующий день, через 16–18 часов после операции.
В лаборатории Чебоксарского филиале МНТК «Микрохирургия глаза» было выполнено микробиологическое исследование оставшейся интраокулярной жидкости (0,1 мл), Исследуемый материал был нанесен на поверхность кровяного агара (КА) (наиболее универсальной среды) (Рисунок 15).
Далее проводили культивирование в термостате при температуре 37 °С в течение 24 часов с предварительным анализом роста первичной культуры через 16 часов после посева.
Через 16 часов культивирования все чашки с посевами, выполненные в Чебоксарском филиале МНТК «Микрохирургия глаза», были транспортированы в термосумке в бактериологическую лабораторию ГКБ № 1 для анализа первичного роста культур и дальнейшей идентификации. После забора материала из передней камеры приступали к биопсии СТ кроликов, у которых лечение предполагало выполнение витрэктомии. Учитывая выраженную воспалительную реакцию в передней камере и нарушение прозрачности оптических сред, всем кроликам предварительно проводили промывание передней камеры с удалением фибрина для улучшения визуализации оптических сред и возможности безопасного забора материала (Рисунок 16).
Рисунок 16 – Глаз кролика с эндофтальмитом А – перед хирургическим лечением; Б – после промывания передней камеры и удаления фибрина
Рисунок 17 – Методика создания аспирационного потока при биопсии А – аспирационная линия витректора соединена со шприцем; Б – создание аспирационного потока в шприц
Аспирационная линия витректора подключалась к шприцу, на витреальной машине отключали аспирационный поток, количество резов выставляли равным 5000 для уменьшения вероятности тракций сетчатки. В витреальную полость вводили осветитель и витреотом («окошком» вверх) до визуализации в проекции зрачка. С помощью педали хирург включал резы витреотома, ассистент, оттягивая поршень шприца, создавал аспирационный поток и забирал 0,2–0,3 мл интравитреального содержимого (Рисунок 17).
Бактериологическое исследование биопсии СТ проводили аналогично исследованию содержимого передней камеры. Половину полученного ранее материала помещали на тампоны из вискозы и транспортировали в бактериологическую лабораторию в пробирках со средой Amies с углем.
Остальную часть забранного материала культивировали сразу после операции на чашки Петри с КА, с дальнейшей транспортировкой проб через 16 часов в бактериологическую лабораторию.
Таким образом, унифицирован алгоритм проведения бактериологического исследования, заключающийся в заборе материала из передней камеры с помощью шприца 30G и из полости СТ с помощью витреотома, транспортировке забранного материала в специальной пробирке с угольной средой Amies, а также в особенностях бактериологического исследования (посев половины забранного материала на КА непосредственно после операции). Соблюдение данного алгоритма позволило сократить сроки от момента забора материала до получения результатов и снизить вероятность ложноотрицательных результатов.
