3.2. Разработка технологии заготовки ультратонкого трансплантата для задней автоматизированной послойной кератопластики с помощью последовательного применения механического микрокератома и эксимерного лазера

     Целью исследования было создание технологии формирования ультратонкого донорского трансплантата для ЗПК методом последовательного применения механического микрокератома и эксимерного лазера. Для этого необходимо разработать алгоритм заготовки трансплантата и параметры эксимерного лазера и провести анализ качества поверхности полученных роговичных лоскутов.

    3.2.1 Новая технология заготовки трансплантата методом последовательного применения механического микрокератома и эксимерного лазера

    Первый этап заготовки трансплантата для эксимерлазерной задней автоматизированной послойной кератопластики (Э-ЗАПК) был выполнен в условиях Глазного тканевого банка МНТК «Микрохирургия глаза». Выкраивание было выполнено при помощи мирокератома Moria LSK-One (Франция) и набора сменных головок калибра 300 и 400 мкм.

    Предварительно заготовленный в Глазном банке и содержащийся в растворе для хранения роговицы производства ООО «Научно-экспериментальное производство Микрохирургия глаза» (Россия, ТУ 9393-013-29039336-2007, регистрационное удостоверение № ФСР2010106650) донорский корнео-склеральный диск монтировали в ИПК (Moria, Франция), внутри которой методом ирригации сбалансированного солевого раствора создали давление 90 мм вод. ст. Провели ОКТ пахиметрию (Optovue, США), далее выполнили срез головкой 300 или 400 мкм (рис. 13). После повторного ОКТ сканирования, трансплантат поместили во флакон с раствором для хранения роговицы производства ООО «Научно-экспериментальное производство Микрохирургия глаза» (Россия, ТУ 9393-013-29039336-2007, регистрационное удостоверение № ФСР2010106650) и транспортировали в операционную, оборудованную эксимерным лазером (время транспортировки не превышало 15 мин.). Трансплантат вновь монтировали в ИПК (Barron, США) и выполнили фотоабляцию.

    Альтернативой было выполнение первого среза головкой 300 или 400 мкм с помощью мирокератома Moria Evolution 2 LSK-2, смонтированном в непосредственной близости от эксимерного лазера, и последующая фотоабляция трансплантата без его демонтажа из ИПК (Moria, Франция) и транспортировки. Такого рода подход был применен в Чебоксарском филиале МНТК «Микрохирургия глаза».

     Фотоабляцию провели в режиме «простая ФТК» с учетом данных ОКТ пахиметрии с применением следующих настроек: диаметр оптической зоны 9.0 мм, диаметр зоны абляции 10.9 мм, глубина абляции в центральной зоне регламентируется количеством «паков», в отличие от фемто-лазерных систем.

    Скорость испарения стромы роговицы составляет около 3 мкм в сек. Абляция проводится под визуальным контролем и может быть остановлена в любой момент при подъеме стопы с педали управления лазером, что делает процедуру максимально безопасной с точки зрения перфорации трансплантата (рис. 15).

    Роговично-склеральное кольцо, содержащее истонченную до нужной толщины строму и ДМ с эндотелием, помещали во флакон с раствором для хранения роговицы производства ООО «Научно-экспериментальное производство Микрохирургия глаза» (Россия, ТУ 9393-013-29039336-2007, регистрационное удостоверение № ФСР2010106650). Трансплантат высекали непосредственно перед трансплантацией вакуумным трепаном диаметра 8 мм (Barron, США).

    3.2.2 Атомно-силовая микроскопия поверхности роговичного лоскута

     В первой группе (рис. 16), где трансплантат был сформирован с применением эксимерного лазера, значение среднеквадратичной шероховатости поверхности (RMS) составило 33,9±10,3 мкм. Во второй группе (рис. 17), где глубокий роговичный лоскут был выкроен с помощью микрокератома Moria LSKOne, значение RMS составило 28,5±15,6 мкм. Статистический анализ не выявил достоверных различий между значениями исследуемого параметра в указанных группах (p>0,05). Данные представлены в таблице 31.

    Таким образом, разработанный метод заготовки ультратонкого трансплантата для ЗАПК (патент № 2629211 от 06.10.2016), заключающийся в последовательном применении механического микрокератома и эксимерного лазера в режиме «простая ФТК», позволяет испарить заднюю строму донорской роговицы и сформировать лентикулу с ровной поверхностью, соответствующей по шероховатости поверхности, полученной с помощью механического микрокератома (p_m-u>0,05).