3.3. Исследование физико-химических показателей и основных функциональных свойств консервационной среды собственной рецептуры

     В основу консервирующего раствора (Борзенка-Мороз), применяемого в России, положены принципы, разработанные С.А. Борзенком [3]. Как известно, консервирующие составы должны пролонгировать не только метаболизм клеток роговицы, но и осмотическую резистентность, поддерживать онкотическое равновесие клеток и стромы роговицы, препятствуя их отеку (за счет декстрана 40000), должны иметь достаточную буферную емкость для длительного поддержания рН в пределах 7,35-7,45 (HEPES-буфер).

    3.3.1 Исследование физико-химических показателей консервационной среды собственной рецептуры

     Согласно результатам ранее выполненных исследований [3], водянистая влага передней камеры глаза человека по основным физико-химическим параметрам (общая осмолярность и водородный показатель –pH), практически сопоставима с плазмой крови и ликвором и соответствует таковым в среде Борзенка-Мороз (табл. 9 и 10). И так как состав предложенной нами среды с дегидратирующими свойствами (опытная группа) имеет увеличенную концентрацию декстрана-40 по сравнению с известным составом среды Борзенка-Мороз (контрольная группа), нами проведены физико-химические исследования общей осмолярности (эффективной концентрации растворенных веществ в растворе) и водородного показателя, определяющих стабильность среды, выживаемость клеток эндотелия и прозрачность стромы донорской роговицы (табл. 11 и 12).

    Предложенная среда с дегидратирующими свойствами имеет схожий pH со средой Борзенка-Мороз, при этом показатель осмолярности статистически выше, чем в указанной среде, что обусловлено большим содержанием онкотических компонентов, чем и объясняется дегидратирующая способность предложенного раствора. При этом важно отметить, что несмотря на повышение значений осмолярность предложенного раствора входила в рамки референсных значений осмолярности влаги передней камеры.

    3.3.2 Исследование функциональных свойств консервационной среды собственной рецептуры

     По результатам пахиметрии и аналитического взвешивания донорских роговиц опытной и контрольной группы были определены оптимальные параметры и сроки дегидратации: уменьшение толщины на 19% в опытной группе на 1-е сутки консервации с постепенным увеличением и достижением номинальной величины (масса 0,195±0,015 г; толщина 648±35 мкм) к 3-м суткам, в контрольной группе гидратация наблюдалась с первых суток консервации. Пахиметрическая оценка с использованием оптического когерентного томографа на всех сроках наблюдения в опытной и контрольной группах показана на рисунке 2.

    Для оценки динамики изменения массы в обеих группах исходные значения были приняты за 100% и соответствовали номинальному значению 0,195±0,015г.

     Выявлена корреляция между массой (Рис.3) и толщиной исследуемых роговиц (Рис.4; Табл.13) в процессе консервации. Определена степень дегидратации в первые двое суток в опытной группе и гидратацией в контрольной уже с первых суток консервации. Кроме того, было выявлено, что, начиная с 3-х суток гидратация в опытной группе достигала номинальных значений с тенденцией к увеличению, поэтому дальнейшее наблюдение стало нецелесообразным. Также стоит отметить, что исследуемые показатели в опытной группе были достоверно ниже по сравнению с контрольной группой на протяжении всего периода наблюдения.

    Таким образом, с помощью физико-химических исследований был обоснован состав, а также технология получения собственной рецептуры среды для дегидратации и гипотермической консервации донорских роговиц; было показано, что разработанная в данном исследовании опытная консервационная среда обеспечивает более выраженную дегидратацию роговицы по сравнению с базисной консервационной средой, используемой в контрольной группе.