3.3. Результаты исследования влияния разработанных гелевых окрашенных имплантатов на ткани глаза экспериментального животного

    Исследования проходили в следующих направлениях: изучали биомикроскопически воздействие разработанных гелеобразных окрашенных имплантатов на структуры переднего отрезка глаза экспериментального животного, а также проводили световую микроскопию роговиц кролика с введенными образцами путем оценки равномерности роговичного канала, интенсивности пигмента и компактности его укладки, а также реактивность тканей на присутствие образов.

    3.3.1. Результаты биомикроскопического исследования

    Биомикроскопически у всех кроликов опытных групп в ранние сроки наблюдения (первые 7 суток) отмечали умеренную поверхностную инъекцию сосудов конъюнктивы и наличие незначительного отека роговицы в зоне операционного доступа, что оценивалось как ответная реакция ткани на хирургическую травму. Она постепенно исчезала к 7-м суткам после операции. В группе 1 отмечено наличие гиперемии сосудов в течение 21 суток.

    На 14 сутки в этой же группе наблюдалась локальная отечность и полупрозрачное помутнение роговицы в проекции роговичного разреза (табл. 6).

    В опытных группах визуализировали роговицу без признаков воспалительной реакции, окрашенные имплантаты сохраняли правильное положение в роговичном туннеле. На остальном протяжении роговица сохраняла интактность, видимых дефектов передних и задних отделах стромы не наблюдали. В контрольной группе роговицы сохраняли свою прозрачность.

    3.3.2. Результаты световой микроскопии

    При сводной оценке результатов эксперимента путем проведения световой микроскопии различия между экспериментальными группами можно было разделить на несколько признаков:

    1) Канал (его равномерность, линейность, прерывистость)

    2) Краска (интенсивность пигмента, компактность укладки, распыление и инфильтрация стромы)

    3) Реактивность тканей на присутствие краски.

    1. Гелевый окрашенный имплантат на основе гиалуроната натрия с органическим пигментом (12 недель)

    Глубоко в задних слоях стромы роговицы определяется наличие коричневого пигмента. Канал залегания краски преимущественно линейный, прерывается тонкими перемычками со сглаживанием края канала по типу близкорасположенных мелких ячеек, пигмент красителя компактен, пропитывание прилегающей зоны стромы пигментом не наблюдается, по краю канала легкое уплотнение волокон стромы, нельзя исключить инкапсуляцию пигмента. Задний эпителий роговицы (эндотелий) – без особенностей.
    Обращает на себя внимание неравномерность толщины роговицы и волнистость переднего профиля на обзорном снимке с возможным нарушением стратификации слоев в этой зоне в отличие от линейности канала с краской и заднего профиля. Складчатость гистологического препарата носит артифициальный характер, которая не влияет на истинный результат эксперимента.

    2. Гелевый окрашенный имплантат на основе гидролизата коллагена с неорганическим пигментом (12 недель)

    В средних слоях стромы роговицы определяется наличие зеленокоричневого пигмента. Канал залегания краски линейный короткий, практически не прерывается, пигмент красителя преимущественно компактный, пропитывание прилегающей зоны не обнаружено. Общий вид стромы роговицы без признаков отека и без нарушения стратификации слоев.

    Задний эпителий роговицы (эндотелий) – без особенностей.

    3. Гелевый окрашенный имплантат на основе метилцеллюлозы с органическим пигментом (12 недель)

    В задних слоях стромы роговицы определяется наличие коричневого пигмента. Канал залегания краски линейный, не прерывается, пигмент красителя преимущественно рыхлый, пропитывание прилегающей зоны стромы пигментом по типу легкого «флёра». Общий вид стромы роговицы без признаков отека и без нарушения стратификации слоев. Задний эпителий роговицы (эндотелий) – без особенностей.

    Структура канала прослеживается во всех случаях, что свидетельствует о сохранении местоположения краски в первоначальной локации после введения.

    Линейность канала сохранена во всех случаях, что позволяет предположить статичность положения краски в строме в этих случаях, что косвенно подтверждает возможность управления процессом пигментирования стромы (выбор заданной глубины залегания, расчет количества вводимого вещества).
    Прерывистость канала – можно отнести к условно неблагоприятным результатам. Этот признак необходимо сопоставлять с клинической картиной равномерности пигментации или депигментации стромы, чтобы определить уровень демаскировки.

    Длительность пребывания имплантата в строме роговицы на протяжении 12 недель сопровождалась в экспериментальных группах следующими эффектами:

    Во всех группах наблюдали сохранение первоначальной интенсивности краски, что сопоставимо с наблюдениями в эксперименте in vivo.

    Была выявлена компактность укладки – признак, который может свидетельствовать о конденсации образца с течением времени. Возможными причинами могли служить следующие факторы:

    - потеря жидкой составляющей самого образца;

    - постепенно нарастающий и проходящий отек стромы роговицы, сдавливающий зону пигментации;

    - аспетическое воспаление, различной степени выраженности, приведшее к отграничению образца от окружающей стромы

    Явной инфильтрации окружающих тканей красками выявлено не было ни в одной группе, минимальная инфильтрация косвенно свидетельствовала об отсутствии воспалительных и фибробластических процессов в зоне ее введения.

    Явных токсических проявлений действия изучаемых образцов на ткани глаза не выявлено ни одном экспериментальном случае.

    Таким образом, экспериментальное-морфологическое исследование in vivo гелевых окрашенных имплантатов, изготовленных из различных материалов, показало, что при максимальном сроке наблюдения (до 3 месяцев) не было отмечено случаев атипичной реакции. По данным световой микроскопии установлено, что в большинстве случаев пребывание разработанных имплантатов в роговице кролика в изученные сроки не вызывало видимых структурных изменений слоев роговицы, сохранялось равномерное распределение волокон стромы и компактность укладки гелевого окрашенного имплантата. Выраженной инфильтрации окружающих тканей пигментом и токсических проявлений действия изучаемых образцов на ткани глаза не было выявлено ни в одной группе. Распыление пигмента с легким «флёром» наблюдали в случае образца № 3 на основе метилцеллюлозы и органического пигмента, что сопоставимо с результатом исследования на глазах экспериментального животного, где биомикроскопически на 2 из 5 глазах зафиксировано неравномерное распределение цвета (рис. 23).

    Образец 2 на основе гидролизата коллагена и неорганического пигмента показал себя оптимальным по состоянию канала и отсутствию инфильтрации краской окружающей стромы, следовательно, перспективны дальнейшие доклинические исследования данного внутрироговичного окрашенного имплантата.