4.2. Результаты электронно-микроскопического исследования ультраструктуры стромы роговиц после проведения эксимерлазерной абляции без и с предварительным насыщением рибофлавином

     Проведенные электронно-микроскопические исследования показали, что на светооптическом уровне роговицы глаз экспериментальных животных с полной эпителизацией и сохранением исходной морфологии плоского многослойного неороговевающего эпителия, с практически полным восстановлением стратификации слоев. В случае образцов после абляции с предварительным насыщением стромы раствором рибофлавина наблюдались единичные вакуоли в клетках базального слоя и появление псевдомногорядности (Рисунок 22).

    Строма представлена укладкой правильно ориентированных коллагеновых волокон без признаков отека, с умеренным количеством кератоцитов. В передних слоях роговицы в случаях после абляции с рибофлавином выявлен волнообразный ход стромальных волокон.

    Во всех случаях наблюдается субэпителиальная фиброплазия различной степени выраженности.

    Все выявленные морфологические особенности могут соответствовать исходу изменений, вызванных лазерным воздействием.

     Роговицы кроликов из группы 4.2 (без предварительного насыщения стромы раствором рибофлавина) во всех случаях с полной эпителизацией, с сохранением исходной морфологии – плоского многослойного неороговевающего эпителия, с полным восстановлением стратификации слоев (Рисунок 23).

    Строма представлена укладкой правильно ориентированных коллагеновых волокон без признаков отека, с умеренным количеством кератоцитов. Волнообразного хода стромальных волокон не обнаружено. Субэпителиальная фиброплазия отсутствует.

    По данным световой микроскопии наблюдается полное восстановление структуры роговицы после лазерного воздействия.

     По данным трансмиссионной электронной микроскопии, в опытной группе 4.1 (с насыщением стромы рибофлавином) в передних слоях стромы (прилежащих к зоне абляции) роговицы выявлено укрупнение волокон и пучков коллагена. На Рисунке 24А видно слияние (стрелка) новообразованного пучка коллагена (НПК) вблизи активно синтезирующего кератобласта (Кб) с предсуществующим пучком (ППК). На рисунке 24Б представлены два варианта слияния пучков: бок в бок (ББ) и конец в бок (КБ).

    В группе 4.2 (без насыщения рибофлавином) в строме роговицы ход коллагеновых волокон не изменен, визуализируются параллельные пучки с равномерной толщиной и однородной структурой (Рисунок 25).

    На Рисунке 26А на поперечном срезе пучков коллагена определяется компактность упаковки волокон за счет увеличения поперечных сшивок (стрелки) в группе 4.1. В группе 4.2 поперечные сшивки не обнаружены (Рисунок 26Б). В сравнении расстояние между фибриллами в группе 4.1 меньше, чем в группе 4.2, концентрация на единицу площади – примерно в два раза больше.

    Таким образом, по результатам комплексной морфологической оценки установлено, что роговицы опытной группы 4.1 с насыщением стромы рибофлавином была подвержена изменениям, соответствующим крослинкингу стромы с формированием стабильных поперечных сшивок коллагеновых волокон. В роговицах без насыщения стромы рибофлавином морфологически выявлено полное восстановление структуры после лазерного воздействия без признаков кросслинкинга стромы.