Рисунок 21 – Сетчатка глаза кролика III группы через 14 суток. Зона средней периферии. Отсутствие изменений в структуре сетчатки. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофото. × 200
Рисунок 22 – Сетчатка глаза кролика II группы через 14 суток. Зона лучистости. Небольшой отек сетчатки. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофото. × 400
4.2.1 Результаты инструментальных исследований
Сравнительный анализ различных методов оперативного вмешательства в четырех группах (I группа – витрэктомия с замещением СТ ПФОС и интравитреальным введением в конце операции 1 мг ванкомицина и 2,25 мг цефтазидима, II – витрэктомия с интравитреальным введением 1 мг ванкомицина и 2,25 мг цефтазидима, III – интравитреальное введение 1 мг ванкомицина и 2,25 мг цефтазидима, IV – витрэктомия с замещением СТ СМ) проводили на основании результатов инструментальных и морфологических исследований.
На 3-е сутки после операции воспалительные осложнения не выявлены ни в одной группе. При биомикроскопии у 3 кроликов III группы (42,86%) наблюдалось субконъюнктивальное кровоизлияние, у остальных 4 животных (57,14%) глаза были абсолютно спокойны. У всех кроликов I, II и IV групп, где выполнялась витрэктомия, наблюдалась сосудистая инъекция и хемоз конъюнктивы в местах операционного доступа, швов. Признаков воспаления в передней камере не выявлено ни в одной группе. При офтальмоскопии во всех группах визуализировалась нормальная сетчатка без структурных изменений. У кроликов I группы определялась граница уровня перфтордекалина сверху, у кроликов IV группы граница пузыря СМ в нижнем квадранте.
На 7-е сутки при биомикроскопии выявлена конъюнктивальная инъекция в местах операционного доступа у кроликов I, III и IV групп. Признаков воспаления в передней камере не обнаружено ни в одной группе. При офтальмоскопии во всех группах визуализировалась нормальная сетчатка без структурных изменений.
Следующим периодом наблюдения были 14-е сутки после операции. При биомикроскопии и офтальмоскопии особенностей, как и в предыдущие осмотры, не было выявлено.
При проведении ультразвукового исследования во всех группах подтверждалось отсутствие послеоперационных осложнений, таких как отслойка сетчатки, отслойка сосудистой оболочки, гемофтальм и др. Данные инструментальных исследований соответствовали данным биомикроскопии и офтальмоскопии.
4.2.1.1 Лазерная тиндалеметрия
Рисунок 23 – Сетчатка кролика I группы через 14 суток. Зона лучистости. Отек слоя нервных волокон и слоя ганлиозных клеток. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофото. × 400
Рисунок 24 – Сетчатка глаза кролика IV группы через 14 суток. Зона периферии.
По данным FCM в послеоперационном периоде прослеживалась динамика повышения потока белка в передней камере и количества клеток во всех группах к 3-м суткам.
В I группе повышение медианного значения от исходного по потоку белка составило 3,85 ф/мс, по количеству клеток в 0,5 мм³ – 1,6 (p=0,018), во II – 3,85 и 3,2 (p=0,018), в III – 3,25 (p=0,018) и 1,2 (p=0,028), в IV – 4,45(p=0,018) и 1,2 (p=0,018) соответственно. Статистически значимого отличия в повышении показателей FCM между группами на 3-и сутки не обнаружено. При сравнении потока белка в передней камере достоверность отличия между группами: I и II (p=0,85), I и III (p=0,12), I и IV (p=0,89), II и III (p=0,2), II и IV (p =0,61), III и IV (p=0,15). При сравнении количества клеток в 0,5 мм³ достоверность отличия между группами: I и II (p=0,85), I и III (p=0,12), I и IV (p=0,95), II и III (p=0,2), II и IV (p =0,6), III и IV (p=0,12).
К 7-м суткам после операции прослеживалась динамика снижения воспалительной реакции: поток белка уменьшился в I группе на 1,4 ф/мс (p=0,043), количества клеток – на 0,2 (p=0,018), во II группе данные показатели снизились на 1,5 (p=0,043) и 0,1 (p=0,028), в III группе – на 1,2 (p=0,018) и 0,18 (p=0,043), в IV – на 1 (p=0,018) и 0,1 (p=0,028) соответственно. Статистически значимого отличия в показателях FCM между группами на 7-е сутки не обнаружено. При сравнении потока белка в передней камеры достоверность отличия между группами: I и II (p=0,65), I и III (p=0,1), I и IV (p=0,85), II и III (p=0,25), II и IV (p =0,44), III и IV (p=0,11). При сравнении количества клеток в 0,5 мм³ достоверность отличия между группами: I и II (p=0,14), I и III (p=0,2), I и IV (p=0,33), II и III (p=0,95), II и IV (p =0,75), III и IV (p=0,79).
К 14-м суткам прослеживалось дальнейшее снижение воспалительной реакции. Поток белка уменьшился в I группе на 1,7 ф/мс (p=0,018), количества клеток – на 0,2 (p=0,018), во II группе данные показатели снизились на 0,3 (p=0,018) и 0,2 (p=0,028), в III группе – на 0,5 (p=0,018) и 0,1 (p=0,018), в IV – на 1,5 (p=0,018) и 0,2 (p=0,018) соответственно. Статистически значимого отличия в показателях FCM между группами на 14-е сутки не обнаружено. При сравнении потока белка в передней камере достоверность отличия между группами: I и II (p=1,0), I и III (p=0,2), I и IV (p=0,7), II и III (p=0,18), II и IV (p =0,7), III и IV (p=0,14). При сравнении количества клеток в 0,5 мм³ достоверность отличия между группами: I и II (p=0,16), I и III (p=0,3), I и IV (p=0,24), II и III (p=0,89), II и IV (p =0,95), III и IV (p=1,0).
4.2.1.2 Оптическая когерентная томография
Таблица 11 – Данные FCM кроликов в группах I–IV на 3, 7, 14-е сутки после операции
Таблица 12 – Толщина сетчатки по данным ОСТ кроликов I–IV групп на 3, 7, 14-е сутки после операции
Статистически значимого отличия в толщине сетчатки между группами не обнаружено. При сравнении толщины сетчатки на 3-е сутки в зоне лучистости достоверность отличия между группами: I и II (p=0,9), I и III (p=0,9), I и IV (p=0,85), II и III (p=0,75), II и IV (p =0,7), III и IV (p=0,95); на периферии: I и II (p=0,9), I и III (p=0,65), I и IV (p=0,18), II и III (p=0,56), II и IV (p =0,28), III и IV (p=0,85). При сравнении толщины сетчатки на 7-е сутки в зоне лучистости достоверность отличия между группами: I и II (p=0,95), I и III (p=0,4), I и IV (p=0,7), II и III (p=0,3), II и IV (p =0,5), III и IV (p=0,75); на периферии: I и II (p=0,4), I и III (p=0,9), I и IV (p=0,37), II и III (p=0,48), II и IV (p =0,9), III и IV (p=0,44). При сравнении толщины сетчатки на 14-е сутки в зоне лучистости достоверность отличия между группами: I и II (p=0,4), I и III (p=0,65), I и IV (p=0,75), II и III (p=0,25), II и IV (p =0,25), III и IV (p=1,0); на периферии: I и II (p=0,16), I и III (p=0,6), I и IV (p=0,3), II и III (p=0,6), II и IV (p =0,8), III и IV (p=0,8).
4.2.1.3 Электроретинография
При анализе полученных результатов данных ЭРГ на 3-е сутки после операции прослеживалась общая динамика снижения практически всех показателей, в основном за счет снижения амплитуды и латентности волны B во всех группах (Таблица 13).
К 7-м суткам после операции наблюдалось улучшение всех показателей во всех группах. В I группе значения приближались к норме, статистически значимой разницы между полученными данными и контролем не было (p>0,05). В группах, где выполнялась витрэктомия, ЭРГ оставалась сниженной в основном за счет сниженных показателей амплитуды и латентности волны В (p>0,01). Функциональное состояние сетчатки глаз кроликов I группы улучшилось за счет повышения показателей палочковой ЭРГ: латентности волны А (p=0,028), амплитуды волны В (p=0,018); максимальной ЭРГ: амплитуды и латентности волны В (p=0,018); колбочковой ЭРГ: амплитуды и латентности волны В (p=0,018). Функциональное состояние сетчатки глаз кроликов II группы улучшилось за счет повышения показателей палочковой ЭРГ: амплитуды (p=0,028) и латентности (p=0,018) волны А, амплитуды и латентности волны В (p=0,018); максимальной ЭРГ: амплитуды волны А (p=0,028), амплитуды и латентности волны В (p=0,018); колбочковой ЭРГ: амплитуды и латентности волны В (p=0,018). Функциональное состояние сетчатки глаз кроликов III группы улучшилось за счет повышения показателей палочковой ЭРГ: амплитуды волны А (p=0,018), амплитуды и латентности волны В (p=0,018); максимальной ЭРГ: амплитуды волны А (p=0,028), амплитуды и латентности волны В (p=0,018); колбочковой ЭРГ: амплитуды волны В (p=0,018). Функциональное состояние сетчатки глаз кроликов IV группы улучшилось за счет повышения показателей палочковой ЭРГ: латентности волны А (p=0,018), амплитуды В (p=0,018); максимальной ЭРГ: амплитуды и латентности волны А (p=0,018), амплитуды и латентности волны В (p=0,018); колбочковой ЭРГ: амплитуды и латентности волны В (p= 0,028) (Таблица 14).
К 14-м суткам значимых изменений в ЭРГ не происходило, показатели во всех группах приближались к нормальным значениям. Статистически значимой разницы между III группой и контролем по всем показателем ЭРГ не выявлено (p>0,05). В I группе выявлены сниженные показатели: амплитуда волны А палочковой ЭРГ (p=0,002), амплитуда (p=0,0016) и латентность (p=0,0017) волны В палочковой ЭРГ, амплитуда волны В максимальной ЭРГ (p=0,0021), амплитуда (p=0,0017) и латентность (p=0,004) волны В колбочковой ЭРГ. Во II группе: амплитуда волны В палочковой ЭРГ (p=0,0045), амплитуды волны В максимальной ЭРГ (p=0,0021). В IV группе оставались сниженные показатели ЭРГ: амплитуда волны А палочковой ЭРГ (p=0,0025), амплитуда (p=0,0016) и латентность (p=0,0017) волны В палочковой ЭРГ, амплитуда волны В максимальной ЭРГ (p=0,0021), амплитуда (p=0,0017) и латентность (p=0,0031) волны В колбочковой ЭРГ (Таблица 15).
Таблица 13 – Данные ЭРГ кроликов I (n=7), II (n=7), III (n=7), IV (n=7) групп на 3-е сутки после операции
Таблица 14 – Данные ЭРГ кроликов I (n=7), II (n=7), III (n=7), IV (n=7) групп на 7-е сутки после операции
Сниженными оставались показатели ЭРГ в группах, где выполнялась витрэктомия в любых комбинациях, за счет сниженных показателей амплитуды и латентности волны В.
4.2.2 Результаты морфологического исследования сетчатки
Через 14 суток после операции все кролики выведены из эксперимента, проведено морфологическое исследование сетчатки оперированных глаз.
У кроликов I группы не обнаружено выраженных структурных изменений сетчатки при морфологическом исследовании в зоне лучистости и на средней периферии. Хорошо визуализировались все ее слои: слой фоторецепторных клеток, наружный ядерный слой, наружный сетчатый слой, внутренний ядерный слой, слой нервных волокон, ганглионарный слой (Рисунок 21). В некоторых образцах определяется слабовыраженный отек слоя нервных волокон.
Более выраженные морфологические изменения были выявлены в образцах сетчатки глаз кроликов I, II и IV групп, где выполнялась витрэктомия.
Структурные изменения нервной ткани имели аналогичный характер и одинаковую степень выраженности. В частности, был выявлен более выраженный отёк слоя нервных волокон и слоя ганглионарных клеток в сравнении с группой III (Рисунок 22, 23, 24).
Стрелками указаны гидропические изменения элементов наружного и внутреннего сетчатого слоя. Окраска гематоксилином и эозином. Микрофото. × 400 Клетки пигментного слоя сетчатки были частично фрагментированы, местами наблюдались деструкция и распад отдельных клеточных элементов.
Слой фоторецепторных клеток был сохранен, однако общее их количество было снижено по сравнению с группой III. Хориокапилляры сосудистой оболочки в большинстве своем были расширены, полнокровны. Наблюдались гидропические изменения элементов внутреннего сетчатого слоя. Данные изменения были обнаружены во всех группах, где выполнялась витрэктомия, независимо от вида тампонирующего вещества.
Таким образом, функциональные и структурные изменения сетчатки, возникающие при витрэктомии с тампонадой ПФОС до 14 суток с интравитреальным введением 1 мг ванкомицина в 0,1 мл 0,9% раствора натрия хлорида и 2,25 мг цефтазидима в 0,1 мл 0,9% раствора натрия, были сопоставимы с изменениями при витрэктомии совместно с интравитреальным введением комбинации АБ препаратов и при витрэктомии с тампонадой витреальной полости СМ (p=0,002).
