Выводы

    1. Методом механоактивации в шаровой планетарной мельнице при температуре не более 60 ° С и величине подведенной удельной энергии менее 15 кДж/г в течение 60 минут получена нанодисперсная плацента человека, имеющая ультрадисперсную структуру с размерами зерна вещества 40-100 нм. При этом установлено, что в результате механоактивации химический состав плаценты не изменялся, а нанодисперсная плацента приобретала новые биофизические свойства: повышенную гидрофильность, проницаемость и биодоступность, а также способность усиливать пролиферацию при минимальных объёмах введения.

    2. В опытах на экспериментальных животных разработан клинический алгоритм применения нанодисперсной плаценты как в виде биоимплантата на основе фрагмента сосуда пуповины, так и в виде суспензии через иглу с минимальным диаметром 29 G, что позволяло значительно уменьшить объём введения донорского материала, травматичность техники имплантации и длительно сохранить максимально выраженные биологические эффекты in vivo.

    3. Показано, что оптимальный объём введения нанодисперсной плаценты соответствовал количеству 5 мг сухого вещества. При указанном объёме введения нанодисперсной плаценты вызывались значительные биологические эффекты в зоне имплантации в виде умеренного макрофагально-клеточного ответа и активации фибробластических и эндотелиобластических реакций в соединительнотканных структурах глаза реципиента.

    4. Показано, что нанодисперсная плацента с агломератами размером 2-10 мкм стимулирует клеточный ответ соединительнотканных структурах глаза реципиента, повышает макрофагальную активность и является пусковым механизмом индуцирования регенеративных процессов: коллагеногенеза, ангиогенеза и неоваскуляризации в зоне имплантации и на значительном удалении от неё (до 400 мкм и более). Диффузия нанодисперсной плаценты к 7-м суткам после имплантации вызывает регенеративный фибробластический процесс в интактной склере в виде коллагеногенеза на ⅔ глубины склеры с последующим ремоделированием в течение 90 суток.

    5. На основании полученных результатов экспериментальных исследований разработана методика оценки степени зрелости коллагенового волокна как маркёра репаративной активности соединительной ткани с учётом механической жёсткости и степени организации D-периодичности методом атомно-силовой микроскопии.

    6. Отмечено, что введение изделия в эксперименте усиливает трофическое обеспечение тканей в зоне имплантации не только на границе имплантат – соединительнотканная основа конъюнктивы, но и на удалении до 400 мкм и более: увеличение количества сосудов в 1,2 раза (p < 0,05, t-критерий), удельной длины сосудов в 1,2 раза (p < 0,05, t-критерий), что достоверно выше, чем при имплантации отрезка сосуда пуповины без наполнения его нанодисперсной плацентой.

    7. Установлено, что введение биоимплантата с нанодисперсной плацентой усиливает регенеративные процессы в соединительнотканных структурах глазного яблока в 1,4 раза (p < 0,05, t-критерий) в сравнении с крупнодисперсным аналогом, а также индуцирует фибробластические процессы в интактной склере.

    8. В результате экспериментальных исследований показано, что введение биоимплантата с нанодисперсной плацентой экстрабульбарно оказывает положительное влияние на деформационно-прочностные показатели склеральной ткани. При этом достоверно улучшаются как прочностные (предел прочности, мПа) с 8,1 ± 0,3 до 10,6 ± 0,4 (p < 0,05, U-критерий), так и упругие характеристики (модуль Юнга, мПа) с 24,4 ± 4,4 до 29,6 ± 4,4 (p < 0,05, U-критерий) в сроки наблюдения до 3 месяцев.